洪志华
- 作品数：6 被引量：76H指数：4
- 供职机构：苏州大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目苏州市社会发展科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 体外诱导骨髓间充质干细胞向肾小管上皮细胞的分化被引量：14
- 2007年
- 目的:探讨体外诱导骨髓间充质干细胞向肾小管上皮细胞分化的可行性。方法:实验于2004-10/2005-12在苏州大学儿科研究所和苏州大学附属儿童医院骨科实验室完成。骨髓间充质干细胞特性实验:①将2只4周龄SD大鼠断颈处死,无菌条件下取股骨、胫骨,去除其干骺端,暴露骨髓腔,DMEM培养液冲洗,混匀后用密度为1.077g/L淋巴细胞分离液分离。取单个核细胞层接种50mL细胞培养瓶进行培养,3d后首次换液,待10～14d细胞生长到80%～90%融合时以胰蛋白酶-乙二胺四乙酸消化传代。②采用免疫荧光法测定骨髓间充质干细胞表面CD44与Vimentin的表达情况;应用二苯基四氮唑溴盐法检测细胞生长情况。损伤肾脏组织匀浆诱导骨髓间充质干细胞实验:①取1只成年SD大鼠麻醉后,表皮消毒,取腹部正中切口,寻及双侧肾蒂,用无损伤动脉夹夹闭双侧肾蒂,缺血60min后松开动脉夹,再灌注60min后,无菌取肾制备匀浆。②将肾脏匀浆置于插入式嵌合培养皿中对第3代骨髓间充质干细胞进行诱导,并加入含有5μmol/L全反式维甲酸的最低必须培养基。③诱导第0,3,5,7天,倒置显微镜下观察细胞大体形态变化;以上各时间点取活细胞制成活细胞悬液,经流式细胞仪测定第18型角蛋白的阳性表达率;取诱导分化第7天的细胞,电镜观察其超微结构变化;钙钴法碱性磷酸酶细胞化学染色,与未经损伤肾脏组织匀浆诱导的骨髓间充质干细胞进行比较。结果:①骨髓间充质干细胞的特性检测:免疫荧光法鉴定分离培养的第3代细胞表面CD44和Vimentin表达阳性。二苯基四氮唑溴盐法测得的细胞生长曲线呈倒“S”型。②损伤肾脏组织匀浆诱导后骨髓间充质干细胞情况:骨髓间充质干细胞经诱导后大体形态变圆,由梭形细胞逐渐转变为鹅卵石样细胞,细胞碱性磷酸酶染色呈强阳性。诱导第7天细胞出现微绒毛和紧密连接,经诱导后的�
- 张婷周云张亚洪志华严向明
- 关键词：间质干细胞骨髓细胞上皮细胞肾小管
- 山药对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用被引量：50
- 2008年
- 目的研究山药灌胃预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用和促进肾脏再生修复的作用。方法3～4周龄雄性大鼠60只随机分正常对照(A)组(n=6)、假手术对照(B)组(n=6)、缺血再灌注损伤山药灌胃预处理(C)组(n=24)及缺血再灌注损伤无菌生理盐水灌胃对照(D)组(n=24)。C、D组在缺血再灌注损伤前灌胃5d,在损伤后2、12、24、48h分别采集6只鼠的血并收获肾脏标本。4组标本进行尿素氮、肌酐、丙二醛测定,常规病理切片、细胞凋亡、免疫组化检测增殖细胞抗核抗体(PCNA)、激光共聚焦免疫荧光检测5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)、同源盒基因2(Pax-2)。结果C组尿素氮、肌酐、丙二醛明显低于D组;缺血再灌注损伤2h可测到肾小管细胞凋亡,12h达高峰;C组凋亡指数明显低于D组;C组PCNA阳性肾小管细胞明显高于D组;C组检测到BrdU、Pax-2双标记阳性细胞;常规病理形态4组有其特有表现。结论山药灌胃预处理能减轻肾脏缺血再灌注损伤大鼠的多项检测指标,促进受损肾小管的再生修复和重建,有效保护了肾功能。肾脏缺血再灌注损伤后测到的BrdU、Pax-2双标记阳性细胞提示肾组织内的祖细胞参与了肾脏的修复再生。
- 张亚周云洪志华严向明张婷张建
- 关键词：山药缺血再灌注损伤肾脏
- 睾丸扭转的诊治进展被引量：6
- 2006年
- 洪志华周云
- 关键词：睾丸扭转诊治
- 山药及干细胞对肾缺血再灌注损伤的保护作用被引量：2
- 2009年
- 目的研究山药灌胃预处理及移植骨髓间充质干细胞(MSCs)对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法4～6周龄雌性SD大鼠60只,随机分正常对照(A)组(n=6),再灌注损伤(B)组(n=18),再灌注损伤移植MSCs(C)组(n=18)和再灌注损伤山药灌胃移植MSCs(D)组(n=18)。D组损伤前山药灌胃5d,C、D组再灌注1h输注BrdU标记的MSCs,B、C、D组再灌注6、48h及2周各采集6只鼠的血并取肾。4组标本进行血清尿素氮(BUN)及肌酐(SCr)、肾匀浆内皮素(ET)测定,常规病理切片,免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA)、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记MSCs、Ⅷ因子相关抗原(FⅧ-RAg)阳性细胞情况。结果再灌注6h,C、D组BUN、SCr低于B组,D组低于C组;再灌注48h,仅B组高于A组;2周4组间无统计学意义。再灌注6h,B、C组ET较A组高,D组与A组无统计学意义,C、D组较B组低;48h4组间无统计学意义。再灌注6、48hC、D组于肾小球、肾间质微血管见散在BrdU标记的MSCs,2周则见较多。再灌注6、48h及2周PCNA及FⅧ-RAg阳性细胞,C、D组较B组多,D组较C组多。结论肾缺血再灌注损伤时移植MSCs有保护作用,山药灌胃预处理联合MSCs移植有协同治疗作用。
- 张亚周云张建洪志华张婷严向明
- 关键词：山药骨髓间充质干细胞缺血再灌注损伤肾脏
- 骨髓间充质干细胞移植促进大鼠肾缺血再灌注损伤的恢复被引量：4
- 2008年
- 目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)在缺血再灌注肾损伤大鼠体内的分化情况及对肾修复的促进作用。方法72只雌性6周龄SD大鼠随机分为正常组、假手术组、缺血再灌注(I/R)组、MSCs移植组4组,分别于再灌注后12h、3、7、14、42d随机选取I/R组和MSCs组大鼠各6只,收获肾脏标本和血标本。测定血标本尿素氮和肌酐值;肾脏切片行HE染色、免疫组化PCNA染色、TUNEL法检测原位凋亡、激光共聚焦显微镜观察MSCs分化情况。结果再灌注后7d内,与I/R组比较,MSCs组BUN值、Scr值明显降低(P<0.05),组织学评分明显减低,PCNA阳性细胞数明显增多(P<0.05)。再灌注后12h,MSCs组凋亡细胞数少于I/R组(P<0.05)。再灌注后42d,肾小管中有BrdU阳性细胞。结论MSCs移植可减轻急性肾缺血再灌注损伤鼠肾小管上皮细胞的损伤,促进肾功能恢复。少部分MSCs在体内可分化形成肾小管上皮细胞。
- 张婷周云张亚洪志华严向明
- 关键词：骨髓间充质干细胞缺血再灌注损伤
- 小儿闭合性肾外伤51例诊治分析被引量：1
- 2006年
- 回顾性分析儿童闭合性肾外伤51例。影像学诊断主要依靠CT和B型超声检查，手术探查者术前行静脉肾盂造影术（IVU）。45例行保守治疗，1例行肾缝合术，1例行肾盂输尿管端端吻合术，3例行患侧肾切除术，1例合并血腹行剖腹探查发现患肾周围后腹膜血肿，无活动性增大倾向，保留肾脏。所有病例随访3个月以上，肾功能改善。认为肾损伤程度的正常评估可依据CT首选检查，肾脏Ⅰ～Ⅲ级损伤和血流动力性稳定的Ⅳ级损伤在大多数情况下可行保守治疗。
- 洪志华周云严向明
- 关键词：闭合性损伤肾损伤儿童
