秦爱建
- 作品数：420 被引量：1,691H指数：20
- 供职机构：教育部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江苏高校优势学科建设工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 不同日龄鸡接种ALV-J后的抗原和血清抗体变化
- 前言禽白血病是鸡的重要肿瘤性疾病之一,阻碍了世界养禽业的发展。国外一些大型种鸡公司通过检测淘汰的净化方法逐步控制了禽白血病的发生与流行。J亚群禽白血病病毒(ALV-J)自20世纪80年代末发现以来,世界各主要养禽国家均出...
- 杭柏林秦爱建尹丽萍孙薇薇梁有志钱琨金文杰邵红霞
- 文献传递
- 鸡源性高迁移率族蛋白B1多克隆抗体的制备及应用被引量：1
- 2014年
- 目的制备针对鸡的高迁移率族蛋白B1(chHMGB1)特异性抗原亲和层析多克隆抗体,并进行初步应用。方法反转录PCR扩增chHMGB1的全长编码基因,通过序列比对分析筛选一段特异性的多肽序列,偶联载体后作为抗原免疫新西兰兔,采集血清,通过蛋白A柱及多肽偶联的Seprose4B柱得到亲和层析纯化的多克隆抗体;并利用Western blot法、间接免疫荧光染色、免疫组化方法进行鉴定。结果成功制备了抗chHMGB1特异性的多克隆抗体。各项实验结果表明该抗体能特异性的识别重组蛋白以及天然的chHMGB1蛋白。结论成功制备了鸡源性高迁移率族蛋白B1亲和层析多克隆抗体。
- 张娜钱琨朱明月高爱俊邵红霞金文杰秦爱建
- 关键词：多克隆抗体
- 抗鸡源EphA2蛋白小鼠多克隆抗体的制备及其特性研究被引量：1
- 2020年
- 为深入探究鸡源EphA2生物学功能,试验首先对鸡源EphA2基因进行了原核分段克隆以及真核表达载体构建。重组原核表达载体分别命名为pGEX-6p-1-EphA2-A(1-534aa)和pGEX-6p-1-EphA2-B(585-972aa),真核表达载体命名为pcDNA3.1-EphA2。重组原核表达载体转化BL21后经IPTG诱导以及SDS-PAGE分析发现,融合蛋白GST-EphA2-A和GST-EphA2-B均获得有效表达。以纯化的GST-EphA2-A和GST-EphA2-B蛋白免疫小鼠制备了抗鸡EphA2多克隆抗体。间接免疫荧光试验以及Western blot试验表明,所制备的抗鸡EphA2多克隆抗体不仅能识别转染pcDNA3.1-EphA2的DF-1及LMH细胞中表达的外源性EphA2,而且还能有效识别内源性鸡源EphA2蛋白。本研究中鸡EphA2的成功表达及其多克隆抗体研制为后续研究鸡EphA2的功能提供了分子生物学工具。
- 姚晓慧李拓凡谢泉万志敏邵红霞邵红霞叶建强
- 关键词：真核表达多克隆抗体
- 马立克病病毒的38kd磷蛋白基因重组产物对雏鸡的免疫抑制作用被引量：12
- 1997年
- 在ＳＰＦ来源的一日龄雏鸡，不论是注射能表达马立克病病毒（ＭＤＶ）的３８ｋｄ磷蛋白（ｐｐ３８）基因的重组杆状病毒感染的昆虫Ｓｆ９细胞裂解物还是注射经亲和层析提纯的重组ＭＤＶｐｐ３８，都能抑制雏鸡的体液免疫反应，表现为相应雏鸡对注射小鼠红血球５～７ｄ后的血球凝集抗体的平均滴度比对照鸡低１．３８～１．６８个Ｌｏｇ２（ｐ＜０．０２５）和２．５５～３．２５个Ｌｏｇ２（ｐ＜０．００５）。
- 崔治中秦爱建
- 关键词：马立克病毒雏鸡免疫抑制
- 禽白血病病毒J亚群内蒙株的分离与鉴定被引量：18
- 2003年
- 本研究从曾见典型禽骨髓性白血病(Myeloid Leukosis,ML)病例的内蒙古某肉种鸡场随机选取的淘汰肉种鸡中,分离出一株J亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus Subgroup J,ALV-J)。利用PCR和间接免疫荧光反应进行鉴定,J亚群禽白血病病毒内蒙株可以被两对ALV-J特异性引物扩增(特异条带约2.2kb和545bp);且在特异性单抗的间接免疫荧光检测中呈现强阳性荧光反应。此外,对山东一例肉种鸡骨髓性白血病病例亦进行了J亚群禽白血病病毒的分离与鉴定。2.2kb PCR扩增物的测序结果表明,两株分离病毒的同源性为96.9％,与己分离的SD9901和YZ9901株ALV-J同源性达94.2％～95.4％。
- 杨玉莹叶建强赵振华秦爱建顾玉芳
- 关键词：禽白血病病毒J亚群
- 组鸡γ-干扰素在昆虫细胞中的高效表达
- 本文将鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)基因克隆到载体pFASTBAC1中,构建转移载体pFASTBAC1-ChIFN-γ,然后转化DH10Bac感受态大肠杆菌,通过位点特异性转座,将ChIFN-γ基因整合到Bacmid穿梭...
- 孔桂美许金俊秦爱建金文杰刘岳龙
- 关键词：杆状病毒抗病毒作用基因克隆
- 文献传递
- 产抗大肠杆菌脂肽化合物枯草芽孢杆菌筛选及脂肽化合物的分离纯化被引量：5
- 2019年
- 采用致病性大肠杆菌作为主要指示菌,运用杯碟法对不同分离株的枯草芽孢杆菌代谢产物进行抑菌效果筛选。在确定GD株作为抗菌物质研究的基础上,采用GD株发酵液,经大孔吸附树脂XD吸附、洗脱,将获取的抗菌产物样品与表面活性素标准品进行薄层色谱(TLC)层析、分析、比较。运用液质联用(LC-MS)分析技术对代谢产物样品中各组分的含量、分子量及结构进行分析。结果显示:GD株在发酵过程中产生的抗菌物质是以表面活性素A、B和C等同系物为主组成的脂肽混合物。表面活性剂含量达77.39%,分子量主要分布在1 036.6933~994.6449之间。
- 庄国宏宋涛宋涛王效禹张琪江国托秦爱建
- 关键词：致病性大肠杆菌枯草芽孢杆菌
- 一株高致病性血清4型禽腺病毒的分离与鉴定被引量：25
- 2016年
- 研究对临床上疑似禽腺病毒感染鸡病例进行了病毒分离与鉴定。通过对病鸡肝组织研磨液接种鸡胚、电镜观察、PCR及序列鉴定,分离出一株血清4型禽腺病毒,命名为JH。动物回归试验证明,肌肉接种1 000 EID_(50)病毒量对3周龄SPF鸡的致死率高达90%;病死鸡剖解可见典型的心包积液与包涵体肝炎,肝组织切片HE染色可见典型的嗜碱性核内包涵体。这一高致病性血清4型禽腺病毒的分离报道,为探究国内禽腺病毒分子流行与毒力演变提供基础材料。
- 梁广成高巍谢泉张建军邵红霞秦爱建叶建强
- 禽腺病毒江苏株(JS)复制非必需片段的确定被引量：4
- 2004年
- 利用PCR方法从一株Ⅰ群禽腺病毒的分离物 (FAVI JS)中扩增出其基因组的两个末端L片段和r片段、ITR片段 ,并分别克隆进pGEM Teasy载体 ,然后将L片段、r片段和ITR片段同时克隆进pHC粘粒载体中 ,获得质粒pHC FAVI r ITR L ,再在该克隆片段中插入增强型绿色荧光蛋白 (eGFP)基因 ,获得转移质粒载体pFAVI eGFP。将pFAVI eGFP转染已被该野生型Ⅰ群禽腺病毒分离物感染了的鸡胚肾细胞进行同源重组 ,通过无限稀释法筛选重组病毒 ,结果获得了表达增强型绿色荧光蛋白的重组Ⅰ群禽腺病毒rFAVI eGFP ,证明位于基因组右末端r片段和ITR片段之间的位点为病毒复制非必需区 。
- 何秀苗秦爱建刘岳龙金文杰
- J亚群禽白血病病毒的免疫荧光检测效果被引量：39
- 2001年
- 应用特异性抗J亚群禽白血病病毒 (ALV_J)的单克隆抗体JE9建立了免疫荧光检测ALV_J抗原和抗体的方法。结果表明 ,在ALV_JADOL_Hcl感染鸡胚成纤维细胞 (CEF) 2 4小时后 ,可以用 1FA检测出阳性细胞 ,感染 72小时后 ,可以检测出最小病毒感染量为≥ 1.2 5TCID50 /孔。对人工感染ALV_J鸡肾脏冰冻切片检测结果证明 ,免疫荧光法可以检测出组织中的ALV_J抗原 ,表现强阳性反应。用重组病毒rBac4817_env感染的Sf9细胞作抗原 ,可以检测出鸡血清中抗ALV_J的特异性抗体。该方法在ALV_J的控制中必将产生重要作用。
- 秦爱建刘岳龙周绮雯黄维嘉
- 关键词：禽白血病病毒J亚群单克隆抗体免疫荧光试验
