罗振革
- 作品数：20 被引量：22H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- bcr-abl基因免疫诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞杀伤功能
- 2001年
- 目的 研究 bcr- abl融合基因免疫在慢性髓系白血病(chronic myelogenous leukem ia CML )中的作用以及探讨CML 基因免疫治疗的可行性 .方法 设计两条引物扩增 bcr-abl融合位点两侧约 490 bp大小的 c DNA,经测序鉴定正确后 ,将其克隆至真核表达载体 pc DNA3.1,通过电穿孔法转染至 p815细胞 ,应用 G418筛选建立稳定的靶细胞 ,同时将重组真核表达载体肌肉免疫 BAL B/ c小鼠以获取特异的效应细胞 ,乳酸脱氢酶 (L DH)法检测特异性杀伤率 .结果 1PCR扩增出可用于基因免疫的位于 bcr- abl融合基因位点两侧的490 bp大小的 c DNA,序列测定除第 45 2位碱基 C突变为 T外其余序列均正确 ;2构建了重组真核高效表达载体 ,命名为pc DNA/ bcr- abl;3G418梯度筛选建立了稳定表达该融合基因的细胞系 ,逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)检测到该细胞系有 bcr- abl m RNA水平的表达 ;4bcr- abl基因免疫后的小鼠能有效诱导出特异性细胞毒 T细胞 (cytotoxic T lymph-cyte,CTL) .结论 位于融合位点两侧的 bcr- abl基因肌肉免疫小鼠能够诱导特异性 CTL ,杀伤 bcr-
- 刘楠孙秉中冯琦高杰英罗振革彭虹刘永全
- 关键词：ABL细胞毒性BCR-ABL
- 肝病患者血清中游离CD44和CD95的检测及其意义
- 2000年
- 罗振革彭虹张燕军孔祥英高杰英
- 关键词：肝疾病CD44CD95
- FAS配体(FASL)在COS-7细胞中的表达被引量：1
- 1999年
- 目的：获得ＦＡＳＬ的真核细胞表达，并分析其功能。方法：将编码人ＦＡＳＬ（ＦＡＳｌｉｇａｎｄ） 的全长ｃＤＮＡ 插入真核细胞瞬时表达载体ＰＳＶＬ的ＳＶ４０ 晚期启动子下游的ＸｂａＩ位点，构建ＦＡＳＬ 的真核细胞表达载体ＰＳＶＬｈＦＡＳＬ，用电击法将ＰＳＶＬｈＦＡＳＬ转染ＣＯＳ７ 细胞，转染后４８ ｈ ，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ 法检测ＦＡＳＬ的表达。结果：转染后ＣＯＳ７ 细胞有ＦＡＳＬ的ｍＲＮＡ 的表达，在ＣＯＳ７ 细胞上表达的重组ＦＡＳＬ能诱导ＦＡＳ阳性的Ｕ９３７ 细胞发生程序性死亡。结论：在ＣＯＳ７ 细胞表面表达的重组ＦＡＳＬ分子能用于进一步功能研究和ＦＡＳ系统拮抗剂的筛选。
- 罗振革彭虹孔祥英高杰英
- 关键词：FASL真核表达程序性细胞死亡COS-7细胞
- 用PT－PCR法从U937细胞系克隆CD44H的cDNA
- 1995年
- 用ＰＴ－ＰＣＲ法从Ｕ９３７细胞系克隆ＣＤ４４Ｈ的ｃＤＮＡ罗振革，高杰英，孔祥英，苏新，朱锡华（军事医学科学院微生物流行病研究所，北京１００８５０）（第三军医大学免疫教研室，重庆６３００３８）ＣＤ４４是分布于多种细胞表面的糖蛋白分子，属粘附分子的成员，...
- 罗振革高杰英孔祥英苏新朱锡华
- 关键词：肿瘤肿瘤细胞CD44HCDNA
- CD44H胞外区cDNA片段的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 1995年
- 以ｐＵＣ／ＣＤ４４为模板，用ＰＣＲ法扩增出Ｈ型ＣＤ４４的ｃＤＮＡ片段。用ＥｃｏＲＩ／ＢｃｌＩＩ双酶切保留编码ＣＤ４４Ｈ的信号肽及胞外区ＤＮＡ片段，插入融合蛋白表达载体ＰＥｘ３１ｂ的ＥｃｏＲＩ／ＳａｌＩ位点，形成重组质粒ＰＥＸ－ＣＤ４４，将ＰＥＸ－ＣＤ４４导入大肠杆茵ＲＲ１（ＰＣＩ８５７），经４２℃温控诱导，有额外蛋白的产生，分子量与预期大小一致，表达产物形成包涵体，表达产量占菌体总蛋白的２１％左右。提取包涵体，经初步纯化纯度达８５％左右。ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ证实重组蛋白能被抗ＣＤ４４的单克隆抗体特异识别。
- 罗振革高杰英刘学博孔祥英朱锡华
- 关键词：CD44免疫检测大肠杆菌
- FAS系统在病毒性肝细胞损伤中的作用
- 1999年
- 细胞凋亡是急慢性肝炎的细胞死亡类型之一，ＦＡＳ系统在其中起重要的作用，肝浸润淋巴细胞通过表达ＦａｓＬ引起肝细胞凋亡，是病毒性肝细胞损伤的主要机制之一，本文对这方面的进展作一综述。
- 罗振革
- 关键词：FAS系统病毒性肝细胞损伤CTL
- 小鼠MAdCAM-1分子剪切体的克隆及表达被引量：2
- 2000年
- 目的 获得小鼠粘膜血管定居因子 (MAdCAM 1)分子剪切体cDNA ,并在原核细胞中进行有效表达。方法 从BALB/c小鼠的肠系膜淋巴结中提取总RNA ,利用RT PCR方法获得小鼠MAdCAM 1分子剪切体cDNA ,构建原核表达载体并进行表达 ,纯化融合蛋白制备多抗。结果 核酸序列分析表明获得了正确的小鼠MAdCAM 1分子剪切体cDNA ;小鼠MAdCAM 1剪切体以融合蛋白的形式得到表达 ,主要以包涵体形式存在 ;免疫印迹分析表明 ,小鼠MAdCAM 1剪切体蛋白可被小鼠MAd CAM 1分子的标准单抗及自制多抗识别。结论 小鼠MAdCAM 1剪切体cDNA、表达蛋白及多抗的获得 ,为进一步研究该分子的生物学活性做好准备。
- 张慧英高杰英罗振革刘永全彭虹陈志华孔祥英
- 关键词：蛋白表达
- 宋内氏痢疾菌侵袭相关基因的克隆与表达
- 1993年
- 用粘粒PJB8为载体,构建了宋内氏痢疾茵I相大质粒基因库,用菌落原位杂交,Western blot方法从文库中筛选到1株表达IpaA,B,C,D 4种蛋白的重组子,经重组质粒酶切和Southern blot等方法对宋内氏菌和福氏2a痢疾菌的侵袭相关基因片段作了初步比较分析。
- 罗振革高杰英孔祥英苏新
- 关键词：基因克隆基因表达
- 慢性髓系白血病bcr-abl融合基因的克隆及其在COS-7细胞中的表达
- 2000年
- 目的克隆慢性髓系白血病(CML)融合基因bcr abl的cDNA序列 ,并在真核细胞中表达。方法以设计的两条引物扩增bcr abl融合位点两侧的cDNA ,测序后克隆至真核表达载体 pcDNA3.1 ,转染COS 7细胞。取常规培养的细胞进行RT PCR鉴定。结果①PCR扩增出490bp大小的cDNA ,其序列测定除第452位的碱基C突变为T外 ,其余序列均正确。②RT PCR法检测到转染细胞系中 ,有bcr ablmRNA的表达。结论成功地克隆了CML融合基因bcr abl融合位点两侧的490bp 序列并表达 ,为研制bcr abl基因疫苗治疗CML奠定了基础。
- 刘楠孙秉中冯琦高杰英刘永全罗振革
- 关键词：慢性髓系白血病BCR-ABL融合基因克隆
- 人整合素分子α4亚基片段的克隆及大肠杆菌的表达
- 2000年
- 目的克隆并原核表达 α4亚基片段。方法从 IL- 6 0细胞系中提取总 RNA,以 RT- PCR方法分两段扩增人整合素分子 α4亚基片段 2 .0 kb c DNA,将两片段连接 ,并将其中的 1.7kb基因片段亚克隆至表达载体 PGEX- KG中 ,IPTG诱导表达。结果 RT- PCR扩增并克隆了α4的两段 c DNA,序列分析表明 :与文献报道的α4c DNA序列基本一致。两片段成功连接后 ,将其中的 1.7kb亚克隆至表达载体 PGEX- KG中 ,经诱导在大肠杆菌中得到高效表达。结论获得了α4亚基 2 .0 kbc DNA片段 ,及其中 1.
- 刘永全高杰英彭虹罗振革梅俊杰
- 关键词：整合素RT-PCRCDNA克隆
