王佩荣
- 作品数：16 被引量：27H指数：4
- 供职机构：中国科学院生物物理研究所更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目湖南省医药卫生科研计划课题更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程自动化与计算机技术生物学更多>>
- 利用分子马达技术检测霍乱弧菌被引量：6
- 2012年
- 利用载色体chromatophore上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器,建立了应用在食品检测中的快速检测方法。首先在ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-ompW探针,将待测霍乱弧菌和阴性对照分别与此生物传感器结合,比较其催化ATP合成30 min后的ATP产生量,进而对霍乱弧菌的DNA进行检测。ATP合成的量可以通过环境H+的量进行测定,H+的量通过F-DHPE所体现的荧光强度大小标定。结果表明,Chro ompW的浓度在0.078 mg/mL,单核增生李斯特菌DNA浓度在40 ng/mL为最适检测条件。通过与实际检测样品的传统检测方法及PCR检测方法对照,具有良好的检测符合性。
- 张捷向丽萍汪琦张惠媛张昕王宇顾德周王佩荣温铮陈广全乐加昌
- 关键词：霍乱弧菌
- 基于分子马达生物传感器技术的副溶血性弧菌分子分型方法的初步研究被引量：7
- 2013年
- 【目的】建立基于分子马达技术的简便快速的分子分型方法,对携带和非携带毒力基因的副溶血性弧菌进行快速分类。【方法】以F0F1-ATPase为核心构建分子马达,以副溶血性弧菌毒力基因tdh、trh和种特异性基因tlh、toxR为靶基因设计4个探针。通过生物素-亲和素系统将探针与分子马达连接构建F0F1-ATPase分子马达生物传感器,对10株副溶血性弧菌分离株进行分类,并与PCR-电泳-凝胶成像结果进行比较;同时对生物传感器的检测灵敏度和特异性进行研究。【结果】10株试验菌株中10株tdh阳性,0株trh阳性,而10株菌都携带tlh和toxR,与PCR-电泳-凝胶成像结果一致;分子马达生物传感器的最低检测限为1 pg/反应体系,且能够对副溶血性弧菌特异性识别,PCR-电泳-凝胶成像方法的最低检测限为10 pg/PCR反应体系。【结论】建立了基于分子马达的分子分型方法,能够对副溶血性弧菌的致病性进行快速诊断,检测灵敏度比PCR-电泳-凝胶成像方法高了10倍,而且特异性非常高。该方法简便、快速、省时、省力,适用于地方疾控部门和口岸检疫部门的基层实验室开展副溶血性弧菌监测和流行病学溯源工作。
- 张捷李兆杰王煜张惠媛陆琳王静刘岩顾德周汪琦张昕王佩荣乐加昌陈广全
- 关键词：副溶血性弧菌分子马达分子分型毒力基因
- 分子马达传感器对沙门氏菌快速检测方法的初步研究被引量：9
- 2012年
- 利用F0F1-ATP合酶的旋转特性及对H+敏感的荧光物质F-DHPE作为指示剂来检测样本中有无目标物。通过生物素-亲和素系统将特异性invA核酸探针连接在F0F1-ATPase的ε亚基上构建生物传感器;将待测样品和阴性对照分别与生物传感器结合后,比较其催化ATP合成30min后的ATP产生量,依此对样品中的沙门氏菌DNA进行检测。结果表明,该方法对沙门氏菌DNA的检测时间为1h,检出限为10ng/mL。从食品样本分离得到的30株细菌,利用分子马达生物传感器的检测结果与PCR检测的结果一致。
- 张捷顾德周张惠媛杨泽慧王佩荣张雷齐玮陈广全乐加昌
- 关键词：沙门氏菌
- 分子马达生物传感器检测食源性轮状病毒被引量：4
- 2013年
- 通过分子马达生物传感器技术建立一种特异、便捷、快速的食源性轮状病毒检测方法。以F0F1-ATPase为核心构建分子马达,以轮状病毒保守片段VP7设计各血清型通用探针,通过生物素-亲和素系统将探针与分子马达连接构建F0F1-ATPase分子马达检测装置。提取病毒RNA并将其与生物传感器结合的同时启动ATP合成,比较其荧光强度的差别,可以对样品中的RNA进行检测。此方法的病毒RNA检测灵敏度为0.005 ng/mL,对轮状病毒检测特异,与甲肝病毒、诺如病毒无交叉反应,在1 h内即可完成检测。运用此方法随机检测15份样品,检测结果与RT-PCR一致。结果表明,分子马达生物传感器检测轮状病毒的方法灵敏、特异,可用于食源性轮状病毒的快速检测。
- 张捷许美玲王璇王煜王小晋刘岩顾德周陈广全王佩荣乐加昌
- 关键词：轮状病毒
- 一种生物分子马达共振传感器的构建及检测方法
- 本发明提供了一种生物分子马达共振传感器的构建及检测方法。本发明在构建旋转式生物传感器过程中，发现了负载与转速之间存在激活/压制的现象，而且信号的变化与负载之间存在非线性关系。常用力学理论不能解释旋转与负载之间的非线性现象...
- 乐加昌王佩荣张旭
- 文献传递
- 利用F_0F_1-ATPase分子马达生物传感器检测食品中的副溶血性弧菌被引量：2
- 2012年
- 利用载色体上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器对副溶血性弧菌检测快速检测。在ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-toxR探针,将待测副溶血性弧菌标准菌株和阴性对照分别与生物传感器结合后,比较其催化ATP合成30min后的ATP产生量,可以对副溶血性弧菌的DNA进行检测。ATP合成的多寡可以通过环境中H+的量进行测量,而H+的多寡通过F-DHPE所体现的荧光强度大小来获得。结果表明,chro toxR的质量浓度在0.156mg/mL,副溶血性弧菌DNA质量浓度在40ng/mL时为最适检出条件。通过与实际检测样品的传统检测方法及聚合酶链式反应检测方法对照,具有良好的符合性。
- 张捷顾德周张惠媛刘岩汪琦张昕王佩荣陶雨风范斐陈广全乐加昌
- 关键词：生物传感器副溶血性弧菌
- 一种基于分子马达、磁富集和双探针杂交技术的生物传感器构建及检测方法
- 本发明涉及一种生物大分子的检测方法。尤其涉及利用ATP分子马达在时间上和空间上的信号放大特性及其耐高温特性，双抗体杂交和双探针杂交的高度特异性，磁富集、磁分离的高灵敏和快速特性，单链核酸酶降解错配双链减少非特异杂交，以及...
- 乐加昌王佩荣张旭
- 文献传递
- F_0F_1-ATPase分子马达技术对阪崎肠杆菌检测的研究被引量：2
- 2013年
- 本研究建立了应用F0F1-ATPase分子马达生物传感器快速检测阪崎肠杆菌的方法。自嗜热菌中提取载色体后,合成针对阪崎肠杆菌的生物素化ITS探针,在载色体ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-ITS探针,将待测阪崎肠杆菌标准菌株和阴性对照分别与此生物传感器结合,比较其催化ATP产生量,进而对阪崎肠杆菌DNA进行检测。结果表明,chro ITS探针浓度0.019mg/mL,阪崎肠杆菌DNA浓度40ng/mL为最适检测条件。通过与传统检测方法及PCR检测方法对照,本方法具有良好的检测符合性。
- 张捷王煜陆琳刘艳华周琦孙梓晏顾德周尚世进张惠媛王佩荣陈广全乐加昌
- 关键词：阪崎肠杆菌
- F_0F_1-ATPase生物传感器检测食品中食源性诺如病毒被引量：5
- 2014年
- 应用分子马达生物传感技术,建立食品中诺如病毒特异性快速检测方法。以嗜热菌中提取的载色体(chromatophore)为材料,根据诺如病毒ORF1和ORF2连接处的高度保守区设计探针,利用生物素-亲和素系统将诺如病毒探针连接在F0F1-ATPase的ε亚基上构建生物传感器。提取病毒RNA并将其与生物传感器结合的同时启动ATP合成,比较其荧光强度的差别,对样品中的RNA进行检测。建立并优化了F0F1-ATPase生物传感技术检测食源性诺如病毒的方法。所建立的方法具有良好的特异性,12个含诺如病毒样品均能检出,3个不含诺如病毒样品均未检出,无假阴性或假阳性情况出现。该方法可在1 h内完成检测,检测灵敏度在RNA水平上达到0.005 ng/m L。所建立的分子马达生物传感技术可以较好的检测食品中的诺如病毒,并为其他病毒的检测提供参考。
- 张捷许美玲王璇王煜刘岩王小晋张丽张慧媛顾德周王佩荣陈广全乐加昌
- 关键词：诺如病毒
- 利用F_0F_1-ATPase免疫生物传感器快速检测人肠道病毒71型的研究被引量：2
- 2015年
- 目的从嗜热菌中提取载色体Chromatophore,利用F0F1-ATPase构建一种生物传感器,用于人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)的快速、简便、特异检测。方法制备F0F1-ATPaseε亚基单克隆抗体,通过亲和素-生物素系统的连接作用,以EV71抗体为检测工具,构建一种新的F0F1-ATPaseε亚基单克隆抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-EV71抗体的免疫生物传感器,通过比较其检测前后ATP催化合成量的不同,实现对EV71病毒的快速检测。同时,合成用于EV71检测的特异性引物探针,比较2种检测方法的结果。结果 RT-PCR检测灵敏度为10-7mg/ml,检测时间约3 h;生物传感器检测灵敏度为10-7mg/ml,但整个实验过程仅需30 min。结论利用F0F1-ATPase构建的免疫生物传感器可用于EV71感染的快速检测,具有一定的应用前景。
- 欧新华孙边成王佩荣陈静芳乐加昌
- 关键词：生物传感器人肠道病毒71型
