王琥
- 作品数：23 被引量：14H指数：2
- 供职机构：三峡大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学电子电信化学工程更多>>
- HCTP特异性穿膜效应及介导穿膜的凋亡素生物学活性观察
- 目的观察 HPV 阳性宫颈癌细胞特异性穿膜肽(HCTP)的穿膜效应及其介导穿膜的凋亡素(Apoptin)对 HPV 阳性宫颈癌细胞的特异杀伤效应。方法原核表达并纯化制备 GFP-HCTP、 Apoptin-HCTP 融合...
- 钟春燕杨建林王琥柳长柏
- 关键词：凋亡素宫颈癌
- 文献传递
- 顺铂诱导人宫颈鳞癌细胞Caski细胞凋亡的分子机制被引量：2
- 2009年
- 目的研究顺铂对人宫颈癌Caski细胞体外增殖抑制作用及凋亡的影响,探究顺铂诱导宫颈鳞癌细胞凋亡的分子机制。方法运用体外细胞培养,顺铂以不同浓度(20、10、5、2、1μg/ml)作用于人宫颈癌Caski细胞。采用噻唑蓝(MTT)法测定顺铂对细胞杀伤率;用流式细胞检测法测定细胞周期时相改变及细胞凋亡率;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNALadder现象;Westernblot检测凋亡相关基因Bcl-2等表达;荧光染色观察细胞线粒体膜电位的改变。结果顺铂对人宫颈癌Caski细胞有较强的抑制作用,有明显的时间和剂量依赖性;可使Caski细胞G2/M期比例明显下降(P<0.01),S期比例升高(P<0.01);诱导细胞凋亡发生;顺铂作用Caski细胞后,Bcl-2表达量减少,Bax表达增加,Caspase3活化,线粒体膜电位改变。结论顺铂在体外可有效抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,可能通过影响肿瘤细胞DNA合成,改变细胞周期时相分布、诱导凋亡发挥抑制细胞增殖作用,其凋亡分子机制与Bcl-2家族表达调控,线粒体膜跨膜电位下降的线粒体参与凋亡途径相关。
- 杨建林周永芹王琥
- 关键词：顺铂CASKI细胞凋亡分子机制
- 温度、血清以及肝素等因素对TAT穿膜效应的影响
- 2010年
- 目的:探讨在不同实验条件下,二甲基亚砜(DMSO)预处理培养细胞对TAT穿膜效率的影响。方法:体外培养Caski、A549、HepG2及COS7细胞株在不同实验条件下与荧光标记多肽TAT或无意义肽NCO共孵育。荧光显微镜观察TAT-FITC的穿膜效率及其胞内定位;荧光酶标仪定量测定细胞内荧光强度。结果:10%DMSO预处理37℃和4℃下各细胞株后,TAT-FITC均可高效穿膜入胞,且胞浆、胞核中均匀分布,胞核浓度高于胞浆;相同条件下未见NCO-FITC穿膜进入细胞。无血清组(Caski:1881±66、HepG2:2112±74、A549:2126±59)血清组较有血清组(Caski:1312±90、HepG2:1308±11、A549:1370±22)细胞内荧光强度大,且有显著差异(P<0.05)。抑制剂Heparin存在时,Caski细胞荧光强度则明显减弱(加肝素组:1208±29,加肝素组:895±56;P<0.05)。结论:10%DMSO预处理不同培养细胞在37℃和4℃条件下均可提高TAT的穿膜效率,血清和Heparin可减弱DMSO的穿膜增强效应。
- 王琥柳长柏黄宇彬
- 关键词：二甲亚砜TAT血清肝素
- 细胞膜穿透肽hPP8及其用途
- 本发明属于生物医学领域，涉及一种人源性细胞膜穿透肽hPP8及其用途。本发明所提供的细胞膜穿透肽hPP8具有穿透细胞膜的功能，可携带蛋白质等大分子跨膜进入多种细胞内；且由于该肽段来源于人类蛋白，引起人体免疫反应的可能性小，...
- 柳长柏王琥邹黎黎马节兰杨英桂
- 文献传递
- 穿膜肽凋亡素融合蛋白诱导黑色素瘤细胞凋亡的实验研究
- 2017年
- 目的探讨新型细胞穿膜肽h PP10和凋亡素Apoptin融合蛋白介导小鼠黑色素瘤细胞B16凋亡的效应。方法构建p ET15b-h PP10-Apoptin、p ET15b-Apoptin原核表达质粒,经IPTG诱导和NI-NTA树脂纯化后得到融合蛋白;运用TUNEL法体外检测h PP10-Apoptin诱导B16细胞的凋亡效应;制备荷瘤小鼠模型,并在体内检测h PP10-Apoptin融合蛋白的抗肿瘤能力。结果融合蛋白h PP10-Apoptin经Western blot鉴定正确,且此融合蛋白能在体内外有效诱导B16黑色素瘤细胞凋亡。结论新型细胞穿膜肽h PP10可有效携带Apoptin穿透细胞膜并发挥抗肿瘤作用。
- 赵雪丽宋阳张明柳长柏王琥
- 关键词：蛋白转导凋亡素细胞凋亡
- 蛋白质二硫键异构酶对H9c2心肌细胞高糖及缺氧/复氧损伤的影响机制研究被引量：1
- 2021年
- 目的探讨蛋白质二硫键异构酶(PDI)在糖尿病缺血性心脏病中的作用机制。方法利用H9c2大鼠心肌细胞建立高糖(HG,33 mmol/L葡萄糖)及缺氧/复氧损伤模型(H/G,提前30 min往密闭缺氧盒中灌注95%的氮气及5%的CO_(2)混合气体)和高糖+缺氧/复氧组(HG+H/R)组模型的过表达PDI腺病毒及下降PDI siRNA转染心肌细胞,检测各实验组大鼠乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)及高分子量脂联素(HMW-APN)的浓度,心肌细胞PDI、脂联素(APN)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)及糖调节蛋白78(Grp78)的表达。结果在HG、H/R以及HG+H/R组细胞模型中PDI的表达与正常组(葡萄糖浓度5.5 mmol/L)相比均明显减少,LDH活性[(179.7±10.4)、(218.4±18.4)、(328.2±5.3)比(91.0±11.0)U/L]、MDA浓度[(7.0±0.4)、(10.0±1.0)、(11.7±1.0)比(4.2±1.8)μmol/L]及Cleaved Caspase-3、Grp78蛋白表达明显升高,同时,APN及HMW-APN的蛋白表达显著减少[(2.01±0.21)、(1.64±0.27)、(1.20±0.14)比(2.62±0.12)μg/L,均P<0.05]。过表达PDI病毒干预后,H9c2细胞在高糖、缺氧/复氧条件下,APN及HMW-APN[(2.86±0.03)μg/L比(3.03±0.10)μg/L、(2.06±0.05)μg/L比(2.31±0.06)μg/L、(1.83±0.07)μg/L比(1.96±0.11)μg/L、(1.20±0.06)μg/L比(1.39±0.09)μg/L]的蛋白表达增加,细胞凋亡和氧化应激情况得到明显改善(均P<0.05)。利用特异性siRNA下降PDI的蛋白后,H9c2细胞在高糖及缺氧/复氧损伤条件下,APN及HMW-APN[(0.75±0.09)μg/L比(0.59±0.09)μg/L、(0.62±0.04)μg/L比(0.53±0.05)μg/L、(0.55±0.14)μg/L比(0.51±0.12)μg/L、(0.48±0.12)μg/L比(0.35±0.08)μg/L]的蛋白表达减少,LDH活性、MDA浓度及Cleaved Caspase-3、Grp78蛋白表达明显升高,细胞凋亡及氧化应激损伤增加(均P<0.05)。结论PDI可能通过调控APN及HMW-APN的蛋白表达,发挥对糖尿病缺血再灌注心肌细胞功能的影响。
- 黄子芮盛梦婷潘黎明张世忠朱志林王琥徐春丽藤林贺玲顾晨易偲李俊明
- 关键词：蛋白质二硫键异构酶脂联素心肌缺血损伤
- 二甲基亚砜（DMSO）增强细胞膜穿透肽TAT穿膜效率的实验研究
- 目的: TAT是最早被发现并被用于在体外和体内向胞内运送蛋白分子的细胞膜穿透肽,研究发现,其穿膜效率并不理想,亟需探索更佳穿膜条件以提高TAT穿膜效率。以二甲基亚砜(dimethyl sulphoxide, DMSO)预...
- 王琥
- 关键词：TATDMSO内吞
- 文献传递
- 多能干细胞制备方法的研究进展及问题被引量：1
- 2016年
- 多能干细胞为研究疾病的分子机制、药物筛选及再生医学应用提供理想的细胞来源,然而,当前多能干细胞的来源或制备方法面临众多瓶颈和挑战,本文回顾了多能干细胞制备方法的最新研究进展,为多能干细胞的后续研究提供思路。
- 王琥王嘉军罗中华王世雄
- 关键词：多能干细胞诱导多能干细胞
- 多肽介导的生物活性分子细胞靶向及胞内运输策略被引量：1
- 2009年
- 细胞膜屏障在保护细胞正常形态和功能的同时,也使很多有治疗作用的生物活性分子难以进入细胞内,使其应用受到极大限制。目前常用的向细胞内导入生物大分子的方式主要有电穿孔和脂质体转染等,但因其对细胞有较大毒性而多局限于体外实验研究。近年来,基于多肽的药物输送载体以其安全性、低毒性、低免疫反应性、靶向性及易于组装等优点被寄予厚望。本文就多肽在生物活性分子胞内运输过程、提高输送效率的策略作一综述。
- 王琥柳长柏
- 关键词：肽类核定位信号细胞穿透肽药物输送
- 细胞膜穿透肽hPP5及其用途
- 本发明属于生物医学领域，涉及一种人源性细胞膜穿透肽hPP5及其用途。本发明所提供的细胞膜穿透肽hPP5具有穿透细胞膜的功能，可携带蛋白质等大分子跨膜进入多种细胞内；且由于该肽段来源于人类蛋白，引起人体免疫反应的可能性小，...
- 柳长柏王琥邹黎黎马节兰杨英桂
