公共文化服务平台

共 9 条记录，以下是 1-9

全选清除导出

排序方式：

西尼罗病毒prM基因可溶性表达与抗原性鉴定: 为进行西尼罗病毒(WNV)NY99株prM蛋白的免疫学研究,通过PCR方法扩增WNV NY99株prM基因,并将其克隆至原核表达载体pMALTM-c2X上,构建重组表达质粒pMALTM-c2X-prM,经IPTG诱导后得...; 赵晶秦永丽孙恩成杨涛徐青元耿宏伟王凌凤蔡绪禹魏鹏王文世步志高吴东来; 关键词：可溶性表达 PRM; 文献传递

蓝舌病病毒17型VP2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定被引量：13: 2011年; 为制备蓝舌病病毒(BTV)血清17型VP2蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究用原核表达系统部分重叠表达的两段VP2蛋白共同免疫BALB/c小鼠,采用细胞融合技术获得杂交瘤细胞,通过以重组VP2蛋为白包被抗原的间接ELISA筛选获得2株稳定分泌抗BTV17 VP2蛋白的MAbs杂交瘤细胞株,分别命名为3F4和4H10。Ig亚类鉴定2株MAbs均为IgG1/κ链。Western blot证明,2株MAbs均能识别重组VP2蛋白。间接免疫荧光试验表明:2株MAbs均与BTV17呈阳性反应,其中MAb 3F4与BTV1、BTV2、BTV3、BTV5、BTV8、BTV11、BTV13、BTV16、BTV23、茨城病病毒(IBAV)、牛轮状病毒(BRV)、牛呼肠孤病毒(RV)均呈阴性反应,但与BTV10和BTV24呈弱阳性反应。利用合成多肽对VP2抗原表位鉴定结果表明,MAb 3F4识别的抗原表位为540DPWNNR545,MAb 4H10识别的抗原表位为540DPWNNRA546。本研究结果为建立BTV17型特异性检测方法及VP2功能研究奠定了基础。; 王凌凤杨涛孙恩成耿宏伟秦永丽赵晶蔡绪禹刘霓红李文京吴东来; 关键词：VP2 单克隆抗体抗原表位

蓝舌病病毒17型VP2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定: 蓝舌病(bluetongue,BT)是一种由蓝舌病病毒(bluctongue virus,BTV)引起的通过库蠓等昆虫传播的非接触性病毒性动物传染病。主要感染反刍动物,为畜牧业带来巨大的经济损失,是国内外动物疫病防疫监测...; 王凌凤; 关键词：单克隆抗体抗原表位原核表达

蓝舌病病毒群特异性单克隆抗体的制备: 本研究以原核表达的血清型17型蓝舌病病毒(BTV-17)的VP7蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过常规杂交瘤技术将免疫后小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行融合,以BHK-21细胞繁殖的血清型12型蓝舌病病毒; 耿宏伟杨涛马健男孙恩成王凌凤魏鹏秦永丽吴东来; 关键词：单克隆抗体特异性

抗东方马脑炎病毒结构蛋白E2单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定被引量：2: 2011年; 为制备抗东方马脑炎病毒(EEEV)结构蛋白E2的单克隆抗体(MAb)并鉴定其抗原表位,本研究以Bac-to-Bac真核表达系统表达EEEV E2蛋白,纯化后作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。以原核表达载体pET-30a表达并纯化的EEEV E2蛋白作为包被抗原建立间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,获得4株稳定分泌抗EEEV E2蛋白MAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为6F3、6F11、7C11、8B11。Western blot与间接免疫荧光试验结果表明,获得的4株MAbs均与EEEV呈阳性反应,而与西方马脑炎病毒、乙型脑炎病毒以及登革热病毒1型～4型呈阴性反应。利用部分重叠的原核表达的短肽对E2蛋白抗原表位进行鉴定,初步确定MAb 6F11、7C11和8B11识别的抗原表位均为E-33(321EGLEYTWGNHPPKRVW336),而MAb 6F3无短肽与其反应,推测可能为构象表位。本研究结果为建立EEEV型特异性检测方法、研究E2蛋白结构功能及该病的进一步防制奠定了基础。; 赵晶孙恩成刘霓红杨涛杨银辉耿宏伟秦永丽王凌凤徐青元吴东来; 关键词：东方马脑炎病毒 E2蛋白原核表达真核表达单克隆抗体抗原表位

5种脑炎人兽共患病病毒多重RT-PCR检测方法的建立被引量：9: 2011年; 为建立同时检测流行性乙型脑炎病毒(JEV)、森林脑炎病毒(TBEV)、东方马脑炎病毒(EEEV)、西方马脑炎病毒(WEEV)和基孔肯雅病毒(CHIKV)5种人兽共患脑炎病病毒的多重RT-PCR方法,本研究根据GenBank登录的相关病毒基因序列设计特异引物,通过优化引物组合及PCR反应条件,建立可同时检测5种病毒的方法,扩增片段长度分别为411 bp(JEV)、945 bp(TBEV)、193 bp(EEEV)、545 bp(WEEV)和769 bp(CHIKV);该方法具有良好的特异性,对病毒核酸最低检测拷贝数分别为7.1×103、3.6×103、2.2×103、5.6×103和5.1×103。该方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便等优点,为以上5种人兽共患脑炎病病毒提供快速检测手段。; 蔡绪禹康晓平刘洪李裕昌孙恩成王凌凤杨涛刘霓红步志高李文京杨银辉吴东来; 关键词：流行性乙型脑炎病毒森林脑炎病毒东方马脑炎病毒基孔肯雅病毒多重RT-PCR

西尼罗病毒C基因可溶性表达与抗原性鉴定: 为进行西尼罗病毒(WNV)NY99株C蛋白的免疫学研究,通过PCR方法扩增WNV NY99株C基因,并将其克隆至原核表达载体pMALTM-c2X上,构建重组表达质粒pMALTM-c2X-C,经IPTG诱导后得到可溶; 孙恩成杨涛徐青元耿宏伟王凌凤蔡绪禹赵晶秦永丽魏鹏王文世步志高吴东来; 关键词：可溶性表达

蓝舌病病毒重组VP7蛋白单克隆抗体制备及竞争ELISA检测方法的建立被引量：9: 2012年; 为了建立蓝舌病(BT)的血清学诊断方法,本研究利用原核表达的蓝舌病病毒(BTV)血清型12型VP7纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备2株单克隆抗体(MAb),分别命名为BTV-2D10和BTV-4H7。IFA试验表明,2株MAb均能与BTV 24个血清型发生特异性反应,而与茨城病病毒(IBAV)、中山病病毒(CV)、赤羽病病毒(AKAV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛轮状病毒(BRV)、牛肠道病毒(BEV)、牛呼肠孤病毒(RV)及口蹄疫病毒(FMDV)无交叉反应,表明2株MAb均为BTV群特异性抗体。采用重组表达的VP7蛋白作为包被抗原建立的竞争ELISA方法证明,BTV-4H7 MAb对不同血清型BTV阳性血清具有良好的阻断效果,而对AKAV、IBAV、BRV和FMDV阳性血清无阻断作用。本研究建立的竞争ELISA方法与IDEXX公司的试剂盒检测包括65份已知背景血清和322份采自广西省的山羊血清样品,检测结果符合率分别达100%和98%。该竞争ELISA方法的建立为BTV抗体的监测提供了安全、快速、准确的技术手段。; 耿宏伟秦永丽李俊平杨涛孙恩成刘霓红白安斌徐青元王凌凤赵晶覃绍敏林俊郭怡璠吴东来; 关键词：蓝舌病病毒竞争ELISA

抗蓝舌病病毒VP7和NS2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：4: 2011年; 为建立蓝舌病病毒(BTV)的检测方法和研究该病毒蛋白的功能,本研究利用BTV血清8型(BTV8)免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾淋巴细胞与SP2/0细胞融合,制备单克隆抗体(MAb)。并以BTV8作为包被抗原建立间接ELISA方法,经筛选获得了8株稳定分泌抗BTV8 MAb的杂交瘤细胞株(1B2、1F6、2B1、2D10、3B6、3D9、4D4和4D12)。Western blot结果显示,MAb 1F6、2B1、2D10、3B6、3D9与BTV8 VP7蛋白反应,MAb B2、4D4、4D12与BTV8 NS2蛋白反应。间接免疫荧光结果显示,该8株MAb与24型BTV血清型呈不同的反应谱系。本研究所获得的MAb为建立BTV免疫学检测方法和相关病毒蛋白的功能研究提供了实验依据。; 秦永丽孙恩成耿宏伟杨涛刘霓红赵晶王凌凤徐青元蔡绪禹李文京吴东来; 关键词：蓝舌病病毒 VP7蛋白单克隆抗体

全选清除导出

共1页<1>

王凌凤