温常龙
- 作品数：33 被引量：202H指数：7
- 供职机构：北京市农林科学院蔬菜研究中心更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划中央高校基本科研业务费专项资金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 番茄过表达EcPEPC研究及黄瓜TFL1基因的图位克隆
- 温常龙
- 关键词：番茄PEPC过表达黄瓜
- 番茄磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种番茄磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶及其编码基因和应用。本发明提供的蛋白质，是如下(a)或(b)：(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺...
- 郭仰东温常龙刘莉莎杨鹏赵立群程琳王玉珏赵永钦
- TaqMan探针法实时荧光定量PCR检测西瓜潜隐病毒被引量：7
- 2021年
- 【目的】西瓜潜隐病毒(Citrullus lanatus cryptic virus,CiLCV)是近年来新发生的一种重要种传病害,研究旨在建立基于TaqMan探针法的实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR with TaqMan probes,TaqMan-qPCR)检测技术,为开展种子、种苗带毒鉴定和病害防控提供技术支撑。【方法】通过基于小RNA高通量测序技术在北京西瓜产地发现了CiLCV,并克隆CiLCV的dsRNA1和dsRNA2全长序列,设计特异性引物建立RT-PCR和TaqMan-qPCR检测方法。以黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottled mosaic virus)、黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus)、甜瓜内源病毒(Cucumis melo endornavirus)、瓜类褪绿病毒(cucurbit chlorotic yellows virus)、南瓜花叶病毒(squash mosaic virus)、番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus)、西瓜花叶病毒(watermelon mosaic virus)、小西葫芦黄花叶病毒(zucchini yellow mosaic virus)8种常见病毒为对照进行检测方法特异性分析;利用建立的实时荧光定量标准曲线对方法灵敏度进行评价;进一步利用TaqMan-qPCR和RT-PCR技术监测我国葫芦科作物主产区的西瓜、黄瓜、甜瓜和南瓜(砧木)种苗带毒情况。【结果】通过分析获得的高质量小RNA数据,发现17条组装的contig与CiLCV基因组有较好同源性。进一步克隆获得CiLCV的dsRNA1和dsRNA2序列全长(分别为1603和1466 nt),发现其与河南省鉴定出的CiLCV同源性高达99.4%和99.8%(GenBank number KY081285、KY081284)。建立的RT-PCR检测技术对CiLCV有单一扩增条带;建立的TaqMan-qPCR检测技术具有较好特异性和灵敏度,且能够检测到最低拷贝数为2×10^(3)的病毒,灵敏度是RT-PCR的100倍。同时,发现有1份来自北京的西瓜种苗检出了CiLCV,而其余地区的西瓜、黄瓜、甜瓜和南瓜(砧木)种苗均未检出该病毒,表明我国葫芦科作物主产区种苗带毒情况总体不高。【结论】建立的TaqMan-qPCR检测CiLCV技术特异性强、灵敏度高,适用于口岸和实
- 赵立群邱艳红张晓飞刘慧杨静静张建张海军徐秀兰温常龙
- 关键词：实时荧光定量PCR葫芦科作物种传病害
- 青花菜ProDH基因的克隆及功能鉴定被引量：5
- 2010年
- 脯氨酸是水分胁迫植物中最常见的渗透保护物质之一,脯氨酸脱氢酶(ProDH)是存在于线粒体内的催化脯氨酸降解的关键酶,构建RNAi表达载体转化青花菜可以抑制脯氨酸分解提高其抵抗干旱胁迫和盐胁迫的能力。本研究利用同源重组和RACE技术克隆青花菜脯氨酸脱氢酶基因(ProDH),以酶切、连接的方法利用载体pFGC1008构建植物RNAi表达载体pFGC-PDHi。序列分析表明,本文首次克隆了1595bp的青花菜脯氨酸脱氢酶基因cDNA全长,该序列编码498个氨基酸;序列比对发现该核酸序列与拟南芥、甘蓝型油菜、芜菁分别有83.26%、89.07%和97.73%的同源性,其氨基酸序列和拟南芥、甘蓝型油菜、芜菁分别有89.78%、91.38%和98.80%的同源性。测序和酶切鉴定表明青花菜ProDH基因RNA干扰表达载体已经构建成功,并将其转化青花菜得到转化株,经PCR检测,转化株均为阳性株,证明干扰载体的T-DNA区已经成功地整合到了青花菜基因组中。研究还发现在外源的L-脯氨酸存在时,转化株的脯氨酸脱氢酶的活性受到了明显的抑制。本研究为青花菜的抗旱育种提供了非常有价值的新种质材料。
- 杨鹏刘莉莎温常龙赵立群赵冰郭仰东
- 关键词：青花菜RNA干扰
- 紫背天葵叶片组织培养的方法及其专用培养基
- 本发明公开了一种紫背天葵叶片组织培养的方法及其专用培养基。本发明提供的紫背天葵叶片诱导愈伤组织的培养基是在MS基本培养液中添加如下物质得到的固体培养基：2，4-D、6-BA、碳源和凝胶剂；培养基中2，4-D的终浓度是1-...
- 郭仰东刘莉莎温常龙赵永钦赵立群王玉珏程琳郑禾
- 文献传递
- 黑麦草与羊茅属间杂种研究进展被引量：3
- 2010年
- 黑麦草属(Lolium L.)与羊茅属(Festuca L.)是世界范围内重要的禾本科牧草和草坪草。黑麦草与羊茅杂交能综合黑麦草优良营养品质与羊茅抗逆性强的优点,可培育出优质抗逆的黑麦草羊茅杂种。同时黑麦草羊茅杂种是研究禾本科牧草遗传机制的优质试材,倍受世界各国育种工作者关注。本文总结了黑麦草羊茅杂种高产、优质、抗性强的优势;分析了杂种染色体配型特点;重点介绍了通过基因渗入、雄核发育和转基因手段改良牧草的方法;对黑麦草羊茅杂种基因组原位杂交、分子标记和遗传图谱建立、数量性状位点分析等分子遗传学的最新研究进展进行了综述。
- 温常龙赵冰杜建材山田敏彦郭仰东
- 关键词：黑麦草羊茅属间杂交
- 春秋保护地黄瓜新品种京研109的选育被引量：4
- 2019年
- 京研109为华北密刺类型黄瓜一代杂种,适合我国北方地区春温室和春、秋大棚栽培。其母本、父本分别为自交系BC244856-3和N62-5。植株生长势较强,早熟,全雌。商品瓜棒状,顺直,腰瓜长约30 cm,单瓜质量160～230 g,瓜条深绿色,瘤小,刺密,心室小,瓜把短,瓜肉浅绿色,脆甜,风味好。连续坐瓜能力强,丰产潜力大。一般每667 m^2产量可达6 000～7 000 kg,长季节栽培产量可达10 000 kg以上。抗霜霉病、白粉病和CMV,耐低温、弱光,也耐高温、长日照。
- 毛爱军陈春秀温常龙王航
- 关键词：黄瓜一代杂种
- 紫背天葵叶片组织培养的方法及其专用培养基
- 本发明公开了一种紫背天葵叶片组织培养的方法及其专用培养基。本发明提供的紫背天葵叶片诱导愈伤组织的培养基是在MS基本培养液中添加如下物质得到的固体培养基：2，4-D、6-BA、碳源和凝胶剂；培养基中2，4-D的终浓度是1-...
- 郭仰东刘莉莎温常龙赵永钦赵立群王玉珏程琳
- 干旱胁迫对黄瓜幼苗生长、光合生理及气孔特征的影响被引量：65
- 2010年
- 采用盆栽方式研究不同干旱程度（对照的基质含水量为田间持水量的70%-80%,轻度胁迫的基质含水量为田间持水量的40%-50%,重度胁迫的基质含水量为田间持水量的20%-30%）对2个不同黄瓜品种（千秋五号和千春七号）的形态指标、叶片气体交换参数、叶绿素荧光参数、生理生化指标和气孔特征的影响。结果表明：干旱胁迫下,2个品种的生长都受到显著抑制,叶片相对含水率、净光合速率（Pn）、气孔导度（Gs）和蒸腾速率（Tr）显著降低;在轻度干旱胁迫下,光合速率的下降主要是由气孔因素引起;而在重度干旱胁迫下,胞间CO2含量（Ci）升高,表明此时光合速率的下降是由非气孔因素引起的。干旱胁迫下,PSⅡ光化学量子效率（ΦPSⅡ）、光化学猝灭系数（qP）、光合电子传递速率（ETR）和PSⅡ吸收的光能用于光化学反应的份额（P）也都显著下降,而非光化学猝灭系数（NPQ）和用于天线热耗散的份额（D）显著增加。光合色素含量呈下降趋势,叶片中丙二醛（MDA）含量、游离脯氨酸（Pro）含量、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）的活性显著升高。叶片气孔密度,开放气孔的比例,开度大小都呈下降趋势,胁迫后的叶片下表皮气孔变圆并且下陷,表皮毛的密度增加。试验显示,千春七号比千秋五号表现出更强的抗旱性。
- 王玉珏付秋实郑禾温常龙程琳赵冰郭仰东
- 关键词：黄瓜干旱胁迫光合作用叶绿素荧光气孔特征
- 弱光下不同储藏温度对黄瓜穴盘秧苗质量的影响
- 验以中农16号黄瓜为试材,在弱光(30μmol/(m2·s))条件下,研究不同储藏温度对黄瓜秧苗主要形态及生理指标的影响,温度设定分别为15℃/12℃(昼/夜,下同)、12℃/9℃及温室条件(对照),光周期为1...
- 程琳王玉珏温常龙赵冰郭仰东
- 关键词：黄瓜穴盘育苗储藏温度秧苗质量弱光环境
