王巧凤
- 作品数：9 被引量：130H指数：4
- 供职机构：北京协和医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗巨细胞病毒早晚期抗原单克隆抗体制备及在病毒培养物鉴定中的初步应用
- 2017年
- 目的制备抗CMV早晚期抗原单克隆抗体并在病毒培养物鉴定中初步应用。方法CMV感染MRC-5细胞24h、48h和72h后甲醛灭活的可溶性抗原免疫BALB／e小鼠，小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞NS-1进行融合。酶免法筛查阳性杂交瘤并有限性稀释法进行克隆。免疫荧光及印迹对筛选后的克隆进行鉴定，最终获得的杂交瘤制备腹水并使用ProteinG进行纯化。纯化后单抗应用于CAP室间质评标本以及临床标本CMV培养物的鉴定。结果3只小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合后初步筛查出约110株阳性克隆。剔除与其它抗原有交叉反应、抗体效价低、非全覆盖早晚期抗原的克隆最终获得抗CMV单抗杂交瘤1株，即2385-1。免疫荧光显示2385-1株单抗与CklV感染后3h-120h的MRC-5细胞均反应，即覆盖即刻、早期和晚期抗原。免疫印迹试验显示2385-1株单抗与CMV抗原25KD-50KD之间的5个蛋白条带结合。2385-1株单抗免疫球蛋白亚型为IgGl。ProteinG纯化腹水后的单抗效价≥1：12800。纯化单抗染色鉴定6份室间质评及10份临床标本CMV培养物全部符合。结论初步应用显示制备的抗CMV早晚期抗原单克隆抗体性能良好。
- 崔京涛闫文娟张伟红王巧凤许少侠谢宏杰倪安平
- 关键词：巨细胞病毒单克隆抗体早期抗原
- 自动化梅毒螺旋体抗体初筛实验的研究被引量：13
- 2013年
- 目的 探讨自动化梅毒螺旋体抗体初筛实验的特异性并进行流程改进分析.方法 收集2012年11月北京协和医院患者血清标本4690份.采用化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）对4690份血清标本进行梅毒血清学初筛,阳性标本进行梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）复检并同时行梅毒快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）.CMIA初筛与TPPA复检不符的标本进行荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）验证.结果 4690份血清标本经CMIA初筛96份阳性（2.04％）.在96份标本中,TPPA复检阳性仅67份（69.79％）,RPR检测41份阳性（42.71％）.29份标本CMIA阳性而TPPA阴性的标本,FTA-ABS验证结果IgM全部阴性,3份标本IgG抗体可疑阳性、26份IgG抗体阴性.结论 CMIA进行梅毒血清学筛查时存在假阳性问题,需要改进筛查流程.
- 陈兰兰邵燕玲王巧凤许少侠张伟红崔京涛孔令君杨启文倪安平
- 关键词：梅毒
- 透析患者血清HBsAg假阳性伴HIV可疑一例分析
- 吴卫许少侠黄嫒郭野杨卓司永珍谢田王巧凤崔巍
- 关键词：HBSAG假阳性
- 梅毒实验诊断中增强化学发光技术与其它血清学比对以及在急诊筛查流程的探讨被引量：4
- 2015年
- 目的 通过分析梅毒螺旋体血清学比对试验,探讨增强化学发光技术（enhanced chemiluminescence technologies,ECT）在急诊化验室筛查流程.方法 增强化学发光技术与梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TP-PA）法同时检测2013年4月～2014年5月间257例患者血清标本梅毒螺旋体抗体,二者不相符的检测结果,使用梅毒快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）和荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）进行验证.结果 ECT与TP-PA比对敏感度为98.9％,特异度为88％,二者具有较高的一致性（K=0.921,P＜0.05）;二者结果不符标本11例（4.28％）,ECT阳性TP-PA阴性的不符标本9例中,FTA-ABS IgG抗体9例均为阴性,RPR检测阳性1例;ECT阴性TP-PA阳性的不符标本2例,RPR检测与FTA-ABSIgG抗体均为阴性.经FTA-ABS验证后的ECT敏感度为100％,特异度为88.3％.结论 ECT敏感度高,特异度较好,且简便快速的方法学适用于急诊化验室梅毒血清学试验筛查.ECT阳性时,建议使用RPR检测以确定疾病的活动性.
- 于连辉崔京涛贾妍闫文娟王巧凤许少侠张伟红陈倩倪安平
- 关键词：梅毒梅毒螺旋体颗粒凝集试验
- 低危人群梅毒螺旋体抗体初筛试验结果分析及流程改进建议被引量：11
- 2015年
- 目的通过分析低危人群中梅毒螺旋体抗体初筛试验结果,对相应流程提出改进措施。方法用化学发光微粒子免疫分析法(chemiluminescent microparticle immunoassay,CMIA)进行梅毒血清学初筛试验,阳性标本进行梅毒螺旋体颗粒凝集试验(Treponema pallidum particle agglutination,TPPA)和梅毒快速血浆反应素环状卡片试验(rapid plasma regain card test,RPR)。CMIA与TPPA结果不符者用荧光螺旋体抗体吸收试验(fluorescent treponemal antibody absorption test,FTA-ABS)验证。结果41 275份血清标本中,经CMIA初筛阳性608份(1.47%),CMIA S/CO值中位数(25分位数,75分位数)为7.31(2.12,20.33)。608份初筛阳性标本中,TPPA复检阳性仅369份(占60.69%),RPR阳性182份(占29.93%)。239份CMIA阳性而TPPA阴性的标本中,FTA-ABS验证结果显示,Ig M类抗体全部阴性,19份Ig G类抗体阳性。当CMIA S/CO≥1时进行TPPA法复检,TPPA复检阳性者判断为梅毒感染血清学阳性时,假阴性率为4.9%(19/388),假阳性率为0%。结论 CMIA法梅毒血清学初筛试验存在假阳性问题,应当结合TPPA复检结果进行判断,并注意定期复查。
- 陈兰兰王巧凤崔京涛许少侠张伟红闫文娟孔令君杨启文倪安平
- 关键词：梅毒化学发光微粒子免疫分析法梅毒螺旋体颗粒凝集试验
- 乙型肝炎病毒前S1抗原检测的临床价值被引量：93
- 2006年
- 目的探讨乙型肝炎病毒前S1抗原与乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、抗HBe(Anti-HBe)的相关性。方法对450例乙肝患者血清进行酶免法(EIA)检测前S1抗原、微粒子酶免分析法(MEIA)检测HBeAg、定量PCR内标法检测HBV-DNA。同时对用MEIA检测乙型肝炎病毒血清标志物均阴性的72例正常健康人血清也进行前S1抗原检测。结果450例HBV-DNA阳性的乙肝患者中,HBeAg阳性率为76．8％,前S1抗原的阳性率为61．5％,其中:前S1抗原的阳性率在HBeAg阳性患者中为61．6％、在抗-HBe阳性患者中为61．5％。HBV-DNA阳性情况下HBeAg阳性与HBeAg阴性患者的前S1抗原阳性率,两组经x2检验,P>0．05无明显差异。结论前S1抗原、HBeAg与HBV DNA符合率较高,前S1抗原与HBeAg无明确相关。对无条件检测HBV DNA而HBeAg阴性的血清,检测前S1抗原,可起到提示病毒是否复制的补充作用,如与其他乙型肝炎病毒血清标志物同时检测,对临床会更有意义。
- 窦亚玲李永哲刘志肖高学慧王巧凤倪安平
- 关键词：乙型肝炎前S1抗原乙型肝炎病毒DNA乙型肝炎E抗原
- 幽门螺杆菌感染与原发性肝癌关系相关性分析被引量：3
- 2005年
- 目的研究幽门螺杆菌感染与原发性肝癌关系,探讨原发性肝癌的发病机制。方法分别采用微粒子酶免分析和 ELISA 法检测原发性肝癌患者和健康体检者的乙肝表面抗原和幽门螺杆菌抗体。结果原发性肝癌患者的乙肝表面抗原和幽门螺杆菌的感染率明显高于健康体检者,乙肝表面抗原的感染率分别为58.5%和2.1%,幽门螺杆菌的感染率分别为68.2%和49.3%。结论乙型肝炎病毒感染和幽门螺杆菌的感染与原发性肝癌有明显的相关性。
- 刘志肖窦亚玲王巧凤李晓霞
- 关键词：幽门螺杆菌感染原发性肝癌患者乙肝表面抗原ELISA法检测幽门螺杆菌抗体健康体检者
- 透析患者血清HBsAg假阳性伴HIV可疑一例分析被引量：6
- 2012年
- HBsAg和HIV抗体的检测分别在HBV感染和HIV感染的诊疗中具有重要意义。现阶段HBsAg和HIV抗体主要通过血清免疫学方法检测，其中ELISA法检测HBsAg或HIV抗体的假阳性病例时有报道，而全自动化学发光免疫分析仪的假阳性病例较为少见。该文即报道了一例用全自动化学发光免疫分析仪检测透析患者血清HBsAg假阳性伴HIV抗体可疑的病例，并对可能的原因进行了深入探讨。
- 吴卫许少侠黄媛郭野司永珍杨卓谢田王巧凤崔巍
- 抗刚地弓形体单克隆抗体制备鉴定及初步应用
- 2018年
- 目的制备抗弓形虫特异性单克隆抗体并初步应用。方法弓形虫RH株体外细胞培养增殖、纯化后灭活并超声波破碎免疫BALB/c小鼠,小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞NS-1进行融合。酶免法筛查阳性杂交瘤并局限性稀释法进行克隆。免疫荧光、组化及印迹对筛选后的克隆进行鉴定,最终获得的杂交瘤制备腹水并使用Protein G进行纯化。结果 2只小杂交瘤融合后初步筛查出约80株阳性克隆。剔除与其它抗原有交叉反应、抗体效价低的克隆,最终获得抗弓形虫单抗杂交瘤1株,即14H4-1。免疫荧光和免疫组化显示该株单抗与弓形虫RH具有良好的反应性,免疫印迹试验显示与弓形虫28kDa抗原条带结合。14H4-1单抗免疫球蛋白亚型为Ig G1,Protein G纯化腹水后的单抗效价≥1∶12800。14H4-1单抗已应用排除2例弓形虫感染疑似诊断。结论制备的抗弓形虫单克隆抗体性能良好,可应用于弓形虫感染病原学检测。
- 闫文娟崔京涛解宏杰张伟红王巧凤许少侠倪安平
- 关键词：弓形虫单克隆抗体
