杨玉梅
- 作品数：9 被引量：108H指数：3
- 供职机构：云南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学更多>>
- H~＋焦磷酸酶促进植物磷利用的研究进展被引量：2
- 2015年
- 植物的生长发育离不开磷这种大量营养元素,但其利用过程中仍旧存在几大主要问题:磷短缺、磷污染以及土壤有效磷含量低,而通过基因工程策略提高植物磷利用效率无疑是最有效的应对解决途径。其中,由植物质子焦磷酸酶(H+-PPase)介导的成效尤为突出,各种H+-PPase过表达转基因植株具有多方面且几乎一致的优异表型(包括耐低磷,耐盐,抗旱等),这可能与H+-PPase不同的细胞定位及其多功能性有关,并且涉及到质膜H+-ATPase的中间作用以及磷/糖的信号调控、代谢和转运。本文着重对H+-PPase与植物磷胁迫的内在关系、促进植物磷利用的研究成效及其可能的作用机理等方面进行综述,以期为H+-PPase在植物抗逆基因工程中发挥更大作用提供理论依据。
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- 关键词：基因工程
- 植物细胞质APX1的研究进展被引量：3
- 2015年
- 活性氧(ROS)在植物生长发育和对各种逆境适应过程中扮演双面角色:高浓度下引起氧化损伤、低浓度下发挥第二信使作用,其角色转换取决于其产生和清除之间的平衡状态,并严格受控于体内一套由酶和非酶组分构成的双元抗氧化系统。在抗氧化酶类中,位居细胞质的抗坏血酸过氧化物酶1(APX1)在胞内氧化还原态水平调控中起到关键作用,在ROS清除网络中居于核心地位,已被视作ROS功能的重要杠杆,并因而获得相对最广泛的研究关注。着重介绍了其酶学特性、基因表达和调控、生物学作用及目前主要在植物抗逆基因工程中的应用研究进展,以期为日后植物ROS和抗逆性研究提供有用信息和思路。
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- 关键词：抗逆性基因工程
- 原核生物膜整合焦磷酸酶的研究进展被引量：1
- 2014年
- 早期生命可能是以焦磷酸(PPi)而不是三磷酸腺苷(ATP)为能源。位于生物膜上偶联PPi水解和质子(H+)跨膜转运的H+-焦磷酸酶(PPase)在原核生物、植物和原生动物中早已广被人知和大量研究。近期则发现了两种与之进化相关且在原核生物中广泛分布的、分别具有Na+泵和Na+,H+泵功能的膜整合Na+-PPase和Na+,H+-PPase,它们水解PPi需要Na+参与并被K+激活。另外,越来越多的研究逐步揭示出膜PPase中决定阳离子转运特异性的主要因子,而且最近对H+-PPase和Na+-PPase的三维结构解析也是膜离子泵结构生物学上的重大突破。本文主要以原核生物Na+-PPase和Na+,H+-PPase为重心综述了目前对膜PPase的结构、转运机制、进化和生物学意义等几方面的研究情况,并对其在创建转基因抗逆物种中的应用前景进行了展望。
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- 关键词：焦磷酸原核生物
- “四段六步”教学模式在中学生物七年级下册教学中的应用研究
——以昭通市彝良县柳溪中学教学为例
- 本课题旨在利用参与式教学理论、合作学习、自主学习、和人本主义教育理念解释我校实行的“四段六步”教学模式的理论基础,并以此教学模式在初中生物教学中应用,以新人教版《七年级生物下册》内容——生物圈中的人,人的起源与发展、合理...
- 杨玉梅
- 关键词：教学模式生物教学
- 文献传递
- 植物活性氧的产生及其作用和危害被引量：96
- 2014年
- 活性氧(ROS)是一类由O2转化而来的自由基或具有高反应活性的离子或分子。植物消耗的O2约有1%在叶绿体、线粒体、过氧化物酶体等多种亚细胞单位中被转化成了ROS。ROS有益或有害取决于它在植物体内的浓度。低浓度的ROS作为第二信使能在植物细胞信号转导途径中介导多种应答反应,高浓度的ROS则引起生物大分子的氧化损伤甚至细胞死亡。植物体内ROS产生和清除之间的平衡十分重要,并由一套有效的酶促和非酶促抗氧化系统来监控。该文主要系统介绍了植物ROS的种类、产生部位、在信号转导中的作用及其对植物细胞造成的主要伤害等方面的研究进展,为利用基因工程手段来提高植物对环境胁迫的抗性提供信息和思路。
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- 关键词：第二信使
- 蓝藻橙色类胡萝卜素蛋白的基因克隆及在大肠杆菌中的异源表达和功能分析被引量：3
- 2016年
- 旨在体内证明蓝藻橙色类胡萝卜素蛋白（OCP）具备不依赖类胡萝卜素的单线态氧（~1O_2）清除功能。通过PCR扩增蓝藻OCP基因,对其进行原核诱导表达,并通过细菌点板和生长曲线测定法检验它在大肠杆菌中的抗~1O_2活性。结果表明,直接从蓝藻水体提取的宏基因组中成功扩增得到OCP基因SyOCP,其编码区大小为954 bp。生物信息学分析表明,SyOCP来源于主要蓝藻种类——集胞藻（Synechocystis sp.PCC 6803）。经IPTG诱导,SyOCP基因在大肠杆菌中获得了高水平的可溶性表达。另外,异源表达SyOCP的重组大肠杆菌对常见的~1O_2光敏诱发剂染料——亚甲基蓝的耐受性得到了显著增强。蓝藻OCP（不结合类胡萝卜素）内在的抗~1O_2功能在大肠杆菌中得到了体内验证。
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- 关键词：蓝藻宏基因组单线态氧亚甲基蓝
- 人肠道甲基戊糖梭菌膜整合焦磷酸酶的基因克隆和抗盐功能分析
- 地球早期生命和逆境条件下的现代生物似乎依赖焦磷酸(PPi)而不是腺苷三磷酸(ATP)作为主要能源来维持存在。其中,由PPi驱动的二聚体形式膜整合焦磷酸酶(PPase)起着重要作用,它包括H+-PPase、Na+-PPas...
- 杨玉梅
- 关键词：基因克隆转基因烟草抗盐性
- 文献传递
- 甲基戊糖梭菌膜整合焦磷酸酶提高转基因烟草的抗旱性被引量：1
- 2017年
- 由焦磷酸(PPi)驱动的膜整合焦磷酸酶(PPase)在生物适应逆境方面可能起着重要作用,包括H^+-PPase、Na^+-PPase和Na^+,H^+-PPase三个亚家族。相比于H^+-PPase,其它两个亚家族PPase近年来才在原核生物(特别是动物肠道菌)中被发现,有关它们的应用研究更是匮乏。通过两轮巢式PCR从人肠道宏基因组中扩增得到甲基戊糖梭菌膜整合焦磷酸酶(CmPP)全长基因。序列分析表明该基因含有一个完整的ORF(长2 100 bp,编码一个699 aa的蛋白质,G+C含量为59.9%,碱基分布均衡)。膜拓扑学结构预测CmPP是一个由16个跨膜α螺旋组成的膜蛋白,与目前已鉴定过的膜PPase跨膜结构相符。序列比对分析推测CmPP属于K+依赖型Na^+,H^+-PPase亚家族成员。另外,通过农杆菌转化获得了CmPP转基因烟草。对其子一代植株的抗旱分析发现,在干旱胁迫条件下CmPP转基因株系的干物质含量、总叶绿素含量和根系活力均下降,而其叶片MDA含量和电解质渗透率均升高,但相同胁迫下的变化程度都显著低于野生型烟草。这些结果表明CmPP基因的导入能够有效提高烟草的抗旱能力。
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- 关键词：基因克隆转基因烟草抗旱性
- 土壤假单胞菌亚磷酸盐脱氢酶的基因克隆和原核表达及其酶活分析被引量：5
- 2018年
- 亚磷酸盐脱氢酶(PTDH)以NAD+为辅助因子催化亚磷酸盐氧化生成正磷酸盐和NADH,在辅酶再生和基于亚磷酸盐的磷利用等方面有着潜在重大的应用价值。以土壤宏基因组DNA为模板,采用两轮PCR扩增得到全长亚磷酸盐脱氢酶基因PsPtx。通过酶切将它克隆到质粒pET32a(+)中,构建了原核表达载体pET(PsPtx)。序列分析表明,PsPtx基因的完整编码区大小为1 011 bp,其推导蛋白由336个氨基酸组成,理论分子量大小为36.5 kD。保守结构域预测分析表明PsPtx编码蛋白属于亚磷酸盐脱氢酶,含有保守的NAD+结合基序和催化功能残基。系统进化树分析显示PsPtx基因来源于一无法确定种名的土壤假单胞菌。另外,PsPtx基因经IPTG诱导能在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,重组PsPtx蛋白用组氨酸标签亲合层析纯化,其以亚磷酸钠盐为底物的酶比活性为3.75 U/mg。该PsPtx功能基因的获得为其后续应用研究打下了必要的基础。
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- 关键词：基因克隆原核表达
