潘小幸
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”湖北省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 解脂耶氏酵母新型表达载体构建及癌基因rho在其中的表达被引量：1
- 2011年
- 为了简化解脂耶氏酵母表达载体构建过程、消除抗生素污染,将mel基因(编码酪氨酸酶)作为新型报告基因用于构建新型酵母表达载体,利用组装PCR人工合成基因mel,并用重叠PCR将其与同源组成型强启动子pTEF、分泌性信号肽XPR2pre及强终止区LIP2t融合,构建新型胞外及胞内表达载体,并利用其在解脂耶氏酵母野生菌株中表达人源癌基因rho。成功获得mel全基因并将其与启动子、信号肽和终止区融合,得到融合片段TXML,用其替换原有表达载体的筛选标记基因ura3d4,构建得到新型胞外及胞内表达载体pINA1297-M和pINA1297-a-M,转化后的酵母阳性转化子性状明显,随后利用此新型表达系统获得可溶性异源蛋白Rho。首次实现了将mel作为一种便捷、价廉、无污染的新型筛选标记基因运用于非常规酵母表达系统中,更为mel在其它真核表达系统中的运用奠定了技术基础;获得的可溶性Rho蛋白可为研究其性质、结构、功能及与Rho癌基因家族其它成员的相互作用提供条件。
- 赵鹤云汪小锋潘小幸刘云徐莉闫云君
- 关键词：解脂耶氏酵母抗生素污染
- 白地霉脂肪酶在酿酒酵母和毕赤酵母细胞表面的展示研究
- 微生物脂肪酶具有底物选择性广、反应条件温和、在有机反应体系中稳定性好、副反应和副产物少等优点，是目前市场上应用最广泛的生物催化剂之一。但游离脂肪酶成本高、难以回收利用，而用传统的方法进行固定化的脂肪酶纯化操作复杂、回收较...
- 潘小幸
- 关键词：酿酒酵母毕赤酵母
- 文献传递
