石立莹
- 作品数：38 被引量：68H指数：6
- 供职机构：天津医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市高等学校科技发展基金计划项目中华医学会医学教育分会医学教育研究立项课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 一株致普通棉耳狨猴严重下呼吸道感染的副粘病毒种系进化分析被引量：11
- 2007年
- 目的探讨副粘病毒Tianjin株的种系进化地位。方法将副粘病毒Tianjin株HN核苷酸、氨基酸序列与GenBank发布的副粘病毒相应序列进行比较,构建种系进化树,阐明副粘病毒Tianjin株在副粘病毒科中的分类地位。结果基于HN核苷酸序列的种系进化分析表明,副粘病毒Tianjin株属于副粘病毒科、副粘病毒亚科、呼吸道病毒属,与仙台病毒亲缘关系最近。Tianjin株与仙台病毒BB1株HN核苷酸、氨基酸序列同源性分别为94.8%、95.1%,与其他仙台病毒,在84.8%～88.7%和89.6%～91.7%之间。Tianjin株与BB1株HN核苷酸序列的差异明显大于同一进化分支内的仙台病毒之间的差异。Tianjin株HN蛋白存在18个独特的氨基酸残基变异。结论结合种系进化分析结果、病毒的宿主来源和致病特点,提示副粘病毒Tianjin株不属于仙台病毒现有的3个进化分支而自成独立的一支。
- 李梅石建党石立莹李晓眠张国际秦宇袁立军
- 关键词：副粘病毒仙台病毒
- 副粘病毒Tianjin株NP、P、M及L蛋白的生物信息学分析
- 2008年
- 为了进一步明确副粘病毒Tianjin株的来源和种系进化地位,探讨其高致病性的机制。对Tianjin株NP、P、M及L蛋白进行了生物信息学分析。进化树显示：Tianjin株属于副粘病毒亚科呼吸道病毒属,且很可能为仙台病毒新的基因型。相似性比较表明,P蛋白变异最大,相似性仅为78.7%～91.9%;L蛋白相似性最高,为96.0%～98.0%。序列比对显示：NP蛋白氨基酸序列中存在15个独特的变异位点,P蛋白存在29个,M蛋白存在6个,L蛋白存在29个。这些独特变异位点的存在很可能是导致Tianjin株在宿主来源和致病特点等方面与已知仙台病毒株具有较大差异的原因。
- 石立莹李梅李晓眠何健民袁立军
- 关键词：副粘病毒仙台病毒狨猴生物信息学
- 抗生素S_(632)A_3在体外抗柯萨奇病毒B_(3m)株作用的研究被引量：2
- 2004年
- 目的 :体外测定抗生素S632A3 抗柯萨奇病毒B3m 株的作用 ,为筛选新型抗病毒药物提供参考依据。方法 :用不同稀释度的抗生素S632A3 抑制柯萨奇病毒B3m 株对Vero细胞的感染作用 ,48h后观察细胞病变效应 ,并用MTT法测定细胞活性。结果 :抗生素S632A3 能明显抑制柯萨奇病毒对Vero细胞的致病变作用 ,使细胞存活率升高。结论 :该药物有较显著的抗柯萨奇病毒B3m 株的作用 ,且对细胞的毒性低 ,但该药物对柯萨奇病毒B3m 株无预防作用 ,是一种具有潜在开发前景的药物。
- 林睿荀培张媛媛石立莹李梅何健民李晓眠
- 关键词：VERO细胞MTT
- 仙台病毒在儿童急性呼吸道感染中的血清学调查被引量：18
- 2004年
- 目的 :检测仙台病毒在天津市儿童急性呼吸道感染中的情况。方法 :血凝抑制试验。结果 :39份患儿血清标本中检测出12份仙台病毒抗体阳性 ,阳性率30.77 % ;结论 :呼吸道疾病的高发季节 ,仙台病毒在儿童急性呼吸道感染中占重要地位。
- 刘春燕张媛媛姚薇李梅李晓眠何建民石立莹
- 关键词：血凝抑制试验仙台病毒呼吸道感染儿童
- 新型抗生素S632A<,3>体内外抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型增殖及对感染小鼠脑组织保护作用的研究
- HSV是人类最常见的病原之一,可引起多种疱疹性疾病,并与唇癌、宫颈癌密切相关.ACV抗HSV疗效肯定,但长期大量使用有毒副作用,并易产生耐药株.新型抗生素S632A<,3>是从土壤中分离出的一株放线菌产生的代谢产物,属戊...
- 石立莹
- 关键词：无环鸟苷VERO细胞单纯疱疹病毒性脑炎
- 文献传递
- CD155依赖m^(6)A修饰调控宫颈癌细胞的恶性行为
- 2022年
- 目的:探究CD155在宫颈癌中的作用和依赖m^(6)A修饰的调控机制。方法:应用数据库预测宫颈癌细胞中CD155(PVR)的表达情况,CD155对患者预后的影响,运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定宫颈癌细胞HeLa和宫颈永生细胞S12中CD155的表达水平。分别运用MTT、平板克隆、迁移侵袭等实验评估CD155对宫颈癌细胞HeLa生长、增殖、迁移和侵袭的影响。应用Western印迹法测定E-钙黏蛋白(E-cad)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平并评价CD155对EMT的影响。MeRIP-RT-qPCR检测CD155是否受m^(6)A调控,Western印迹法和qRT-PCR测定METTL3是否影响CD155蛋白和RNA的表达水平。放线菌素D处理细胞后检测METTL3对CD155RNA半衰期的作用,利用预测网站m^(6)ATaget预测CD155RNA甲基化位点的识别者(Reader),运用Western印迹法和qRT-PCR分析YTHDF1是否影响CD155蛋白和RNA的表达水平,放线菌素D处理细胞后检测YTHDF1对CD155RNA半衰期的作用,RIP-RT-qPCR实验进一步确定YTHDF1和YTHDF1-mut对CD155RNA下拉能力。结果:CD155在宫颈癌组织和细胞中表达较高,体内高表达CD155的患者生存率较低。相比S12细胞,HeLa细胞中CD155的表达增加(t=3.749,P<0.05)。CD155的高表达促进了体外宫颈癌细胞的生长(t=3.152,P<0.05)、增殖(t=3.706,P<0.05)、迁移(t=5.422,P<0.01)和侵袭(t=3.599,P<0.05),抑制E-cad的表达促进了Vimentin的表达。MeRIP-RT-qPCR结果显示CD155RNA受m^(6)A调控,METTL3促进了CD155蛋白和RNA(t=6.725,P<0.05)的表达,敲降METTL3之后CD155RNA半衰期降低(t=5.622、6.063、5.857,均P<0.05)。敲降YTHDF1之后CD155的蛋白水平降低,CD155RNA半衰期降低(t=10.93、5.602、4.359,均P<0.05)。在YTHDF1高表达的细胞中,CD155RNA被有效免疫沉淀(t=4.686,P<0.01),但在YTHDF1-mut转染的细胞中,免疫沉淀结果显示下拉的CD155RNA水平明显降低(t=4.462,P<0.05)。结论:CD155RNA在m^(6)A修饰的情况下,被YTHDF1特异性识别,进而稳定性增强和翻译增加,CD155表达增加促进了�
- 祁小珍石立莹
- 关键词：宫颈癌
- 副粘病毒Tianjin株F基因克隆及序列分析被引量：6
- 2007年
- 目的探索副粘病毒Tianjin株的来源和种系进化地位。方法以副粘病毒Tianjin株基因组RNA为模板,通过RT-PCR方法获得包括F基因全长的两个质粒克隆,分别进行序列测定。将拼接得到的F基因核苷酸序列及推导出的氨基酸序列与GenBank中公布的15株仙台病毒相应序列进行同源性比较,并构建系统进化树。结果副粘病毒Tianjin株与15株仙台病毒F基因核苷酸及氨基酸序列同源性分别在85.3%～94.5%和90.4%～95.4%之间。进化树分析表明,Tianjin株与仙台病毒BB1株亲缘关系较近,但仍有一定差距,与其他仙台病毒株关系较远。结论副粘病毒Tianjin株很可能不属于仙台病毒现有的Ohita株、Z株及BB1株所代表的3个进化分支,而是独立于这3个分支之外。
- 石立莹李晓眠李梅何健民袁立军
- 关键词：副粘病毒仙台病毒F基因系统进化树
- 副黏病毒Tianjin株重组血凝素-神经氨酸酶单克隆抗体的制备及在临床检测中的初步应用被引量：4
- 2008年
- 目的:建立双抗体夹心ELISA法,调查副黏病毒Tianjin株引起婴幼儿下呼吸道感染情况。方法:用纯化的重组HN片段免疫BALB/c小鼠,按常规方法制备单克隆抗体。以兔抗Tianjin株多克隆抗体为捕获抗体,单抗G7G7E7为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA法,检测104例下呼吸道感染患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)标本。结果:获得3株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株G7H4D3、G7D9G3和G7G7E7。3株单克隆抗体与副黏病毒Tianjin株有较高结合活性,与甲、乙型流感病毒,新城疫病毒(NDV),人副流感病毒(hPIV)1型、3型、肺炎支原体均无交叉反应性。ELISA相加试验和阻断试验表明,3株单抗识别相同或相近表位区域,识别的表位在抗病毒免疫应答中处于免疫优势地位。双抗体夹心ELISA法检测阳性率为1.92%(2/104)。结论:与RT-PCR和间接ELISA法比较,双抗体夹心ELISA法,具有敏感性高、特异性强的优点,适于临床检测使用。副黏病毒Tianjin株是婴幼儿下呼吸道感染的重要致病因子之一。
- 李霞李晓眠石立莹袁立军王卿王文秀李梅侯凯
- 关键词：单克隆血凝素类神经氨酸酶重组蛋白质类
- 仙台病毒Tianjin株噬菌体Fab抗体库的构建及初步筛选
- 2013年
- 目的构建仙台病毒Tianjin株噬菌体Fab抗体库,并进行初步筛选。方法用仙台病毒Tianjin株免疫小鼠,制备脾细胞悬液,提取小鼠脾细胞总RNA,RT-PCR扩增鼠抗体轻链(κ链)和重链Fd基因,将轻链基因和噬菌粒p3MH经SacⅠ和XbaⅠ双酶切后纯化回收,经T4 DNA连接酶连接,电转化E.coli XL1-Blue,构建轻链库;将重链Fd段基因和轻链库p3MH-κ经SpeⅠ和XhoⅠ双酶切后,纯化回收并连接,电转化E.coli XL1-Blue,获得噬菌体抗体库,计算重组率和抗体库滴度。以仙台病毒Tianjin株重组蛋白HN2为抗原进行初步筛选,制备噬菌体抗体,并进行测序。结果构建的免疫噬菌体抗体库库容为1.18×107,重组率为90%,制备的噬菌体抗体滴度为1011pfu/ml;经初步筛选,噬菌体富集了约63.6倍,获得2株与重组蛋白HN2有结合活性的阳性克隆,经NCBI BLAST进行同源性分析,显示为鼠源性抗体,经IMGT分析,显示轻链基因与Vk9亚群基因的同源性为94.87%,重链基因与VH7亚群基因的同源性为97.85%。结论成功构建了仙台病毒Tianjin株噬菌体Fab抗体库,为该病毒株的诊断、疾病治疗及致病机制等研究奠定了基础。
- 李霞李晓绵石立莹李梅
- 关键词：仙台病毒FAB噬菌体抗体库
- 两种检测抗生素S632A对Vero细胞毒性作用方法的比较被引量：2
- 2006年
- 为检测S632A对细胞的毒性作用,比较了CPE法及MTT法检测其效果,结果可见,2种方法均可证明S632A对细胞的毒性较低,MTT法比CPE法敏感性高。
- 何健民石立莹李晓眠李电东刘琼岩
- 关键词：MTT法
