武亮
- 作品数：5 被引量：28H指数：3
- 供职机构：南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划江苏省科技厅基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 二倍体马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ基因的克隆、序列分析及表达载体的构建被引量：6
- 2005年
- 根据GenBank发表的四倍体马铃薯栽培种(Solanum.tuberosum)来源的马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ基因序列,用PCR方法从二倍体马铃薯IVP101(Solanum.phurejia)cDNA文库和基因组DNA扩增得到马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ的cDNA和DNA,命名为PINⅡ2x。测序表明,PINⅡ2x基因组DNA全长580bp,含有一个115bp的内含子,cDNA有462bp(除去终止密码子)。推测的PINⅡ2x分子量是16.6kD,等电点6.08。与其他马铃薯蛋白抑制剂Ⅱ同源性比较表明,核苷酸同源性高达88%;推测的氨基酸序列同源性为93%,并具有相同的活性中心。RT PCR表明,PINⅡ2x的mRNA在叶片中具有强烈的伤害诱导表达特性。同时,构建了分别以水稻ActⅠ启动子和玉米Ubi启动子驱动PINⅡ2x基因的双元载体。
- 卜庆云武亮杨世湖万建民
- 不同启动子驱动下马铃薯蛋白酶抑制剂PinⅡ转基因水稻的遗传、表达和对粘虫抗性分析被引量：4
- 2006年
- 以不同启动子驱动的马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ基因(PinⅡ-2x,PinⅡ-4x)转基因水稻为材料,经潮霉素抗性、PCR和Southern blot等检测对转基因水稻后代进行了遗传分析。结果显示:外源基因在68.4%的转基因植株中符合孟德尔遗传模式,单拷贝植株率为63.6%。转基因植株后代的PinⅡ蛋白活性测定结果表明:ActI和Ubi驱动的PinⅡ-2x转基因水稻植株中,每克鲜叶片的PinⅡ蛋白含量为160μg和176μg,而由PIN5′驱动的PinⅡ-4x为104μg,对照水稻仅为20μg。ActI和Ubi驱动的PinⅡ表达产物对胰蛋白酶活性抑制程度分别达到37.7%和43.1%,明显高于PinⅡ自身启动子PIN5′(29.2%)。叶片饲养粘虫幼虫的实验表明:转基因植株叶片对粘虫有抗性,但抗性达不到显著水平,且启动子效率、PinⅡ表达量与抗粘虫性之间也没有相关性。
- 武亮卜庆云周明杨世湖万建民
- 关键词：活性粘虫
- pib基因启动子及其诱导启动性初探被引量：15
- 2006年
- 将pib基因上游5.7 kb区段取代pCAMBIA1301中gus基因上游的35S启动子,构建了pib拟启动区-GUS+35S-hpt植物表达载体pNAR604。经农杆菌介导转化水稻成熟胚愈伤,获得了转基因抗潮霉素愈伤和36株转基因水稻植株。转基因抗性愈伤和转基因植株根的组织化学GUS活性检测表明,光照培养下的抗性愈伤和转基因植株根不能使X-gluc显色,而暗处理24 h后的抗性愈伤和定植后转基因植株的根能使X-gluc显色。转基因植株GUS荧光定量分析结果表明,GUS表达具有器官特异性,黑暗处理前根的GUS活性最高、茎次之,分别是叶片的7倍和3倍,叶片中仅有痕量本底。24 h黑暗处理后根、茎、叶中GUS活性都有增加,且叶片中的增加比例最大,其活性仅次于根。5 mmol/L水杨酸和0.3 mol/L NaCl叶面喷施转基因植株24 h后叶片中GUS活性分别为处理前的2.7和3.6倍。初步确定pib拟启动区是一个诱导型启动子。黑暗、水杨酸和NaCl能诱导该启动子启动活性。
- 李婵娟杨世湖武亮万建民
- 关键词：水稻GUS活性
- 不同启动子驱动下马铃薯蛋白酶抑制剂PinⅡ转基因水稻的遗传、表达和抗虫性分析
- 蛋白酶抑制剂是一类广泛存在于植物中的蛋白质。它不仅是植物的储藏蛋白，而且是植物中重要的防御蛋白。马铃薯蛋白酶抑制剂PinⅡ属于丝氨酸蛋白酶抑制剂家族，可以同时抑制胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶活性，因而对害虫产生广谱和稳定抗性。...
- 武亮
- 关键词：转基因水稻马铃薯抑制活性
- 文献传递
