杜冰
- 作品数:74 被引量:125H指数:6
- 供职机构:华东师范大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科学技术发展基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学理学机械工程更多>>
- 噬菌体抗体库中筛选抗GST单链抗体及其活性鉴定被引量:2
- 2010年
- 从Tomlinson(I+J)噬菌体抗体库中筛选获得了特异性抗GST蛋白的单链抗体(scFv),并在E.coliHB2151进行表达,经SDS-PAGE和Western blot分析表明,scFv可在细菌周质腔中进行可溶性表达,其分子量约为30 kD,与理论预期值相符;ELISA鉴定结果显示,周质腔中的scFv具有抗原结合功能,而且这种结合可以被GST纯蛋白所抑制,其IC50值约为3.07 ng/ml,证明该scFv具有特异性结合GST蛋白的活性。本研究表明,利用噬菌体抗体库技术可以不经过免疫就能获得高特异性的人源化抗GST蛋白的scFv。
- 唐喆伟韩红辉杜冰王群钱旻李恺
- 关键词:噬菌体抗体库单链抗体GST
- P2Y13激动剂在抗病毒感染中的应用
- 本发明提供了一种P2Y13激动剂在抗病毒感染中的应用,具体地,本发明提供了一种p2y13蛋白的激动剂、或p2y13基因的激动剂的用途,用于制备一药物,所述药物用于抗病毒感染,本发明通过激活P2Y13受体来保护机体抵抗病毒...
- 杜冰刘明耀张成飞席在喜
- 文献传递
- 肝癌特异性靶向肽A54与阿霉素的偶联物及其偶联方法和应用
- 本发明公开了一种肝癌特异性靶向肽A54与阿霉素的偶联物,其中,所述偶联物的结构式为结构式(1)或式(2),所述肝癌特异性靶向肽A54的氨基酸序列为NH<Sub>2</Sub>-AGKGTPSLETTP-COOH;所述阿霉...
- 孟娇岳苗苗杜冰任华钱旻
- 文献传递
- gp120对体内免疫细胞的作用被引量:5
- 2003年
- gp12 0是HIV病毒的衣壳蛋白 ,由基因env编码 ,其分子量为 12 0KD。在病毒侵入人体T细胞的过程中发挥重要的作用 ,同时它还存在游离态的形式 ,通过一种类似于超抗原作用的途径 ,在体内非特异性地激活一些主要的免疫细胞 ,从而大大增强了HIV对人体的危害作用。
- 杜冰钱旻
- 关键词:HIVGP120超抗原
- Bacillus subtilis RecQ酶精氨酸突变体表达纯化及活性检测
- 2013年
- RecQ解旋酶是生物分子代谢过程中重要的大分子物质,对保持遗传物质的稳定性具有重要作用。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)RecQ解旋酶中精氨酸可能在其对ATP水解和结合中起到重要的作用。通过PCR以Bacillus subtilis 168中抽提的基因组DNA为模板扩增得到大小为1.5kb的RecQ基因片段,并用重叠PCR定点突变法将该RecQ基因中的精氨酸残基(arg319和arg322)分别进行单突变和双突变,并将野生型和突变型基因克隆入原核表达载体pET24a(+)中,转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,所有目的蛋白主要以可溶形式存在于菌体中。优化表达条件后,经镍柱螯合亲和层析纯化获得纯度大于90%的目标蛋白质,检测野生型和突变型蛋白的ATP水解活性。结果表明,Bacillus subtilis RecQ解旋酶具有DNA依赖性和蛋白浓度依赖性的ATP水解活性。其arg319和arg322突变后,RecQ酶的ATP水解活性明显减弱,表明这两个精氨酸残基参与RecQ酶与ATP的相互作用。实验为RecQ解旋酶家族其他重要成员的活性功能研究提供了理论依据和重要参考。
- 吴海丽张三军杜冰钱旻任华
- 关键词:枯草芽孢杆菌蛋白表达蛋白纯化
- 体内筛选法得到的肝癌组织特异性粘附肽及其用途
- 一种肿瘤导向治疗中的能特异性结合肝癌组织/细胞的粘附肽以及该粘附肽的应用,属于分子药理学技术领域。本发明提供的三种肝癌组织/细胞的粘附肽的多肽序列为:序列一:NH<Sub>2</Sub>-A-G-K-G-T-P-S-L-...
- 钱旻周忠良章平杜冰于静郁萌
- 文献传递
- P2Y14基因敲除小鼠的构建及免疫功能初探
- 2022年
- 为探讨嘌呤能受体P2Y, G蛋白偶联,14 (purinergic receptor P2Y, G-protein coupled, 14, P2Y14)在免疫和炎症反应中的作用,采用CRISPR/Cas9技术构建P2Y14基因敲除(P2Y14 knockout,P2Y14 KO)小鼠,采用PCR和测序方法鉴定子代小鼠的基因型,评估小鼠的生长发育状况;FACS检测小鼠胸腺和脾脏T、B细胞及其亚群的百分比;实时荧光定量PCR法和ELISA检测LPS作用下野生型(wild type, WT)组和P2Y14KO组小鼠腹腔渗出巨噬细胞(peritoneal exudative macrophage, PEM)炎症相关因子的mRNA和蛋白水平变化。结果显示,该方法成功构建得P2Y14 KO小鼠;与WT小鼠相比,P2Y14 KO小鼠的体质量以及肝、脾、肾脏质量和组织形态结构无明显差异,但胸腺质量显著增加(P<0.01),胸腺CD3~+、CD8~+T细胞百分比显著增加(P<0.05,P<0.01),脾脏淋巴细胞及其亚群无明显差异。LPS刺激条件下,P2Y14 KO小鼠PEM中炎性因子IL-6和趋化因子CCL2在mRNA和蛋白水平上与WT小鼠相比显著降低(有P<0.01,P<0.001)。以上结果表明,该研究成功构建了P2Y14KO小鼠并发现该基因缺失可促进胸腺中T细胞的分化和发育,同时显著减少PEM炎性因子的释放。
- 卢秉霖秦居亮车安然钱春梅岑玉蓉杜冰王秦
- 关键词:G蛋白偶联基因敲除免疫反应炎性因子
- 体内筛选法得到的肝癌组织特异性粘附肽及其用途
- 一种肿瘤导向治疗中的能特异性结合肝癌组织/细胞的粘附肽以及该粘附肽的应用,属于分子药理学技术领域。本发明提供的三种肝癌组织/细胞的粘附肽的多肽序列为:序列一:NH<Sub>2</Sub>-A-G-K-G-T-P-S-L-...
- 钱旻周忠良章平杜冰于静郁萌
- 文献传递
- 一种新型肝癌免疫毒素的表达、纯化及初步鉴定被引量:11
- 2008年
- 从噬菌体随机肽库中筛选获得了与肝癌细胞特异性结合的12-肽A54,将其与蜂毒肽(melittin,Mel)编码基因连接后,插入质粒载体pET-32a(+)中,构建成A54-Mel与硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)及六聚组氨酸(6×His)的融合表达载体pET32-A54-Mel。将重组质粒转化E.coliBL21(DE3)表达后,获得可溶性表达产物,经Western blot鉴定,表达产物能与蜂毒肽特异性抗体反应。表达菌经超声裂解后,上清液用Ni+离子亲和层析法纯化得到了融合蛋白(Trx-A54-Mel),经肠激酶裂解、再次Ni+离子亲和层析后得到纯度大于95%的肝癌特异性免疫毒素A54-Mel。经细胞ELISA和四氮唑盐(MTT)法检测,发现A54-Mel在体外具有一定的肿瘤细胞特异性靶向及杀伤活性,为新型免疫毒素在肝癌靶向治疗中的研究奠定了基础。
- 王媛媛韩红辉杜冰钱旻
- 关键词:蜂毒肽免疫毒素纯化
- 内源性危险信号UDP及其受体P2Y6的抗病毒免疫功能研究
- 背景:病毒性疾病严重危害人类身体健康,而机体的固有免疫系统是抵抗病毒感染的第一道防线,因此深入了解机体的抗病毒免疫调控机制对于病毒性疾病的预防和治疗具有十分重要理论意义.近年来的研究发现,机体在损伤及感染的情况下会释放核...
- 李瑞梅谭炳合张娜任华钱旻杜冰
- 关键词:UDPVSV危险信号