牛庆丽
- 作品数：152 被引量：262H指数：10
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学社会学更多>>
- 鉴定和检测多种羊泰勒虫的试剂盒及制备方法
- 本发明公开一种用于检测和鉴定对羊吕氏泰勒虫、羊尤氏泰勒虫、绵羊泰勒虫的多重PCR鉴定试剂盒。本发明的鉴定和检测多种羊泰勒虫的试剂盒中包括有三对特异性引物，它们分别是：羊吕氏泰勒虫上、下游引物，羊尤氏泰勒虫上、下游物和绵羊...
- 殷宏罗见勋李有全张晓刘志杰陈泽杨吉飞关贵全牛庆丽任巧云刘爱红刘军龙马米玲岺双庆何海宁
- 文献传递
- 我国牛边缘无浆体的血清学调查
- 目的:牛边缘无浆体病(bovine anaplasmosis)是由边缘无浆体(Anaplasma marginale)感染牛引起的一种蜱传性疾病。该病在世界各地广泛流行,引起的主要临床症状有高热、贫血、黄疸、体重减轻、产...
- 于培发刘志杰牛庆丽杨吉飞李有全刘光远罗建勋殷宏
- 关键词：边缘无浆体CELISA
- 文献传递
- 非洲猪瘟病毒pO174L蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：4
- 2022年
- 为了解析非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)pO174L蛋白的功能,根据ASFV HLJ/18毒株基因序列(GenBank登录号:MK333180)设计引物,扩增O174L基因并克隆至pET-28a(+)载体中,构建原核表达载体p ET-28a-O174L,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达后,通过镍柱亲和层析纯化目的蛋白,利用SDS-PAGE和Western-blot分析鉴定重组蛋白表达产物的抗原性,用重组蛋白免疫新西兰大白兔制备家兔抗pO174L蛋白的多克隆抗体;利用间接ELISA方法测定多克隆抗体的效价,并通过Western-blot和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定多克隆抗体的特异性。结果显示,用PCR扩增的O174L基因片段长564 bp,与预期相符;双酶切和测序鉴定结果证明,重组质粒pET-28a-O174L构建成功,在原核表达系统成功地表达并获得了可溶性蛋白pO174L,分子质量约为21.5 ku;用纯化的蛋白免疫动物后制备了多克隆抗体,抗体效价达到1∶512000;Western-blot和IFA结果显示制备的抗体能够特异性地识别ASFV感染的猪肺泡巨噬细胞中表达的天然蛋白pO174L。本研究为深入解析pO174L蛋白的功能及其在ASFV感染和致病过程中的作用奠定了基础。
- 敬梦瑶牛庆丽杨吉飞吕欣倩樊洁赵亚茹杨赛霞张忠辉关贵全殷宏刘志杰
- 关键词：非洲猪瘟病毒原核表达多克隆抗体
- 羊巴贝斯虫未定种trap基因的克隆表达及反应原性分析被引量：1
- 2018年
- 通过克隆trap基因，在原核表达系统中进行表达并纯化，Westernblot鉴定TRAP蛋白反应原性，应用生物信息学分析软件分析验证该基因／蛋白的结构。以羊巴贝斯虫未定种新疆株gDNA和cDNA为模板扩增trap基因全长；并构建pET-30a-trap原核表达载体。将构建成功的表达载体转入BL21（DE3）pLysS进行诱导表达；纯化可溶性的rBspTRAP，Westernblot分析其反应原性，并应用生物信息学分析软件分析验证该基因／蛋白的结构。结果显示：获得的traP基因全长为2338bp，开放阅读框大小为1944bp，具有5个内含子和6个外显子。氨基酸序列分析显示1～26位氨基酸为信号肽序列，45～201位和240～288住氨基酸分别为TRAP蛋白家族的vWA和TSPl结构域。Westernblot结果显示羊巴贝斯虫未定种新疆／敦煌株阳性血清可特异性识别rBspTRAP，该重组蛋白与莫氏巴贝斯虫（临潭株、天祝株、河北株、宁县株）阳性血清及尤氏泰勒虫阳性血清无交叉反应。本试验成功克隆trap基因并表达，该基因可以作为免疫学诊断用候选抗原，为以后建立鉴别诊断莫氏巴贝斯虫和羊巴贝斯虫感染的免疫学诊断方法奠定基础。
- 何欣刘军龙刘爱红王锦明牛庆丽李有全殷宏罗建勋关贵全
- 关键词：原核表达
- 对蜱致病性球孢白僵菌培养条件的优化被引量：12
- 2011年
- 对前期筛选得到的具有生防潜力的杀蜱真菌Beauveria bassiana AT17菌株进行相关生物学性状的研究,建立一套规范的实验室培养的技术和方法,同时对其液固双相发酵技术进行优化,在于提供优质高效的生防材料,为其真菌制剂的规模化生产提供实践和理论基础。通过采用单因素筛选方案对其最适基础培养基、温度、pH值、碳源、氮源、微量元素及液固双相发酵配方进行研究,发现该菌株在PDA、PPDA、PDAY、SDAY、SMAY 5种培养基上均能较好生长,在PDA上生长最快,在PDAY上产孢量最大。温度对菌丝的生长和产孢影响显著,25°C菌丝生长最快,且产孢量最大。B.bassiana AT17菌株在pH 4-10范围内均可生长,在偏碱性环境内生长最快,在pH 5-6的偏酸性环境内产孢量最大。综合评价真菌各项指标后,葡萄糖和酵母粉为菌丝生长和产孢的最佳碳源和氮源,固体物料麦麸+玉米粉+米粉与基础培养液3/4 SDAY按2:1均匀混合后,添加0.05%K+可作为菌株固体发酵的最佳物料配方组合。
- 孙明任巧云关贵全刘志杰李有全马米玲刘爱红牛庆丽杨吉飞殷宏罗建勋
- 关键词：球孢白僵菌
- 中国部分地区羊泰勒虫病的流行病学调查及分类鉴定被引量：34
- 2012年
- 【目的】调查近年来中国羊泰勒虫病的流行现状,并对其分离株进行分子分类学鉴定。【方法】对分离自2005—2011年间的羊血液基因组以及蜱基因组,依次用吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫和绵羊泰勒虫特异引物进行PCR扩增。对阳性样品进行18S rRNA基因的特异扩增和测序分析,并建立系统发育树。【结果】对所有羊血液基因组和蜱基因组的PCR扩增表明,在中国所调查的4省9县市,羊泰勒虫病的流行存在明显差异。甘肃省羊泰勒虫病的发病率和感染率较高,主要呈吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫混合感染,现场调查危害比较严重。新疆喀什仅存在绵羊泰勒虫,调查没有见到临床发病病例。在湖北样品中检测到吕氏泰勒虫,但未发现临床上发病病例。在云南样品中没有检测到羊泰勒虫及其发病病例。【结论】羊泰勒虫病在中国上述区域呈现不同程度的发病率和感染率,该研究为这些区域羊泰勒虫病的综合防治提供了参考依据。
- 李有全彭欲率刘志杰关贵全杨吉飞陈泽牛庆丽罗建勋殷宏
- 关键词：泰勒虫病
- 新疆巴贝斯虫棒状体相关蛋白的表达及其作为潜在诊断抗原的评估
- <正>羊巴贝斯虫病是小反刍动物重要的蜱传血液寄生虫病之一,主要在热带,亚热带和温带地区流行。巴贝斯虫病在热带,亚热带地区可引起绵羊和山羊畜产品显著的经济损失。该病临床反应通常以高热,黄疸,血红蛋白尿等为主要特征,严重时可...
- 牛庆丽刘志杰杨吉飞于培发潘玉平翟斌涛罗建勋关贵全殷宏
- 关键词：血清学诊断蛋白表达
- 文献传递
- 一种可用于羊泰勒虫检测的引物及试剂盒
- 本发明公开了一种检测羊泰勒虫病的扩增引物组、试剂盒及使用方法。本发明的羊泰勒虫病的检测试剂盒包括用于恒温扩增的一对置换引物SEQ ID No.1和SEQ ID No.2、一条交叉引物SEQ ID No.3、分别用FITC...
- 王锦明关贵全牛庆丽刘军龙任巧云李有全刘爱红刘志杰殷宏罗建勋刘光远杨吉飞陈泽田占成独军政高闪电
- 文献传递
- 八种杀蜱药物与球孢白僵菌分生孢子的生物相容性被引量：3
- 2009年
- 为探索绿色高效的杀蜱新制剂,采用营养液萌发法和平板生长法测定了8种杀蜱药物与球孢白僵菌分生孢子的生物相容性。结果显示,这8种药物与白僵菌的相容性和药物浓度呈负相关,次亚致死剂量的苦皮藤素、灭幼脲和溴氰菊酯与白僵菌的相容性良好,萌发率均在85%以上;用浸渍法测得白僵菌孢子浓度在1×107/mL时对蜱的致死率可达100%。结果表明,所试验的8种药物中,苦皮藤素、灭幼脲和溴氰菊酯可与白僵菌配伍使用;白僵菌的最佳使用浓度为1×107/mL。
- 任巧云关贵全李有全马米玲刘爱红刘军龙牛庆丽金玉荣王子坚罗建勋殷宏
- 关键词：球孢白僵菌生物相容性
- 莱姆病间接ELISA诊断方法的建立及应用
- 2011年
- 使用培养的狭义伯氏疏螺旋体B31菌株制备可溶性抗原,建立羊莱姆病血清抗体的间接ELISA诊断方法。应用伯氏疏螺旋体阴性、阳性血清评价该方法的特异性和敏感性。根据所建立的方法对从甘肃省甘南地区采集的450份羊血清进行检测。结果显示,该方法对羊莱姆病的阳性检出率和阴性符合率分别为90.1%和90.0%,与羊霉形体、布鲁氏菌、弓形虫以及羊无浆体、巴贝斯虫、泰勒虫等常见蜱传播病原的阳性血清之间没有交叉反应。甘肃省甘南地区夏河县、临潭县和卓尼县羊莱姆病的感染率分别为3.3%、6.1%和4.1%,甘南地区的平均感染率为5.1%。结果表明,本研究所建立的方法能够用于羊莱姆病的血清学诊断,甘南地区可能存在莱姆病的自然疫源地。
- 杨吉飞关贵全牛庆丽刘志杰李有全刘军龙马米玲任巧云刘爱红罗建勋殷宏
- 关键词：莱姆病伯氏疏螺旋体可溶性抗原间接酶联免疫吸附试验
