林月霞
- 作品数：28 被引量：91H指数：5
- 供职机构：广东药学院生命科学与生物制药学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学经济管理更多>>
- 人乙酰肝素酶基因真核表达载体的构建与表达
- 2011年
- 目的构建人乙酰肝素酶基因(HPA)的真核表达载体pEGFP-N1/HPA,初步探讨其在人胚肾细胞293T中的表达情况。方法以pOTB7/HPA质粒为模板,PCR扩增HPA基因,经限制性内切酶酶切后,连接到pEGFP-N1载体上,并对重组表达载体pEGFP-N1/HPA进行酶切与测序鉴定。用脂质体lipefectmine2000为介导转染至293T细胞中,观察该基因在293T细胞中的表达情况。结果经限制性内切酶酶切鉴定及测序分析证实pEGFP-N1/HPA基因在771 bp处碱基c突变成t;在919 bp处碱基a突变成g,两处突变均为同义突变。该基因转染293T细胞48 h后,在荧光显微镜下可见转染的293T细胞有绿色荧光蛋白表达。结论成功构建人乙酰肝素酶基因的真核表达载体pEGFP-N1/HPA,并在人293T细胞中成功表达。
- 林月霞吴志坚袁茵董斌田素娟
- 关键词：真核表达载体转染
- TCR Vβ7.1基因对IL-12基因修饰乳腺癌细胞的识别和杀伤作用被引量：1
- 2003年
- 目的 :探讨TCRVβ7 1基因与IL 12基因在乳腺癌细胞株MCF 7 S识别和杀伤中的效应机制和相互作用。 方法 :用脂质分别包裹TCRVβ7 1基因和IL 12基因并转染健康人PBMC和乳腺癌细胞株MCF 7 S ,流式细胞仪检测TCRVβ7 1基因表达 ,ELISA法检测IL 12基因在MCF 7 S中的表达及淋巴细胞 肿瘤细胞共培养上清中IFN γ和IL 4水平 ,改良MTT法检测TCRVβ7 1基因修饰PBMC对IL 12基因转染前后MCF 7 S的杀伤活性。 结果 :TCRVβ7 1基因和IL 12基因在PBMC和乳腺癌细胞MCF 7 S中稳定表达 ;ELISA法检测提示IL 12基因修饰前后肿瘤细胞 淋巴细胞共培养上清中IFN γ和IL 4水平有显著性差异 ;细胞毒活性检测表明IL 12基因修饰可明显增强TCRVβ7 1基因对乳腺癌细胞株MCF 7 S的杀伤作用。 结论 :TCRVβ7 1基因修饰CTL及IL 12基因修饰乳腺癌细胞株共培养 ,提高了CTL的杀伤作用 ,说明TCR识别基因与杀伤基因在抗肿瘤效应中具有协同作用。
- 胡丽彩黄树林邱曙东罗利琼林月霞
- 关键词：IL-12基因乳腺癌细胞杀伤作用
- TCRVβ7.1基因修饰T细胞对乳腺癌细胞杀伤作用的研究被引量：4
- 2003年
- 目的:观察TCRVβ-1基因转染前后正常人外周血淋巴细胞对乳腺癌细胞株杀伤活性的影响。方法:脂质体包裹pcDNA3.1Vβ7.1后转染健康人PBMC,流式细胞仪检测pcDNA3.1Vβ7.1基因表达,改良MTT法检测TCRVβ-1基因转染前后正常人外周血淋巴细胞对乳腺癌细胞株杀伤活性。结果:TCRVβ-1基因转染可显著增加正常人PBMC该基因表达,转染前后正常人外周血淋巴细胞对乳腺癌细胞株杀伤活性有显著性差异。结论:用TCR基因修饰可明显提高正常人PBMC对乳腺癌细胞杀伤作用。
- 胡丽彩邱曙东黄树林刘璋林月霞罗利琼
- 关键词：乳腺癌外周血淋巴细胞流式细胞仪基因修饰基因转染
- 广州市老年人伤害原因的调查分析被引量：14
- 2000年
- 以整群抽样方法对广州市部分医院 6 0岁及以上的住院病人和干休所的老人 90 0人进行伤害原因调查。结果 :共发生 14种伤害 ,其总发生率为 53.77% ,前 6种伤害依次为 :交通伤(11.0 7% )、烧烫伤 (5.94 % )、碰撞伤 (5.2 5% )、刀或锐器伤 (4 .4 5% )、坠落 (3.0 8% )、动物咬伤(1 96 % )。女性发生率是男性的 1.2 2倍 ,且女性跌伤较多 (34.6 8% ) ,男性则以交通伤发生为多(13 55% )。随着年龄增加 ,伤害发生率也增加。跌伤的平均损失为 2 4 6 97.2 3元 ,交通伤平均损失94 99.6 2元。认为伤害严重威胁老年人的生命安全 ,应针对伤害原因采取有效措施。
- 张冠群林月霞汪保国
- 关键词：发生率老年人
- TCR Vβ7.1基因转染外周血单个核细胞后表达及抗癌作用被引量：2
- 2005年
- 目的研究TCRVβ7.1基因在恢复肝癌病人细胞毒性T细胞(CTL)功能方面的作用。方法以RTPCR方法扩增TCRVβ7.1基因并构建Vβ7.1-pLXSN表达载体。重组体以脂质体转染外周血单个核细胞(PBLs),流式细胞仪检测转染效率,DNALadder实验和透射电镜观察转染后T细胞诱导肿瘤细胞凋亡情况。结果TCRVβ7.1基因转染PBLs后可有效表达并诱导肿瘤细胞凋亡。结论该方法为T细胞介导的肿瘤基因治疗提供了有效途径。
- 王辉罗利琼林月霞肖兰凤
- 关键词：TCR转染凋亡
- McAb共刺激诱导TCR Vβ基因表达与抗肿瘤研究和应用
- 黄树林肖兰凤符生苗明利华邓立群罗利琼林月霞王宇田王辉
- 该课题利用PBLs、肝癌细胞系（BEL-7402）、抗CD3、CD4、CD8、CD28、CD80、CD2、CD58等McAb，联合应用细胞培养法、流式细胞术、RT-PCR、Southern杂交法、Western印记法、透...
- 关键词：
- 关键词：MCAB共刺激TCRVΒ基因抗肿瘤肝癌
- CpG ODN刺激PBMC后作用于肝癌细胞BEL-7402杀伤活性的检测被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨合成含CpG基序的寡核苷酸 (CpGODN)在肿瘤免疫治疗中的研究。方法 :将CpGODN刺激体外培养的人外周血单个核细胞 (PBMC)后作用于肝癌细胞株 (BEL 74 0 2 ) ,采用MTT法检测其杀伤活性。结果 :加CpGODN组较单独PBMC组杀伤活性明显增高 (P <0 .0 5 )。结论 :CpGODN可刺激PBMC增殖 ,提高PBMC的杀伤活性 。
- 罗利琼林月霞王辉黄树林
- 关键词：CPGODN肝癌细胞BEL-7402
- TCRVβ基因亚家族的优势取用和PTK信号传导途径的激活及体外对肝癌细胞凋亡的诱导被引量：14
- 2001年
- 目的 :研究特异识别肝癌细胞株肿瘤相关抗原的TCRVβ基因亚家族的优势取用及对肝癌细胞凋亡的诱导。 方法 :流式细胞术检测淋巴细胞表型 ,RT PCR和Southern印迹分析TCRVβ基因亚家族表达水平 ,Westernblot检测PTK含量。透射电镜观察凋亡细胞超微结构。结果 :McAb共刺激T细胞与肝癌细胞混合培养后 ,T细胞表面CD3和CD8分子表达量明显升高 ,而CD4无明显变化。TCRVβ7选择性扩增 ,表达水平由 5 %升高至 13 %～ 2 5 % ,且在第 4天达到高峰。同时相应的PTK信号传导途径被激活 ,其含量由 11%升至 5 8% ,亦在第 4,5天达到高峰。以抗CD3+CD2 8,抗CD2 8+CD80 ,抗CD2 +CD5 8共刺激的淋巴细胞均在体外诱导了肝癌细胞的凋亡。结论 :TCRVβ7为特异的肿瘤抗原识别受体 ,TCR CD4复合物与抗原结合后激活PTK信号传导途径 。
- 黄树林周继斌陈维春林月霞邓涛罗利琼肖兰凤杨红
- 关键词：细胞凋亡共刺激TCRVΒ基因PTK肝癌细胞信号传导
- 人乙酰肝素酶稳定表达CHO细胞株的建立
- 2014年
- 目的在CHO细胞中表达人乙酰肝素酶(HPA)并建立该酶的稳定表达细胞株。方法在脂质体的介导下,用本实验室构建的p EGFP-N1-HPA重组质粒转染CHO细胞,经G418筛选稳定表达的细胞。通过荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白的表达情况,同时通过RT-PCR检测HPA基因转录水平、免疫细胞化学法检测HPA蛋白表达、MTT方法测定外源基因对CHO细胞增殖的影响。结果荧光显微镜下可见转染的CHO细胞有绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR证实转染细胞中存在HPA基因mRNA的表达,成功获得HPA的稳定表达细胞株。结论成功建立人HPA稳定表达CHO细胞株,为该酶的功能研究奠定了基础。
- 林月霞陈咏娴董斌田素娟
- 关键词：乙酰肝素酶基因转染绿色荧光
- McAb共刺激PBLs淋巴细胞在培养体系中的状态及超微结构的研究
- 2000年
- 通过用抗CD3,CD2 8+CD80McAb激活健康人的PBLs,并以PHA ,IL 2 ,PBLs为对照组 ;对各组不同时间段的淋巴细胞超微结构进行观察。结果提示 :CD3及CD2 8+CD80除刺激淋巴细胞增殖外 ,也能使淋巴细胞活化 ;细胞表现为胞体增大 ,细胞器增多 ,具有粗大的绒毛和突出伪足 ,并可见单核细胞吞噬活跃。
- 郭伟鹏张康林青陈永雄李俊云罗利琼林月霞邹奕
- 关键词：MCAB共刺激淋巴细胞超微结构PBLS免疫疗法
