翁传煌
- 作品数：51 被引量：53H指数：4
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RCS大鼠发育过程中ON型视网膜双极细胞变构特性的初步研究
- 张辰星阴正勤翁传煌
- 负载紫红质通道蛋白2重组腺病毒的包装及功能鉴定
- 2012年
- 背景紫红质通道蛋白2（ChR2）是从单细胞绿藻莱茵衣藻上分离的一种光敏感通道蛋白，可作为光刺激神经细胞的手段，与电、磁和超声波相比，光在时间和空间上对神经细胞的刺激将更精确。目的构建负载ChR2基因的重组腺病毒，并鉴定其功能。方法将人胚肾293（HEK293）细胞在含质量分数10％胎牛血清的DFl2培养基中进行培养及传代。腺病毒穿梭质粒pSB291-hCHR2-GFP与腺病毒包装质粒pBHGloxAEI，3Cre共转染HEK293，包装得到少量负载ChR2基因的重组腺病毒（Ad—ChR2），经HEK293细胞扩增、CsCl梯度离心，Tris—HCl透析后得到纯化Ad—ChR2。获取4只出生1d的清洁级LongEvans大鼠视皮层组织，用组织块培养法利用无血清培养基原代培养视皮层细胞，用纯化的Ad—ChR2转染培养的视皮层细胞，当转染成功的视皮层细胞表达绿色荧光时给予460hill蓝光刺激，应用膜片钳技术记录视皮层细胞的动作电位。结果纯化浓缩后的Ad—ChR2滴度可达7．9×10^10PFU／ml，HEK293细胞转染Ad—ChR224h后倒置荧光显微镜下即可见细胞膜上有绿色荧光表达，转染13d可见细胞由扁平变为圆形。无血清培养的视皮层细胞转染纯化的Ad—ChR2后细胞膜上可见绿色荧光蛋白（GFP）的表达，460nm蓝光刺激后用膜片钳技术可记录到蓝光诱发的视皮质细胞的动作电位。结论本研究成功构建了负载ChR2基因的重组腺病毒表达载体，并证实ChR2能够感染有功能的视皮质细胞，这对视觉可塑性方面的研究非常重要。
- 姚军平侯文生王浩翁传煌阴正勤
- 关键词：腺病毒膜片钳
- 人胚胎视网膜全层移植到光诱导视网膜变性猪视网膜下腔的实验研究
- ＜正＞目的:探讨人胚胎视网膜全层移植到光诱导视网膜变性猪视网膜下腔的方法、安全性和效果。方法:选12-20周健康流产胎儿为供体,用准分子激光微切削脉络膜制备视网膜全层移植片,通过玻璃体切割直视下将移植片植入光变性猪视网膜...
- 李世迎阴正勤陈少军曾玉晓翁传煌刘勇
- 关键词：微型猪视网膜移植多焦视网膜电图
- 文献传递
- 正常大鼠发育过程中视网膜电图a波的特点被引量：1
- 2012年
- 目的观察正常大鼠发育过程中暗适应视网膜电图（ERG）a波的变化特点。方法实验研究。采用RETI-scan系统，环形角膜电极和不锈钢针状电极，对8组不同日龄大鼠（21、25、32、35、37、46、60及90d）记录不同刺激光强度下（0．03、0．95、3和9．5cd·S·m^-2）的暗适应ERG。导出数据，先采用Matlab7．4对数据进行预处理，然后根据数学模型使用Excel提供的规划求解模型拟合a波并分析模型中的2个参数：饱和波幅（Rmp3）与敏感度（S）。结果不同刺激光强度下Rmp3的最小值均出现在25日龄大鼠，光强为0．03cd·S·m^-2时其最大值出现在60日龄大鼠，余则出现在46日龄大鼠。8组大鼠的S均与刺激光强度呈线性关系（S=ks·Ⅰ＋bs），除60日龄大鼠外，曲线的斜率ks基本保持不变，约为0．09，日龄主要影响常量bs。结论正常大鼠ERGa波的饱和波幅及敏感度均不同程度地受日龄的影响。
- 戴加满陈莹迪李世迎阴正勤翁传煌
- 关键词：A波视网膜电描记术年龄组光刺激
- MK—801对视觉发育可塑性关键期内大鼠闪光视觉诱发电位的影响
- 目的：在视觉发育可塑性关键期内,探讨 MK—801对大鼠 F—VEP 的影响。方法：对出生后14和28天龄正常和 MK —801处理的大鼠进行闪光视觉诱发电位检查。结果：正常组大鼠生后28天和14天相比较,F—VEP 主...
- 秦伟翁传煌
- 文献传递
- 大鼠骨髓间充质干细胞体外分化为视网膜神经节样细胞的实验研究被引量：11
- 2007年
- 目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外向视网膜神经节细胞(RGCs)方向分化的可能性。方法取成年大鼠BMSCs原代培养,传代后获得高纯度BMSCs。采用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导法,相差显微镜和荧光黄(LY)细胞内染色观察诱导后细胞形态的变化,并采用免疫细胞化学法检测微丝微管相关蛋白-2(MAP-2)、Thy1.1和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果诱导后BMSCs呈现神经元样外观。LY染色可见细胞的多级突起,部分邻近细胞出现LY染色阳性。诱导后的神经元样细胞MAP-2和Thy1.1表达阳性,GFAP表达阴性。结论大鼠BMSCs经bFGF体外诱导可分化为具有RGCs表型的神经元样细胞,诱导后细胞间存在突触联系。
- 刘东宁阴正勤吴楠王艳华翁传煌
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化视网膜神经节细胞碱性成纤维细胞生长因子
- ChR2重组腺病毒转染视皮层培养细胞的实验研究
- 姚军平王浩翁传煌
- 小型猪多焦视网膜电图的记录方法及特点被引量：2
- 2007年
- 目的 研究小型猪多焦视网膜电图（multifocal electroretinogram,mfERG）的记录方法及特点.方法 应用罗兰电生理系统中的RETI scan软件对5只小型猪正常眼行mfERG检查,记录波形成分并进行统计学处理.结果 对P1波各项指标进行统计学分析见第1～6环反应密度逐渐下降,波幅值逐渐升高;N1波幅值和潜伏期差异无统计学意义（P＞0.05）;P1波上半野反应密度和波幅值较下半野高,峰潜时值较短;N1波上半野波幅值较下半野高,峰潜时值较长.结论 应用mfERG对实验动物进行检查,可以客观评估动物视网膜后极部功能变化.
- 翁传煌李世迎曾玉晓陈中山阴正勤
- 关键词：多焦视网膜电图小型猪
- 双眼形觉剥夺对成年大鼠视皮层兴奋性突触后电流的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨双眼形觉剥夺(FD)对成年大鼠视皮层神经元兴奋性突触传递特性的影响。方法采用视皮层脑片膜片钳全细胞记录和电流分离技术,分别记录9周龄正常大鼠和7周龄大鼠双眼FD后14d的视皮层神经元膜学特性、突触后电流(PSCs)与NMDA兴奋性突触后电流(EPSCs)。结果双眼FD不改变成年大鼠视皮层神经元的膜学特性和PSCs电学指标。双眼FD对成年大鼠视皮层神经元EPSCs、NMDA-EPSCs的峰值以及NMDA-EPSCs在总EPSCs中所占比例,NMDA-EPSCs的复极化时间无明显影响。结论双眼FD不影响成年大鼠视皮层神经元兴奋性神经传递功能。
- 余涛阴正勤翁传煌
- 关键词：视皮层形觉剥夺NMDA受体突触后电流全细胞记录
- 大鼠睁眼后视皮层内突触后电流的成分分析
- 目的：探索睁眼后大鼠视皮层内突触后电流的成分组成。方法：对生后3周至8周正常 Long evens 大鼠视皮层脑片运用膜片钳全细胞记录技术,通过突触前给予电刺激,诱导出突触后电流,然后(1)将神经元膜电位钳制在-70mv...
- 王昌鹏阴正勤翁传煌曾玉晓
- 文献传递
