柯琼
- 作品数：15 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 卵巢滤泡膜干细胞及其分离方法、培养方法和应用
- 本发明提供一种卵巢滤泡膜干细胞及其分离方法、培养方法和应用，涉及干细胞与组织工程技术领域。卵巢滤泡膜干细胞的分离方法，包括以下制备方法：获取卵巢组织：从生育力和卵巢功能正常，年龄为4～10岁的雌性食蟹猴，获取卵巢组织，剥...
- 项鹏柯琼陈洪李伟强
- 克氏综合征胚胎干细胞的建系及鉴定被引量：2
- 2012年
- 背景:克氏综合征是一种染色体异常引起的先天性疾病,对于该疾病发生和染色体异常的分子机制还未明确。目的:建立克氏综合征的胚胎干细胞系,并鉴定其是否具有正常胚胎干细胞特性。方法:胚胎培养至囊胚,经免疫外科法分离内细胞团培养获得人胚胎干细胞系。Giemsa染色鉴定核型,免疫荧光染色及体外、体内分化实验鉴定其生物学特性。结果与结论:从5个胚胎中获得1株克氏综合征胚胎干细胞系,该细胞系具有47,XXY核型。经鉴定该细胞具有碱性磷酸酶活性,并表达Nanog、OCT-4、SSEA-4、Sox2、TRA-1-60等胚胎干细胞特异标记物,可形成拟胚体,并在体内外可以分化为三胚层的细胞类型。该细胞株的建立为研究该遗传病的发病机制及性染色体的功能提供了一个良好的细胞模型。
- 柯琼黄敏珍李伟强王涛项鹏
- 关键词：克氏综合征核型人胚胎干细胞染色体异常干细胞
- Nestin-GFP小鼠胚胎干细胞的建系及体外神经分化被引量：1
- 2011年
- 【目的】建立Nestin-GFP转基因小鼠的胚胎干细胞(mESC)系,并观察其示踪ES细胞系的神经分化过程。【方法】将E3.5的Nestin-GFP小鼠囊胚接种于小鼠胚胎成纤维细胞上(MEF经γ射线照射失去增殖活性)。4～6d后将自囊胚长出的内细胞团(ICM)继续培养并传代扩增,检测所得细胞Oct-4、SSEA-1和AKP等胚胎干细胞特异性标志物的表达及在体内外向三胚层分化的能力;之后,诱导细胞向神经元样细胞及神经胶质样细胞分化,利用免疫荧光检测其标志性抗原。【结果】免疫组化可见Nestin-GFP小鼠胚胎干细胞表达未分化细胞特异性标志Oct-4、SSEA-1,AKP染色呈强阳性,并具有向体内外三胚层分化潜能;在体外诱导其向神经分化,第6d可见到明显的绿色荧光,并与免疫组化Nestin表达部位基本吻合。第12d及第16d分别可见神经元及神经胶质细胞特异性标志物表达,而此时Nestin的表达较前明显下降。【结论】成功建立了Nestin-GFP小鼠胚胎干细胞系,该细胞具有自我更新的特性及多向分化潜能,并可用于在体外更直观的监测神经分化的阶段性变化并由此进行调控。
- 王紫菲赖文玉柯琼李付贵王涛张秀明李伟强项鹏
- 关键词：NESTIN胚胎干细胞绿色荧光蛋白神经分化
- 半成熟树突状细胞与Tregs水平对ESCs分化的肝细胞移植小鼠模型免疫耐受的影响被引量：2
- 2017年
- 目的观察半成熟树突状细胞（smDCs）在小鼠胚胎干细胞（ESCs）来源的肝细胞移植中诱导免疫耐受的作用及机制，并分析smDCs与调节性树突状细胞（regDCs）之间的关系。方法将绿色荧光蛋白（GFP）标记的129系小鼠ESCs按前期方法向肝细胞诱导分化，同时诱导129系小鼠骨髓单核细胞向smDCs和regDCs分化。将smDCs、regDCs分别预先输入BALB／c小鼠体内，3d后再将ESCs分化的肝细胞移植入BALB／e小鼠肝实质内。观察移植细胞生存时间、生长状况、局部免疫反应情况；检测分析受体血CD4＋T细胞Foxp3表达情况等。结果对照组小鼠肝实质内移植细胞仅生存1周，smDCs组与regDCs组生存时间可达4周，移植部位CD3＋T细胞浸润较对照组明显减轻；smDCs与regDCs在形态和表型方面相似，二者均中度表达MHC-11、CIMO、CD80、CD86；smDCs组受体小鼠外周血CD4＋T细胞Foxp3表达量明显升高由1．11％上升至5．38％；regDCs组Foxp3表达量亦有所升高达3．87％。结论smDCs能诱导ESCs源性肝细胞移植耐受，其机制可能与Foxp3＋ Tregs产生相关。smDCs与regDCs作用类似，且均中度表达MHC．Ⅱ、CD40等，推测为同一类型的耐受性树突状细胞。
- 章诚廖文尉蔡炳刘芙蓉柯琼朱晓峰何晓顺胡安斌
- 关键词：肝细胞移植调节性树突状细胞
- 酪氨酸血症I型猴模型及其建立方法和应用
- 本发明涉及一种酪氨酸血症I型猴模型及其建立方法和应用，属于医学动物疾病模型技术领域。该方法包括FAH基因TALEN靶点的设计，FAH基因敲除TALEN质粒的构建，基因打靶RNA片段的获取、筛选及FAH基因敲除猴模型的制备...
- 项鹏柯琼赖兴强陈洪李伟强毛富祥
- 人睾丸间质干细胞的分离与培养方法
- 本发明公开了一种人睾丸间质干细胞的分离与培养方法。本发明研究提出一种人睾丸组织中特异表达于人睾丸间质干细胞(SLC)的特异性标志物，即CD248蛋白，以用于从人睾丸组织识别和分离高纯度的人SLC。并以此建立了从人睾丸组织...
- 项鹏邓春华夏凯柯琼
- 文献传递
- 一种猴睾酮缺乏模型的建立方法
- 本发明提供了一种猴睾酮缺乏模型的建立方法，其采用向成年猴睾丸动脉注射二甲基磺酸乙烷结合阻断精索血流的方式。本发明提供了安全、稳定的睾酮缺乏动物模型。
- 项鹏柯琼夏凯邓春华毛富祥
- 文献传递
- 一种多能干细胞来源肾脏间充质干细胞的制备方法及其应用
- 本发明公开了一种多能干细胞来源肾脏间充质干细胞的制备方法及其应用，该制备方法是将多能干细胞解离，经历三个阶段诱导为中间中胚细胞后，在间充质干细胞培养液中连续传代培养获得。本发明不但解决了其他非限定诱导方法诱导的各中胚层细...
- 项鹏李伟强韦伊利柯琼
- 基于视觉的囊胚自动注射过程中的囊胚检测及结构识别
- 2011年
- 为实现囊胚自动注射过程中的囊胚位姿信息获取,研究了一种基于视觉的囊胚检测及其内部结构识别的方法。首先用Hough变换和聚类方法检测圆,实现囊胚的位置定位;然后等扇区划分囊胚区域,统计各扇区灰度特征,判断发育成熟度;最后根据发育成熟囊胚中内细胞团区域平均灰度偏差最大的特点予以识别。实验结果显示,该方法对囊胚的检测和结构识别的正确率分别大于90%和80%,表明其在囊胚检测和内部特征结构识别中的有效性。
- 杜启亮蓝雪松柯琼田联房
- 关键词：机器视觉
- 一种躯干神经嵴来源骨髓间充质干细胞的制备方法及用途
- 本发明公开了一种躯干神经嵴来源骨髓间充质干细胞及其制备方法，所述躯干神经嵴来源骨髓间充质干细胞由多能干细胞诱导，通过特定诱导培养液严格限定其分化路径，先后经历神经中胚层祖细胞和躯干神经嵴细胞阶段后得到。结果表明，本发明得...
- 项鹏李伟强王慧艳韦伊利柯琼
