王玉 作品数:19 被引量:17 H指数:3 供职机构: 上海交通大学附属第六人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市基础研究重大(重点)项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
低频超声联合微泡促进脂质体介导的人前列腺癌细胞野生型P53基因转染 目的:研究低频超声联合微泡在促进脂质体介导的人前列腺癌细胞野生型P53基因转染.方法:选用频率为21KHz,功率为46mW/cm2的低频超声,占空比2:8(开2秒,停8秒),辐照人前列腺癌PC-3细胞5分钟.PC-3细胞... 白文坤 张蔚 杨雨 王玉 胡兵卵巢硬化性间质瘤超声表现1例 王玉 李勤 胡兵MiR-182模拟物提高1型糖尿病小鼠的心脏功能 被引量:3 2014年 目的探讨miR-182模拟物对1型糖尿病小鼠心脏功能的影响及可能作用机制。方法 40只8周龄雄性C57小鼠随机分为正常对照组(n=5),miR-182模拟物对照组(n=5),1型糖尿病组(n=15),1型糖尿病+miR-182模拟物治疗组(n=15)。腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立1型糖尿病动物模型。实验于8周末结束,采用小动物用高分辨超声仪测量小鼠心脏功能;运用透射电镜观察心肌组织超微结构改变;利用real-time PCR技术检测心肌组织β-肌球蛋白重链(β-MHC),α-肌球蛋白重链(α-MHC),心房钠尿肽(ANP),I型(Col I)和III型胶原(Col III)mRNA及miR-182 mRNA的表达含量。结果 1miR-182模拟物可改善1型糖尿病小鼠的心脏功能,增加心脏射血分数及左室短轴缩短率(P<0.01);2miR-182模拟物可降低糖尿病小鼠心肌组织ANP、Col I、Col III的表达及β/a-MHC比值(P<0.01);3miR182模拟物可改善1型糖尿病小鼠心肌超微结构变化,减轻自噬。结论MiR-182模拟物能改善1型糖尿病小鼠的心脏功能,其机制可能与减轻心肌肥大和心肌纤维化,减轻线粒体结构损伤及减轻自噬有关。 孟哲颖 王玉 南淑良 林艳端 徐卫平 胡兵 申锷关键词:糖尿病 心脏功能 心肌肥大 自噬 小鼠 低频超声抑制人前列腺癌细胞PC-3侵袭的研究 被引量:1 2014年 目的 研究低频超声联合微泡抑制人雄激素非依赖型前列腺癌细胞侵袭及可能分子机制.方法 以频率21 kHz、声强为46 mW/cm2连续波超声辐照人前列腺癌PC-3细胞悬液30 s.分3组:对照组,单独超声组及超声联合微泡组(加声诺维200 μl).辐照后,绘制细胞生长曲线;辐照后培养12 h,Transwell模型进行细胞体外侵袭实验,辐照后24 h实时定量PCR检测对基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9信使核糖核酸表达的影响.结果 辐照后各组细胞继续培养12 h,各组细胞生长区别不明显(均P>0.05);辐照后12 h,低频超声联合微泡组侵袭细胞数量明显少于对照组(P<0.05);低频超声联合微泡能够下调基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9的表达(P<0.05).结论 低频超声联合微泡能够抑制人雄激素非依赖型前列腺癌细胞PC-3的侵袭,并且可能通过下调基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9信使核糖核酸的表达来实现. 白文坤 王玉 陈旖旎 张蔚 胡兵关键词:超声处理 微气泡 前列腺肿瘤 肿瘤浸润 低频超声联合微泡辐照后DU-145细胞中Beclin-1表达上调(英文) Objective Castrate-resistant prostate cancer(CRPC) is hard to treat.Autophagy plays important roles in cancer ... 王玉成纤维细胞生长因子21对高糖诱导心肌细胞肥大的保护作用 被引量:4 2015年 目的观察高糖诱导原代心肌细胞时成纤维细胞生长因子21(FGF21)的表达,初步探讨内源性FGF21对高糖诱导心肌细胞肥大的保护作用。方法原代培养C57BL/6J乳鼠心肌细胞,观察FGF21在不同糖浓度(5、25、33和45 mmol/L)以及不同作用时间(24和48 h)的表达情况。设计并合成可沉默FGF21基因的小干扰RNA(siRNA),观察心肌细胞的形态学变化,并采用Real-time PCR检测心肌细胞肥大表型ANP、β-MHC mRNA的表达变化。结果 FGF21水平随着高糖浓度升高而升高,同一时间点高糖组(33和45 mmol/L)的FGF21水平高于对照组(P<0.05);FGF21水平随高糖作用时间延长出现先升高后降低的趋势,相同糖浓度组24 h时的FGF21水平升高,而48 h时的FGF21水平较24 h时降低(P<0.05);高糖组(33和45 mmol/L)心肌细胞FGF21 mRNA表达高于对照组,随高糖作用时间延长心肌细胞FGF21 mRNA表达水平先升高后降低(P<0.05)。FGF21-siRNA处理后,高糖诱导的心肌细胞肥大更为显著,ANP、β-MHC表达水平升高(P<0.05)。结论高糖时,内源性FGF21表达水平与糖浓度存在一定的依赖性;FGF21可能参与高糖诱导心肌细胞肥大的过程,起到拮抗心肌细胞肥大的保护性作用。 孟哲颖 王玉 林艳端 南淑良 胡兵 申锷关键词:成纤维细胞生长因子 心肌细胞肥大 小干扰RNA 比较不同频率低频超声联合微泡促进脂质体介导的pEGFP质粒转染人前列腺癌细胞的实验研究 被引量:2 2015年 目的比较不同频率低频超声联合微泡促进脂质体介导的p EGFP质粒转染人前列腺癌PC3细胞。方法实验共分7组:空白对照组仅人前列腺癌PC3细胞株,不进行任何处理;质粒组每毫升细胞悬液中加入1μg质粒;脂质体组每毫升细胞悬液中加入100μl转染液;脂质体+微泡组每毫升细胞中悬液加入100μl转染液和200μl微泡,低频超声联合脂质体+微泡组每毫升细胞悬液中加入100μl转染液和200μl微泡,同时采用声功率为400 m W/cm2的脉冲超声波辐照模式,辐照时间240 s,占空比设为1∶1,依据辐照频率不同又分3个亚组,分别为20 k Hz超声组、500 k Hz超声组和1 MHz超声组。每组设6个复孔。各组经处理后继续培养24 h,荧光显微镜观察转染情况;流式细胞仪检测各组转染率。结果荧光显微镜下,低频超声联合脂质体+微泡组PC3细胞胞质内可见大量绿色荧光蛋白表达,明显多于其他各组,各亚组间又以20 k Hz超声组绿色荧光蛋白较多;脂质体组和脂质体+微泡组绿色荧光蛋白表达量亦多于空白对照组和质粒组。流式细胞仪检测显示,低频超声联合脂质体微泡组转染率高于质粒组,其中20 k Hz超声组转染率最高,明显高于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05)。脂质体组与脂质体+微泡组之间、500 k Hz超声组与1 MHz超声组之间转染率比较差异无统计学意义。结论低频超声辐照微泡可显著促进脂质体介导的p EGFP质粒转染人前列腺癌PC3细胞。在相同声功率、相同辐照面积下,随着辐照频率的升高,转染率呈现下降趋势。 张蔚 白文坤 寿文德 王玉 陈旖旎 杨雨 胡兵关键词:低频 微泡 质粒转染 前列腺癌细胞 微小RNA-182通过靶基因Rac1调控高糖诱导的心肌细胞肥大 被引量:4 2015年 目的探讨微小RNA(miR)-182调控高糖诱导的心肌细胞肥大的机制。方法利用生物信息学方法预测调控Ras相关的c3肉毒素底物1(Racl)的候选miR。在糖尿病组小鼠(db/db小鼠)和对照组小鼠(db/m小鼠)心肌组织中验证所有候选miR的表达,并分别与RaclmRNA做Pearson相关性分析。体外实验,将原代培养的乳鼠心肌细胞分为对照组(葡萄糖浓5mmol/L)和高糖组(葡萄糖浓度33mmol/L,HG组)。光镜下观察各组乳鼠心肌细胞的形态学变化。采用实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组乳鼠心肌细胞中miR-182和RaclmRNA表达水平。再将原代乳鼠心肌细胞分为4组,分别为正常糖组(葡萄糖浓度5mmol/L,对照组)、高糖组(葡萄糖浓度33mmol/L,HG组)、正常糖+miR-182模拟物组(miR-182组)和高糖+miR-182模拟物组(HG+miR-182组)。采用Lipofectamine2000转染miR-182模拟物(终浓度为100nmol/L)。分别采用RT.PCR和蛋白免疫印迹法检测乳鼠心肌细胞中Racl、3-肌球蛋白重链(B—MHC)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA和蛋白表达水平。结果生物信息学方法预测到参与调控Racl的候选miR共6个,分别为miR-182、miR-142—3p、miR-140、miR-101a、miR-429和miR-200b。糖尿病组小鼠心肌组织中miR-182和miR-142—3pmRNA表达水平均明显低于对照组(P均〈0.05),且miR-182、miR-142—3pmRNA均与RaclmRNA表达水平呈负相关(相关系数分别为r=-0.89102,r=-0.83719),miR.182与Racl负相关性最为显著。体外实验结果显示HG组乳鼠心肌细胞中miR-182mRNA表达水平明显低于对照组(P〈0.05),RaclmRNA表达水平则明显高于对照组(P〈0.05);光镜下观察HG+miR.182组乳鼠心肌细胞肥大程度轻于HG组;HG+miR-182组乳鼠心肌细胞Racl和B—MHCmRNA及蛋白表达水平均明显高于HG组(P均〈0.05)。结论miR-182可能通过其靶基因Racl对高� 孟哲颖 王玉 林艳端 南淑良 徐卫平 胡兵 申锷关键词:肌细胞 肥大 微RNAS RACL 细胞及瘤块种植人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤模型的比较 被引量:1 2014年 目的比较细胞悬液法及瘤块法种植裸鼠前列腺癌皮下移植瘤,以期获得使瘤体生长最快,质量最佳的种植方式。方法采用细胞悬液及瘤块两种方式种植PC-3细胞人前列腺癌皮下移植瘤,比较两种种植方法所种植的移植瘤的成瘤率、成瘤潜伏期、瘤体形态以及移植瘤的中心坏死灶,同时对两种方法种植的皮下移植瘤进行常规病理学检查。本研究同时观察了PC-3细胞悬液浓度对于种植皮下移植瘤成瘤的影响。结果两种方式种植的移植瘤的成瘤率差异无统计学意义,采用瘤块种植的移植瘤生长较细胞种植稍快,瘤体形态各异,较容易发生中心性坏死;细胞悬液组成瘤稍慢,瘤体较规则,多呈圆形或椭圆形,发生中心性坏死较晚,而且随着细胞浓度增高,其成瘤潜伏期明显缩短。结论通过比较发现细胞悬液种植皮下移植瘤较瘤块种植更有优势,而且采用较高浓度细胞悬液种植可以有效缩短成瘤潜伏期,是一种较为理想的种植方式。 南淑良 申锷 林艳端 白文坤 王玉 胡兵关键词:裸鼠 皮下移植瘤 前列腺癌PC-3细胞 超声联合微泡造影剂辅助肿瘤治疗的研究进展 2012年 一、研究背景
随着生存环境的不断恶化以及人类本身寿命的延长,肿瘤早已衍变成威胁人类生命及生存质量的一把利刃.对于肿瘤的治疗,科学家一直在不断地探索中.目前,放、化疗俨然已经成为诸多肿瘤的首选疗法.其虽能遏制肿瘤发展,但同时也会摧毁一些非肿瘤组织甚至是机体免疫系统.所以,科学家们一直试图寻找既能准确杀死肿瘤细胞,又不损伤机体本身免疫力的一种更先进的治疗方法--靶向治疗. 王玉 申锷 胡兵关键词:肿瘤发展 微泡造影剂 机体免疫系统 超声 人类生命