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PCR筛选文库后联用RACE快速获得全长cDNA序列: 为了简便快速、准确高效地获得cDNA全长序列,本研究先用PCR法筛选cDNA文库后,再用5'-cDNA末端快速扩增(5'-Rapid Amplification of cDNA Ends,5'-RACE,)法扩增cDNA...; 秦胜芳谭卫东陈又南丁杨李胜富陆燕蓉; 关键词：CDNA文库全长CDNA序列 RACE法; 文献传递

恒河猴肝脏cDNA文库表达序列标签测序及序列分析: 2010年; 恒河猴是重要的实验动物模型,其遗传学研究对于科学分析、应用动物实验结果有重要意义。我们从恒河猴肝脏cDNA文库随机挑选401个克隆单向测序,获得393条有效序列,拼接和聚类后得到221个非冗余EST序列。Swiss-prot数据库比对发现有188个Unigenes序列与已知蛋白质匹配,并与人有高度同源性,其中16个为已知恒河猴蛋白质。BLASTN比对显示,另外的33个Unigenes序列中,有26个Unigenes序列与已知恒河猴基因匹配。dbEST数据库比对表明有3个Unigenes序列为新发现的恒河猴EST序列。; 柯晓雪王建东丁杨谭卫东陆燕蓉程惊秋陈又南; 关键词：恒河猴 CDNA文库肝脏表达序列标签

恒河猴凝血因子VII的体外表达初探: 2008年; [目的]探索恒河猴凝血因子VII的体外原核蛋白表达方法。[方法]利用已得到的恒河猴凝血因子VII cDNA序列,构建了带有6His表达标签的大肠杆菌原核表达重组质粒pET-DsbA-MCFVII,再转入大肠杆菌中进行诱导表达,并使用SDS-PAGE蛋白质电泳和Western Blot法检测蛋白表达情况。[结果]目的蛋白主要以包涵体形式表达,但是在菌液上清和菌体裂解液中也能检测到可溶形式的目的蛋白。[结论]恒河猴凝血因子VII在大肠杆菌中能够以可溶形式表达。; 王建东丁杨谭卫东陈又南陆燕蓉卢晓风李宏霞王莉程惊秋; 关键词：恒河猴原核表达

版纳微型猪近交系外周血淋巴细胞cDNA文库的构建: 2008年; [目的]构建版纳微型猪近交系(BMI)外周血淋巴细胞中cDNA文库。[方法]取新鲜BMI外周血,分离淋巴细胞,并进行体外诱导培养,提取总RNA,纯化mRNA。按照SMART cDNA library construction kit提供的方法构建BMI外周血淋巴细胞cDNA初始文库,进行滴度测定及文库扩增。[结果]初始文库和扩增文库的滴度分别为1.1×106pfu/ml和2.5×109pfu/ml,重组率分别为98.2%和89.1%,插入片段平均长度大于1200bp。[结论]成功地构建了BMI外周血淋巴细胞cDNA文库。; 谭卫东陈又南陆燕蓉李胜富曾养志李幼平程惊秋; 关键词：CDNA文库外周血淋巴细胞

恒河猴(Macaca mulatta)肝脏cDNA文库的构建被引量：1: 2007年; 目的构建正常恒河猴的肝脏组织cDNA表达文库,以筛选恒河猴的相关基因并提供其作为医学研究动物模型的遗传学依据。方法提取正常恒河猴肝脏组织总RNA,纯化的mRNA反转录合成cDNA,连接EcoR接头,经Xho酶切并用CHROMA SPIN-400分离cDNA,将大于500bp的cDNA片段连接于λZAP表达载体,体外包装后转染至XL1-BlueMRF’宿主菌中,再扩增文库。对cDNA文库的滴度、重组率和插入片段的大小进行检测。结果初始文库的库容量为1.2×106pfu,初始文库和扩增文库的滴度分别为1.1×106pfu/mL、7.7×109pfu/mL,重组率分别为99.3%、98.2%,插入片段平均长度分别为2.0kb、2.3kb。结论成功构建了恒河猴肝脏组织的cDNA表达文库,为同种和异种移植以及移植相关药物临床前研究奠定了良好的基础。; 秦胜芳谭卫东陈又南丁杨李胜富李宏霞王莉杨戎陆燕蓉; 关键词：恒河猴肝组织 CDNA文库

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谭卫东