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程奇: 作品数：28 被引量：182H指数：7; 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>; 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金河北省科技计划项目更多>>; 相关领域：生物学农业科学医药卫生动力工程及工程热物理更多>>

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含铁蛋白cyb5融合基因莱茵衣藻核转化表达载体的构建及转化被引量：1: 2013年; 旨在构建并转化细胞色素cytb5基因的衣藻核转化表达载体,为其在衣藻叶绿体中对铁的利用情况研究奠定基础。将克隆的PsaD信号肽、细胞色素b5和增强型绿色荧光蛋白基因的基因融合,插入到pDBle载体中;采用玻璃珠法,将重组子导入莱茵衣藻(CW15)中;经博来霉素筛选获得转基因植株并鉴定。本项研究通过分子克隆技术获得了衣藻自身来源的PsaD信号肽、裂殖酵母来源的细胞色素b5和常用增强型绿色荧光蛋白基因片段;重组质粒pDBle-b5、pDBle-bG和pDBle-TbG测序完全正确;经博来霉素抗性筛选,获得转化衣藻单克隆;通过PCR检测转化衣藻基因组DNA,扩增片段与预期相符。实验结果表明,成功构建了pDBle-b5、pDBle-bG和pDBle-TbG衣藻核转化表达载体,重组质粒已整合到莱茵衣藻基因组中。; 李明泽程奇; 关键词：细胞色素B5 信号肽

植物细胞工程的回顾与展望被引量：10: 1993年; 植物细胞工程是以细胞培养和细胞操作为基础,按照人们的愿望,有计划地控制、改造和利用植物的技术体系以及发展这些技术,主要包括组织及细胞培养、花药花粉培养、原生质体培养、细胞融合与基因转化等方面的内容。目前植物细胞工程领域中,组织及细胞培养技术在快繁、脱毒、远缘杂交胚挽救等方面已广为应用。生产次生物质的植物细胞大量培养,有的已发展成产业。以花药培养为基础的单倍体育种不断发展,并取得了显著的成绩,重要农作物原生质体培养取得了较大的突破。细胞融合与基因转化取得了可喜的进展。; 王海波程奇; 关键词：植物细胞工程细胞培养花药基因

用重组酶介导扩增技术快速扩增核酸被引量：96: 2010年; 体外核酸快速扩增技术是一种可使微量核酸在体外高效快速扩增的技术,自问世以来,被广泛应用于分子生物学、医学和法理鉴定等领域,并被不断改进,以使其功能和适应性更为广泛.重组酶介导扩增法是在现有体外核酸扩增原理的基础上发展起来的恒温体外快速扩增核酸技术.RAA法利用重组酶、单链结合蛋白和DNA聚合酶代替了传统PCR的热循环解链过程,实现了在37℃恒温下的核酸快速扩增,无需特殊的辅助仪器,对操作人员的要求也不高,具备简单、节能、便携、快速等特点,有望在不远的将来取代传统的热循环PCR反应.; 吕蓓程海荣严庆丰黄震巨沈桂芳张志芳李轶女邓子新林敏程奇; 关键词：重组酶细菌

含铁蛋白FAO1融合基因的衣藻核转化表达和分析被引量：3: 2013年; 【目的】fao1编码Candida cloacae中一种含铁辅基的长链脂肪醇氧化酶。通过构建该基因的衣藻核转化表达载体进行转化,根据表达蛋白的生物活性判断fao1能否充分利用衣藻叶绿体中的铁元素行使功能;同时也为需铁固氮酶基因的研究提供方向。【方法】通过PCR把PsaD信号肽、fao1、His-tag标签融合,连接到pDBle载体上;采用玻璃珠转化法,将重组子导入莱茵衣藻(CW15)中;经博来霉素筛选后,获得转基因植株。运用PCR和RT-PCR法检测了转化衣藻,并且用亲和层析柱纯化蛋白,同时进行FAO1活性检测。【结果】重组质粒测序完全正确;PCR和RT-PCR检测转化衣藻基因组DNA和RNA,扩增片段与预期相符;转化衣藻FAO1蛋白纯化洗脱液使ABTS(2,2′-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐)底物反应变色。【结论】成功构建了信号肽、FAO1和His-tag融合基因的衣藻核转化表达载体,重组质粒已整合到莱茵衣藻基因组中,并成功转录,纯化的蛋白检测有活性。; 李明泽程奇; 关键词：信号肽

一种具有持续合成能力和盐耐受度的DNA聚合酶: 本发明涉及一种具有持续合成能力和盐耐受度的DNA聚合酶，是在金黄色葡萄球菌DNA聚合酶I(Sau)中插入有来源于T7噬菌体DNA聚合酶中的硫氧还蛋白结合结构域(TBD)而得到的杂合DNA聚合酶，其氨基酸序列如SEQ ID...; 程奇翟冰周国辉李贤祯刘国宪; 文献传递

固氮斯氏假单胞菌A1501 rpoN基因的表达方法: 本发明公开了一种固氮斯氏假单胞菌A1501 rpoN基因的表达方法，该表达方法包括：构建rpoN基因的表达盒；将所构建的rpoN基因的表达盒插入到衣藻叶绿体表达载体上的衣藻叶绿体...; 刘国宪李轶女张志芳沈桂芳程奇; 文献传递

含抗除草剂基因玉米叶绿体转基因表达载体及其应用: 本发明提供了含抗除草剂基因玉米叶绿体转基因表达载体及其应用。所述转基因表达载体包括：5-烯醇式丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSP)基因的表达盒，玉米叶绿体基因组中的同源重组片段atpB以及rbcL；其中，EPSP合酶基因...; 李轶女张志芳王金辉王国增程奇倪丕冲沈桂芳; 文献传递

EPSP合酶基因水稻叶绿体表达载体及其应用: 本发明公开了EPSP合酶基因水稻叶绿体表达载体及其应用。所述水稻叶绿体表达载体包括：EPSP合酶基因的表达盒，水稻叶绿体基因组中的同源重组片段atpB以及rbcL；其中，EPSP合酶基因的表达盒位于同源重组片段atpB和...; 李轶女张志芳王金辉王国增程奇倪丕冲沈桂芳; 文献传递

利用叶绿体制备猪圆环病毒Ⅱ型抗原的方法及其产品: 本发明公开了一种利用叶绿体制备猪圆环病毒Ⅱ型抗原的方法及其产品，其制备方法包括：（1）构建猪圆环病毒Ⅱ型抗原基因衣藻叶绿体表达载体；（2）将该衣藻叶绿体表达载体转化衣藻，筛选得到转基因衣藻；(3)培养转基因衣藻，收集所表...; 李轶女张志芳王金辉程奇王国增沈桂芳倪丕冲; 文献传递

能源微藻生产生物柴油的意义及其开发价值: 随着全球对能源的需求日益增长,世界各国对原油的争夺也日趋激烈。在战略上,能够拥有更多能源的国家,必将决定着其在未来发展中的国际地位。因此,越来越多的国家认识到可再生性能源的重要性。生物能源作为一种重要的可再生性能源,已经...; 程奇吕蓓沈桂芳; 关键词：光合作用生物柴油脂肪酸生物固氮; 文献传递