王露楠
- 作品数：120 被引量：741H指数：13
- 供职机构：北京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金首都医学发展科研基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学社会学经济管理更多>>
- HCV RNA RT-PCR测定室间质量评价的研究被引量：12
- 2000年
- 目的 建立国内HCVRNART PCR测定的室间质量评价系统。方法 室间质量评价研究工作采用的质控血清盘由 10支冻干质控血清组成 ,其中包括 2份强阳性、 2份弱阳性、 2份阴性和一个 5倍倍比稀释系列 (4份 )。将血清盘寄发给各参评实验室并要求各个实验室按照规定时间检测、回报结果 ,然后对结果进行统计分析。结果 多数参评实验室存在不同程度的假阳性和假阴性的问题。 2份强阳性标本检出率均为 87 5 % ,弱阳性标本 (含量分别为 6 76× 10 4 和 3 81× 10 4 拷贝数 /ml)检出率分别为 45 83%和 2 5 0 0 % ;阴性样本的假阳性率分别为 12 5 0 %和 16 6 7% ,2份阴性标本测定均正确 37家 ,占77 0 8% ;稀释系列测定正确的有 16家实验室 ,占 33 33 % ,仅 2家实验室稀释系列测定完全正确 ,5家实验室既存在假阴性又存在假阳性问题。结论 许多临床实验室虽然建立了PCR检测方法 ,但却存在特异性和灵敏度问题 ,有必要定期进行室间质量评价 ,保证该项目的检测质量。
- 王露楠李金明邓巍马嵘郑怀竞杨振华
- 关键词：丙型肝炎HCV-RNART-PCR
- HBV DNA聚合酶链反应测定质评血清盘的研制及其应用
- 2001年
- 目的 研制乙型肝炎病毒 (HBV)DNA聚合酶链反应 (PCR)测定室间质评用血清盘。方法 从血站献血员收集HBVDNA阴、阳性血浆。经处理后 ,组成血清盘。血清盘由 2 2份样本组成 ,包括 5份强阳性、2份弱阳性、5份阴性及 2个强阳性的 10倍稀释系列 (各 5份 )。并在全国 91个实验室进行应用。结果 稳定性试验表明 ,在室温、4℃及 37℃下贮存至少分别可稳定 5天、7天和 3天。反复冻融至 6次 ,HBVDNA量无明显变化。使用该血清盘对全国HBVDNAPCR测定的室间质评表明 ,对 5份阴性样本测定的假阳性率在 1.1%～ 9.9%之间 ;对强阳性样本测定假阴性率在 6 .6 %～ 14.3 %之间 ;对 2份弱阳性样本测定的假阴性率分别为 47.3 %和 41.8%。结论 目前全国HBVDNAPCR临床测定大部分实验室存在有不同程度的假阳性和 /或假阴性问题 ,有必要建立全国室间质评网络以提高检测质量和水平。
- 李金明王露楠邓巍郑怀竞杨振华
- 关键词：聚合酶链反应血清盘乙型肝炎HBV-DNA
- 内含人前列腺特异性抗原 mRNA 的耐核糖核酸酶病毒样颗粒的构建和表达被引量：1
- 2006年
- 目的构建原核表达系统,表达内含人前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)mRNA 部分序列的病毒样颗粒,该病毒样颗粒因噬菌体蛋白包被重组 RNA 而使其包裹的RNA 具有耐核糖核酸酶(RNase)的特性。方法采用聚合酶链反应扩增人前列腺特异性抗原cDNA 的部分保守区域,进行 TA 克隆后用限制性内切酶 Hind Ⅲ酶切获得所需要的目的片段,与用Hind Ⅲ酶切的表达载体 pNCCL1相连接.构建一新的表达载体 pNCCL1-PSA,再转化 E.Coli BL21-DE3,用 IPTG 诱导表达噬菌体 MS2包膜蛋白,包膜蛋白可进行自我组装成病毒样颗粒并将 PSAmRNA 部分序列包裹到病毒样颗粒内。结果成功构建得到了新的表达载体 pNCCL1-PSA,经原核表达得到耐 RNase 的内含 PSA mRNA 部分 RNA 序列的病毒样颗粒。结论本研究得到的表达载体 pNCCL1-PSA 及原核表达系统.可以作为以后构建和制备耐 RNase 的 PSA mRNA 标准品和质控品的的平台,为实验室 PSA mRNA 的检测提供新的标准品及质控品。
- 王露楠吴健民彭建明李金明王忠芳邓巍
- 关键词：前列腺特异性抗原病毒粒子噬菌体
- 检测抗丙型肝炎病毒编码的非结构蛋白NS3和NS5的天然双特异性抗体的试剂盒
- 本发明公开了一种检测抗丙肝病毒编码的NS3和NS5抗原双特异性抗体的试剂盒，属于临床检验学领域。本发明的试剂盒基于酶联免疫吸附检测技术，利用双抗原夹心法，包括HCV NS3和NS5两种抗原，可以检测存在于丙型肝炎患者血清...
- 李金明林贵高王露楠张瑞张括孙宇谢洁红李文丽樊高威
- 文献传递
- 单克隆抗体人源化技术研究进展被引量：3
- 2011年
- 单克隆抗体（monoclonal antibody,McAb）是来自单个B淋巴细胞或一个杂交瘤细胞克隆的只识别某一种特定抗原表位（抗原决定簇）的抗体。1975年Kohler和Milstein[1]共同创立了杂交瘤技术,首次获得了人工制备的单克隆抗体。单克隆抗体具有高度的特异性和均一性,且能大量制备,从而为抗体的研究和应用带来了突破,在疾病的预防、
- 潘阳王露楠
- 关键词：细菌噬菌体人源化抗体嵌合抗体
- 检测抗环瓜氨酸肽和抗免疫球蛋白G双特异性抗体的试剂盒
- 本发明公开了一种检测抗环瓜氨酸肽(CCP)和抗免疫球蛋白G(IgG)双特异性抗体的试剂盒，属于临床检验学领域。本发明的试剂盒基于酶联免疫吸附检测技术，利用双抗原夹心法，包括环瓜氨酸肽(CCP)和免疫球蛋白G(IgG)两种...
- 李金明汪维王露楠张括
- 抗核抗体谱检测的室间质量评价被引量：14
- 2006年
- 目的评价全国临床实验室检测抗核抗体谱的能力。方法每年进行2次室间质量评价,每次发放5支质评样本;要求各临床实验室在规定时间内检测,并回报检测结果、所用检测方法、仪器和试剂资料;卫生部临床检验中心对各实验室的结果进行统计分析,最后将结果反馈给各实验室。结果70％以上的实验室采用间接免疫荧光法测定抗核抗体谱,2003—2005年的阳性符合率分别为94．1％、93．0％和98．6％。对单一核型,包括均质型、颗粒型等检测结果符合率明显高于混合核型的检测。阳性样本,各实验室回报的滴度存在很大差异。可提取性核抗原抗体谱的检测方法主要有酶联免疫吸附法、间接免疫荧光法和免疫印迹法,采用免疫印迹法的实验室占90％以上,检测结果符合率存在明显差异。抗双链DNA(抗dsDNA)抗体检测整体成绩均接近或超过90％。结论抗核抗体的检测还有待于标准化。通过抗核抗体谱临床检验实验室间质量评价,可及时发现参评实验室检测中存在的问题,促进实验室不断提高检测质量。
- 王露楠邓巍李金明
- 关键词：自身免疫疾病
- 乙型肝炎表面抗原血清标准物质的研究被引量：13
- 2007年
- 目的研制国内用于 HBsAg 检测的血清标准物质。方法用 HBV 血清学标志物、抗-HCV、抗-HIV 均为阴性的献血员血浆,混合均匀,将 HBsAg 阳性血浆稀释至含量约40 IU/ml,然后进行真空冷冻干燥。检测方法采用电化学发光(ECLA)、化学发光免疫试验(cIA)和ELISA三种方法与国际标准(NIBSC 编号:00/588)同时检测,将结果进行比对。结果该标准物质定值为:(34.2±4.8)IU/ml。其稳定性实验表明室温(20～25℃,相对湿度20%～50%)可稳定4周;高温高湿度(37℃,相对湿度60%～80%)条件下,可稳定2周;在冰箱冷藏(2～8℃)保存,可稳定1年;-20℃可稳定1年以上。均一性检测结果:所采用的检测方法表明均匀性良好,无明显差异。结论该制备物可以作为 HBsAg 免疫测定的血清标准物质。
- 王露楠邓巍张瑞申子瑜陈文祥李金明
- 关键词：乙型
- 丙型肝炎病毒核酸国家标准物质的研究
- 背景和目的
丙型肝炎病毒核酸(HCVRNA)检测缺乏统一的定量标准，给临床的诊断和治疗带来了很多问题。研制国内用于HCVRNA扩增检测的血清标准物质，推进核酸检测的标准化。构建原核表达系统，表达内含丙型肝炎病毒...
- 王露楠
- 关键词：标准物质丙型肝炎病毒核酸噬菌体核糖核酸酶病毒样颗粒
- 文献传递
- 建立定性免疫测定中假阳性监测的室内质控方法被引量：9
- 2006年
- 目的建立利用实验室日常检测数据进行定性免疫测定假阳性监测的室内质控方法。方法测定数据为正态分布,采用半LEVEY-JENNINGS质控图法,即以实验室日常不少于20次检测的阳数率为基础,计算阳性率的均值(X-)和标准差(S),绘制质控图,以1+2S为失控规则。如为非正态分布,则采用直接概率计算法。结果半LEVEY-JENNINGS质控图法和直接概率计算法均适用于定性免疫测定假阳性统计室内质控。结论为临床免疫常规检测提供了具有可操作性的假阳性统计室内质控方法。
- 李金明王露楠邓巍王忠芳
- 关键词：免疫测定假阳性反应
