程枫
- 作品数：48 被引量：286H指数：8
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- 发文基金：国家自然科学基金卫生部科学研究基金上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠浅Ⅱ度烧伤渗液细胞原位杂交生长因子mRNA表达被引量：5
- 1997年
- 作者采用大鼠浅Ⅱ度烧伤模型，以DIG标记3’末端寡核苷酸探针对烧伤后皮肤渗出液中的单核－巨噬细胞作mRNA表达的原位杂交，观察3种生长因子在烧伤愈合过程中mRNA表达的变化，反映其在愈合过程中的作用。结果：PDGFmRNA在第3d有一个表达高峰；TGF－αmRNA从6h始表达量逐渐增加，高峰出现在第10d；TGF－βmRNA在第7d出现表达高峰。结论：DIG原位杂交法对检测单个细胞内生长因子mRNA表达是一个比较好的方法，可以定量、灵敏无损伤地观察细胞生长因子基因的激活与表达，认识生长因子在烧伤愈合中的作用。
- 程枫赵涵芳章有章冯世杰密磊史济湘
- 关键词：烧伤愈合原位杂交基因表达
- HG-1/IL-2基因修饰瘤苗治疗晚期胃癌的初步临床研究(附8例报告)被引量：7
- 2002年
- 目的 :评估同种异型 (HLA A2 +)IL 2基因工程化人胃癌细胞瘤苗 (HG 1/IL 2 )治疗晚期胃癌的毒副作用及临床安全性。方法 :应用基因工程技术 ,以逆转录病毒载体介导将人IL 2cDNA转导入人胃癌细胞株MKN 45 ,经10 0Gy60Co照射灭活后 ,制备成基因工程化胃癌细胞瘤苗 (HG 1/IL 2 )。 2 0 0 1年 4月～ 2 0 0 1年 7月 ,对 8例晚期胃癌病人施行HG 1/IL 2瘤苗治疗。以 5次接种为一疗程 ,接种时间分别在第 1、8、15、2 9和第 5 8天 ,每次于一侧腹股沟和对侧腋部皮下多点注射 1× 10 7个细胞。每次接种后严格观察毒副反应 ,并在治疗开始前一周和治疗结束后进行临床评估 ,同时进行凝血功能、血液生化学、肿瘤标记物及相关免疫指标检测。结果 :除 1例在第 3次接种后 ,因高热和全身性荨麻疹而终止试验外 ,余均顺利完成治疗。接种后低热和注射局部红肿、酸胀感是最常见的反应。治疗前后未观察到病人血液学、凝血功能、肝肾功能、血清标志物等指标的明显异常。部分病人治疗后血清转铁蛋白、IgG、IgA、IgM、IL 2等体液免疫指标和CD3 、CD4 、CD8等细胞免疫指标有一定程度升高。结论 :在密切观察的前提下 ,HG 1/IL
- 张俊朱正纲程枫尹浩然王秀玲叶正宝燕敏刘炳亚钱关祥陈诗书林言箴
- 关键词：IL-2基因修饰瘤苗胃癌免疫疗法
- 大鼠深Ⅱ度烫伤后四种生长因子mRNA的表达被引量：2
- 1997年
- 大鼠用循环热水深Ⅱ度烫伤后，以β－肌动蛋白作内标准，用异硫氰酸胍抽提渗液细胞中RNA，经逆转录PCR扩增后电泳染色扫描求积定量，再用地高辛素标记各特异寡核苷酸探针，经细胞涂片原位杂交后镜检，同样观察烫伤愈合1、2、3、5、7、10d中TGF－α、TGF－β、PDGF和bFGF4种mRNA表达的动态变化，结果4种生长因子均有不同程度的表达增强，但峰分别出现在第1～3d、7d、3d和10d，且仅bFGF表达仍有继续增强趋势。通过4种生长因子mRNA表达的动态研究，可探索多因子协同促进烫伤愈合的调控机制。
- 章有章赵涵芳程枫刘军冯世杰史济湘
- 关键词：烫伤愈合MRNA表达
- 基因修饰人肝癌和胃癌“瘤苗”及实验性肿瘤联合基因治疗被引量：1
- 2004年
- 恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年,但疗效尚未确定.治疗策略也不下十余种,但何种策略为佳尚无定论.目前采用的策略多数为单一基因治疗,而肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素,发病过程也是多步骤的.本研究建立一种细胞因子基因工程人肝癌和胃癌细胞"瘤苗",用于经手术切除的肝癌或胃癌患者,消灭微小残存癌细胞,并预防复发转移;或用于无手术指征的患者或手术后复发患者的辅助性治疗措施.探索多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究.首先克隆一系列的治疗基因,构建不同载体及调控元件;然后进行不同基因的联合治疗作用,并与放射治疗相结合;最后还筛选新的肿瘤治疗候选基因,旨在为临床提供更有效的肿瘤基因治疗策略和方案.
- 陈诗书钱关祥夏爱娣张腾飞钱书兵魏道严徐荣婷胡亮王克敏程枫于丽莉杨红英许伟榕唐展云朱敏
- 关键词：瘤苗人肝癌实验性肿瘤联合基因基因修饰
- 维甲酸对人胃癌细胞诱导分化的研究被引量：26
- 1994年
- 人胃癌细胞株ＳＧＣ７９０１经１０μｍｏｌ／Ｌ维甲酸（ＲＡ）处理后，将细胞接种裸鼠，观察其移植瘤生成率和瘤体重量比对照胃癌细胞显著降低和减小ｐ＜０．０１。透射电镜发现，胃癌细胞经ＲＡ作用后，其细胞形态发生改变，由椭圆形、核大、核周边缘凹陷切迹，转变为长圆形或近似梭形、核小、核周边缘光滑无切迹。流式细胞仪检测结果，ＲＡ处理的胃癌细胞，其细胞周期发生改变，停留在Ｇ１／０期细胞百分比率比对照胃癌细胞显著上升Ｐ＜０．０５及Ｐ＜０．０１，而增殖期Ｓ和Ｇ２＋Ｍ期细胞百分比率比对照细胞显著下降Ｐ＜０．０５及Ｐ＜０．０１。结果表明：ＲＡ可从细胞生物学、细胞周期动力学及细胞形态学水平逆转入胃癌细胞表型，使该细胞株有一定程度的诱导分化。
- 孙月霞何震平程枫陈诗书
- 关键词：维甲酸胃肿瘤肿瘤细胞
- 芪麝颈康丸对椎间盘细胞肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6mRNA表达的影响
- 2001年
- 目的:探讨芪麝颈康丸抑制颈椎间盘退变的分子机制。方法:将48只大鼠分成4组,切除其中36只(A、B、C 3组)颈后部浅、中层肌,造成颈椎间盘退变模型,D 组为正常假手术组。分别给予芪麝颈康丸(A)及对照药颈复康(B)等药物治疗,C、D 组不给药。4个月后将动物处死,采用原位杂交方法观察分析肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)mRNA 在大鼠颈椎间盘组织中的表达规律及芪麝颈康丸对两者表达的影响,同时观察各组椎问盘退变程度的变化。结果:模型空白(C)组椎间盘退变明显,与 A、D 组比较。差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。TNF-α mRNA 阳性信号各组均在椎间盘终板有较高表达,4组程度相似。除 C 组椎间盘髓核软骨样细胞中有明显表达外,其余各组髓核中未见 TNF-α mRNA 阳性信号表达。IL-6mRNA 阳性信号零散地见于各组椎间盘终板,且数量均很少。结论:TNF-α与颈椎间盘退变关系密切,而 IL-6在椎间盘退变过程中所起作用不大。芪麝颈康丸抑制髓核细胞 TNF-α mRNA 的表达可能是其疗效机制。
- 施杞谢林沈培芝徐宇王拥军程枫
- 关键词：颈椎间盘退变肿瘤坏死因子-Α白细胞介素-6芪麝颈康丸原位杂交
- PRK后兔角膜上皮表达TGF-α mRNA增加
- 1999年
- 目的：为研究角膜上皮下混浊（ｈａｚｅ） 形成的发生机理，检测激光角膜光学切除术（ｐｈｏｔｏｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ ｋｅｒａｔｅｃｔｏｍｙ ，ＰＲＫ） 后角膜上皮和基质表达转移生长因子－ α（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ－ α，ＴＧＦ－α） 的变化。方法：新西兰白兔１６ 只，随机分成４ 组，其中１２ 只施行ＰＲＫ。于术后１ 、２ 、３ 个月用裂隙灯显微镜观察ｈａｚｅ 形成情况，并用原位核酸分子杂交方法，检测角膜上皮和基质ＴＧＦ－ αｍ ＲＮＡ 的表达。结果：ＰＲＫ 后１ 个月已有ｈａｚｅ 形成，２ 个月ｈａｚｅ 最明显，术后３ 个月ｈａｚｅ 减轻或消失。正常角膜上皮有ＴＧＦ－ αｍ ＲＮＡ 表达，基质中未见其表达。ＰＲＫ 后角膜上皮表达ＴＧＦ－ αｍ ＲＮＡ 增加，且以术后１ 、２ 个月表达最明显。ＴＧＦ－ αｍ ＲＮＡ 表达强弱与形成ｈａｚｅ 的轻重相关。结论：ＴＧＦ－ α参与ＰＲＫ 后伤口愈合过程，且调节着ｈａｚｅ
- 钟一声程枫周颖明廉井财王康孙
- 关键词：激光手术角膜基质转化生长因子Α
- 人胃癌组织和对应正常胃粘膜cDNA文库的构建
- 1993年
- 作者从一例人高转移型原发性胃癌组织及其对应的正常胃粘膜中分别提取总RNA和分离多聚(A)^+RNA,进而合成cDNA。cDNA第一条链合成效率前者为58.8%,后者为29.8%;第二条链合成效率前者为98.3%,后者为93.3%。cDNA分子大小在0.5～8Kb之间。cDNA接上含有NotI切点和EcoRI粘性末端的接头,重组到经EcoRI酶解5端脱磷酸化的pT7T318U质粒上,转化大肠杆菌NM522,构建了二个cDNA文库,文库的容量分别为1.2×10~5与1.0×10~5重组子,重组率均为80%,克隆效率分别为2.4×10~6克隆/lμg cDNA与2.0×10~6克降/lμg cDNA,插入片段的大小在0.5Kb～4Kb之间。
- 赵涵芳章有章程枫陈诗书
- 关键词：CDNA文库胃肿瘤胃粘膜
- 细胞生长因子和维拉帕米在肝细胞胶原合成和前胶原基因表达中的作用被引量：1
- 1999年
- 目的：探索肝细胞在肝纤维化形成中的可能作用。方法：用核酸原位分子杂交方法和３Ｈ脯氨酸掺入法，观察原代培养大鼠肝细胞在血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）刺激前后胶原合成和Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达及钙拮抗剂维拉帕米对此作用的影响。结果：肝细胞培养一定时间后能够合成胶原，能够表达Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因。ＰＤＧＦ能促进肝细胞的胶原合成和前胶原基因表达。但此刺激作用为维拉帕米所抑制。结论：这些研究为肝细胞参与肝纤维化形成提供了实验依据。
- 胡颖陆汉明李定国程枫
- 关键词：细胞生长因子胶原合成胶原基因表达
- 大鼠肝细胞Ⅰ,Ⅲ型前胶原基因表达及PDGF的影响被引量：10
- 1998年
- 目的观察大鼠肝细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达及ＰＤＧＦ对其表达的影响．方法应用原位杂交技术检测分离培养的ＳＤ大鼠肝细胞（ｎ＝３０）内Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达．同时观察１０μｇ／Ｌ（ｎ＝３０）和３０μｇ／Ｌ（ｎ＝３０）ＰＤＧＦ促进前胶原基因表达的作用．测定基因表达颗粒总面积占细胞总面积的百分比，并作比较分析．结果无论正常肝细胞或是在两种浓度的ＰＤＧＦ存在时，肝细胞内均可见到Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达．正常肝细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因表达面积的百分比（％）为７７±１９和７５±２１；加１０μｇ／ＬＰＤＧＦ后为１１５±１９和１１２±１０，而加３０μｇ／Ｌ后为１５２±３４及１８１±２８，且在后者中表达明显增强（Ｐ＜００５及Ｐ＜００１）．结论ＰＤＧＦ在转录水平上促进肝细胞胶原的合成．
- 姚迪李定国程枫何天源徐芹芳
- 关键词：肝硬化胶原基因表达PDGF
