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沈琲
作品数:
2
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供职机构:
中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
程小款
中国医学科学院北京协和医学院基...
衡凤燕
中国医学科学院北京协和医学院基...
吴宁华
中国医学科学院北京协和医学院基...
刘立德
中国医学科学院北京协和医学院基...
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1篇
生物化学杂志
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1999
1篇
1990
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人IL-2Rα链基因负调控元件结合蛋白的分离纯化
1999年
淋巴细胞表面高亲和力IL-2R的出现受IL-2Ra基因的诱导表达控制,而IL-2Ra链基因的表达受到严格的时空的调控。在IL-2Ra基因上游除存在正调控元件外还存在负调控元件(-391TCATCCCAGG-381,NRE)及其下游不完全反转重复序列(-153CCTGGTTTGA-143NIRS)。本组曾通过紫外交联实验发现Jurkat细胞有一种蛋白质与NIRS和NRE特异结合。本文利用肝素-亲和柱层析及序列特异DNA亲和层析认1010Jurkat细胞中获得了分子量约为75kD的NRE特异结合蛋白。EMSA实验表明,纯化后的蛋白与NRE所形成的结合物能被NIRS及HIVLTR的负调控元件所竞争,提示该NRE结合蛋白不仅可能参与IL-2Ra基因的转录调控,而且可能在HIV基因表达过程中起某种作用。
张玉健
邢光新
莽锐
程小款
衡凤燕
吴宁华
沈琲
关键词:
结合蛋白
DNA
白细胞介素2受体α链基因转录起始点和5'调控区结合蛋白的初步研究
1990年
借助于5'和3'末端删切后重建的IL-2R a链基因调控区次级克隆,在体外合成有放射性同位素参入的反意义RNA探针与总RNA进行液相杂交,结果表明TPA或PHA分别活化的T细胞在IL-2R a链表达过程中都在不同程度上有选择地利用了调控区内分别为-58(5')和+1(3')位两个转录起始点中3'转录起始点。热休克使PHA活化细胞更明显地利用+1位点。PHA诱导Jurkat细胞表达IL-2RamRNA斑点杂交证实,Jurkat细胞在活化16小时表达IL-2Ra基本达到高峰,至24小时已明显下降。根据这一规律提取PHA诱导活化15小时的Jurkat细胞S100和NE,进行有关结合蛋白的研究,初步结果显示磷酸纤维素柱的KCI洗脱组分中存在着DNA结合蛋白,有关结合蛋白性质的研究正在进行中。
刘立德
沈琲
关键词:
结合蛋白
白细胞介素2
受体
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