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王建忠: 作品数：11 被引量：85H指数：5; 供职机构：吉林大学更多>>; 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>; 相关领域：农业科学交通运输工程机械工程更多>>

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新城疫流行病学新特点及鹅新城疫防控策略被引量：56: 2015年; 新城疫(Newcastal disease,ND)是危害我国养禽业最严重的疫病之一,与高致病性禽流感并列为世界公认的最重要的2个禽类疫病。该病为OIE规定的必须报告的疾病,也是我国规定的一类动物疫病,世界各国对新城疫的防制和研究一直十分重视。由于对该病采取的严格防控措施,包括扑杀、强制性免疫等,新城疫的暴发流行得到了一定的控制。; 丁壮尹仁福薛聪王建忠钱晶; 关键词：新城疫基因型水禽流行病学

新城疫病毒3′及5′末端非编码区序列的反向遗传研究: 2014年; 以新城疫病毒(NDV)LaSota株感染性克隆PCI-La为平台进行反向遗传操作,并利用PCR技术将其3′端和5′端非编码区分别替换为鹅源NDV NA-1株3′端和5′端非编码区,以及3′端和5′端非编码区同时替换,通过生物学软件DNAStar对替换后的序列进行比对分析,所替换的序列未出现基因突变现象,证明非编码区替换成功,从而分别获得3株突变全长感染性克隆pCI-rL-NL、pCI-rL-NT、pCI-rL-NL-NT;将所获得的这3株突变感染性克隆分别与辅助质粒pCI-NP、pCI-P、pCI-L共转染BSR细胞,进行重组病毒的拯救。结果显示,pCI-rL-NL、pCI-rL-NT两种质粒表达系统均可拯救到有感染活性的病毒粒子,其HA效价为24,23,HI试验及间接免疫荧光试验结果均为阳性,并且通过电镜观察到具有典型副黏病毒科特征的、有囊膜的NDV颗粒。本试验成功构建了2株NDV LaSota突变株的反向遗传操作系统,为后期进行重组NDV致病性的研究奠定基础,也为进一步研究筛选新型分子标记疫苗、病毒活载体疫苗和抗病毒药物提供了可能。; 李想高超李芹王建忠杨闽楠王泽张晓东丁壮; 关键词：NDV 拯救

鸡传染性法氏囊病超强毒株的分子鉴定被引量：8: 2013年; 通过RT-PCR方法从山西省不同地区养鸡场病、死鸡法氏囊组织中扩增得到IBDV SX/12 VP2基因全长,将其克隆至pMD18-T载体。测序分析结果表明,IBDV SX/12 VP2全长为1 356 bp,推导其编码452个氨基酸;核苷酸与氨基酸同源性分析显示,二者均与超强参考毒株同源性较高,分别为99.2%和99.6%;遗传进化树分析结果表明,IB-DV SX/12与超强参考毒株位于同一进化分支,IBDV SX/12高变区关键氨基酸具有以下特征:222S,249Q,254G,256I,279D,284A,294I,299S以及SWSASGS七肽区不变,超强参考毒株高变区关键氨基酸为:222A,249Q,254G,256I,279D,284A,294I,299S,除222S外,其他关键位点氨基酸均符合超强毒株特征,因此,从分子水平推断IBDV SX/12属于超强毒株。; 詹丽娥陆冰洋刘华栋王彩先唐娟詹海杰李芹王建忠丁壮; 关键词：传染性法氏囊病病毒 VP2基因分子鉴定

基于CMV启动子NDV基因Ⅶ型NA-1株活载体构建及免疫特性评价: 新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）也被称为禽副黏病毒1型（avianparamyxovirus serotype-1，APMV-1)，广泛分布于世界各地，严重危害全球家禽养殖业健康发展。...; 王建忠; 关键词：反向遗传学基因VII型鹅细小病毒 VP3

一种表达鹅细小病毒VP3基因的重组新城疫病毒及其构建方法: 本发明公开了一种表达鹅细小病毒VP3基因的重组新城疫病毒及其构建方法，属于重组病毒疫苗领域。该重组新城疫病毒为鹅源分离株，其F蛋白的裂解位点氨基酸是GRQGRL，P3基因位于新城疫病毒P基因和M基因之间非编码区。将转录质...; 丁壮王建忠丛彦龙李芹李想; 文献传递

小反刍兽疫病毒Nigeria 75/1株病毒样颗粒的构建及其免疫原性被引量：1: 2017年; 为了构建具有天然构象的小反刍兽疫病毒Nigeria 75/1株病毒样颗粒,本试验扩增了Nigeria 75/1株M、F和H基因,并分别克隆至双启动子载体pFastBac^(TM) Dual中,构建含有双目的基因的重组供体质粒pFastBac^(TM) Dual-2M、pFastBac^(TM) Dual-2F和pFastBac^(TM) Dual-2H;测序正确后转化至DH10Bac^(TM) 感受态细胞,同源重组获得穿梭质粒rBacmid-2M、rBacmid-2F和rBacmid-2H;将其分别转染昆虫细胞Sf9获得重组杆状病毒rpFB-2M、rpFB-2F和rpFB-2H。以鼠抗M、H蛋白的主要抗原表位区多克隆抗体与绵羊抗PPRV阳性血清对重组杆状病毒感染细胞进行间接免疫荧光(IFA)鉴定,可见特异性荧光;以3种重组杆状病毒共感染昆虫细胞Sf9的方式组装病毒样颗粒,放大培养后进行病毒样颗粒纯化。Western blot检测纯化后样品可见相对分子质量为38 000,59 000,68 000左右的条带,表明基质膜蛋白与2种囊膜糖蛋白成功组装出病毒样颗粒,且免疫小鼠可诱导产生保护性中和抗体。本试验为后续小反刍兽疫病毒(PPRV)病毒样颗粒疫苗的进一步研发奠定了基础。; 闫飞虎赵梓淇王化磊赵永坤邱泊宁王建忠王铁成黄耕高玉伟冯娜杨松涛夏咸柱; 关键词：小反刍兽疫病毒血凝素蛋白融合蛋白

鸡传染性法氏囊病毒病毒样颗粒的制备被引量：7: 2014年; 为了制备鸡传染性法氏囊病毒病毒样颗粒,本试验通过RT-PCR技术扩增出鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株JL株的VP2全长基因,并将其插入杆状病毒表达系统的供体质粒pFastBacHTA中,构建含有IBDV VP2基因的重组供体质粒pFast-VP2,转化DH10Bac E.coli感受态细胞中,经蓝白斑筛选,获得重组杆粒rBacmid-VP2,将重组杆粒rBacmid-VP2转染sf9细胞后得到重组杆状病毒vBac-VP2。rBac-VP2感染sf9细胞,提取DNA,经PCR电泳分析,得到1条与预期大小相符的特异性条带;间接免疫荧光检测,可见特异性荧光;Western-blotting分析,在大约53 000处出现1条特异性的蛋白条带;电镜观察感染重组杆状病毒的细胞上清和沉淀,均可见重组VP2蛋白自行组装形成的病毒样颗粒。试验结果表明IBDV VP2基因在昆虫细胞中得到了表达,并自组装成了IBDV病毒样颗粒。本试验为研制鸡传染性法氏囊病病毒样颗粒疫苗奠定了基础。; 李芹王建忠黄楚荻穆昱周玉龙高超杨闽楠赛度丁壮; 关键词：鸡传染性法氏囊病毒 VP2 真核表达病毒样颗粒 SF9细胞

液力缓速器气-液控制系统研究: 简述了液力缓速器工作原理，重点介绍了液力缓速器气-液控制系统的结构组成与核心部件，并对其工作过程进行了详细的分析研究；同时建立了比例电磁阀的数学模型，并对其进行了试验验证，结果表明液力缓速器气-液控制系统及其核心部件能够...; 王建忠初亮卢新田; 关键词：液力缓速器

一种表达鹅细小病毒VP3基因的重组新城疫病毒及其构建方法: 本发明公开了一种表达鹅细小病毒VP3基因的重组新城疫病毒及其构建方法，属于重组病毒疫苗领域。该重组新城疫病毒为鹅源分离株，其F蛋白的裂解位点氨基酸是GRQGRL，P3基因位于新城疫病毒P基因和M基因之间非编码区。将转录质...; 丁壮王建忠丛彦龙李芹李想; 文献传递