薛久刚
- 作品数：9 被引量：42H指数：4
- 供职机构：山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学更多>>
- 一种简单高效的食用真菌总RNA提取方法被引量：6
- 2003年
- 以金针菇为材料,建立了一种适合于富含RNase、多酚、多糖和糖蛋白的食用真菌RNA的提取方法,此方法在高浓度变性剂存在的条件下2次用苯酚 氯仿 异戊醇进行抽提去除DNA、蛋白质,并用异丙醇和乙酸钠选择性沉淀RNA、去除多糖,得到完整、均一的RNA样品。
- 周凯松薛久刚常宁陈畅张晗星张长铠
- 关键词：食用菌RNA提取金针菇
- 火菇素的分离纯化及其分子量的测定
- 2003年
- 火菇素是一种从金针菇FlammulinaVelutipes中分离纯化出来的具有抗癌活性的简单蛋白。用SDS-PAGE系统,通过与已知分子量的标准参照蛋白比较,确定火菇素的分子量为24kDa,这一结果与其氨基酸组成分析相比偏大,进一步通过电喷雾离子化质谱法(ESIMS)分析,精确测定火菇素的分子量为19891.13Da。推测由于火菇素蛋白与SDS的非正常结合是造成蛋白质在SDS-PAGE中迁移变慢导致偏差的原因。
- 周凯松薛久刚张晗星陈畅张长铠
- 关键词：火菇素纯化SDS-PAGE分子量
- 金针蘑表达型CDNA文库的免疫学筛选及火菇素基因的克隆、序列分析
- 以火菇素蛋白的多克隆抗体为探针对构建的金针菇cDNA表达型文库进行免疫学筛选.将获得的阳性噬菌体克隆与辅助噬菌体ExAssist interference-resistant helper phage共同孵育,在辅助噬菌...
- 薛久刚
- 关键词：火菇素金针菇CDNA文库免疫筛选
- 文献传递
- 火菇素蛋白的红外和拉曼光谱研究被引量：2
- 2004年
- 目的 研究抗癌活性蛋白火菇素的二级结构。方法 Fourier变换红外光谱和显微共焦拉曼光谱法。结果火菇素蛋白的二级结构中含有较多的β折叠和α螺旋而无规则卷曲含量较少 ,“埋藏”和“暴露”的酪氨酸残基为34%和 6 6 % ,C- C- S- S- C- C-侧链为反式 -扭曲 -反式构型。
- 薛久刚陈畅李彦蒋瑛张晗星张长铠
- 关键词：火菇素红外光谱拉曼光谱
- 火菇素cDNA的初步免疫学筛选被引量：1
- 2004年
- 火菇素是一种具有抗癌活性的简单蛋白 ,从金针菇中分离纯化火菇素的方法如下 :金针菇子实体经乙酸液浸提、硫酸铵和乙醇分级沉淀后 ,通过DEAE SephadexA 5 0除去色素和部分杂蛋白 ,最后经CM SephadexC 5 0离子交换柱层析分离 ,得到了电泳均一的纯化蛋白 .以火菇素为抗原制备的抗血清为探针对构建的金针菇cDNA表达文库进行免疫印记筛选 ,对获得的阳性克隆进行PCR、酶切以及在大肠杆菌中诱导表达等初步鉴定 ,为进一步确证、克隆火菇素基因打下了基础 .
- 周凯松薛久刚黄芳张晗星张长铠
- 关键词：火菇素金针菇CDNA免疫筛选
- 金针菇中具抑瘤活性的碱性蛋白火菇素的分离纯化和性质研究(英文)被引量：9
- 2003年
- 目的 对一种具有抑瘤活性的碱性蛋白火菇素进行分离纯化和性质研究。方法 应用硫酸铵、乙醇分级沉淀 ,柱色谱等方法进行分离纯化。电泳分析、氨基酸组成分析、质谱分析等方法被用于火菇素的理化性质研究。结果 火菇素被提纯至电泳纯并结晶。经性质研究确定火菇素的分子量为 19891.13Da ,pI=8.9,λmax=2 76～ 2 78nm ,λmin=2 5 0nm ,并缺少甲硫氨酸。通过基质辅助激光解吸离子化质谱 (MALDI—MS)分析 ,测得了火菇素的指纹图谱 ,表明它为一种新蛋白。结论 火菇素被首次提纯至电泳纯 。
- 陈畅薛久刚周凯松李彦张晗星张长铠
- 关键词：金针菇抑瘤活性纯化
- 生物信息学在基因和药物发现中的应用被引量：5
- 2002年
- 在基因组研究蓬勃发展的今天 ,生物信息学已不可避免地渗入到药物的研究和开发中 ,在药物靶点的发现和确立中起着重要作用。本文综述了生物信息学在药物和基因发现中的作用 ,包括通过对基因组序列、基因多态性、基因表达、序列标签等的确定和选择 。
- 孙迎节吕鹏薛久刚张长铠
- 关键词：生物信息学基因药物药物靶点药物开发基因组序列基因多态性基因表达
- 火菇素蛋白的免疫印迹检测被引量：3
- 2004年
- 从金针菇子实体浸提液中提取了抗癌活性物质火菇素 ,将纯化的火菇素用Freund佐剂乳化后注射到新西兰白兔体内 ,经数次加强免疫后采血并分离了抗血清 ,并以抗血清为探针建立了火菇素蛋白的免疫印迹法定性检测方法。应用免疫学方法检测金针菇菌丝体和子实体 ,结果显示 ,只在金针菇子实体中发现与火菇素抗体相结合的抗原信号。
- 周凯松吕鹏薛久刚张晗星陈畅张长铠
- 关键词：火菇素金针菇免疫检测
- 毛细管区带电泳检测九州虫草核苷类成分被引量：18
- 2003年
- 凌建亚张长铠孙迎节吕鹏薛久刚王延兵
- 关键词：中药分析核苷类成分
