贺望兴
- 作品数:3 被引量:5H指数:2
- 供职机构:福建师范大学更多>>
- 发文基金:福建省自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划福建省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 培养条件对重组青霉素G酰化酶表达及后翻译的影响
- 2014年
- 青霉素G酰化酶(PGA)具有良好的催化酰化/去酰化特性,广泛应用于半合成及β-内酰胺抗生素工业中。由于嗜柠檬酸克鲁沃尔氏菌(Kc)产生的PGA具有良好的适于工业应用的特性,因此,对Kc来源的PGA在重组菌BL21(DE3)中的表达进行产酶条件优化。通过调整培养基装量、培养温度、起始pH值及诱导剂的浓度,结合对细胞生长量、蛋白表达量及酶活高低的检测,以期得到产生活性PGA的最优条件。发现起始pH值为7.0,装量30 mL,30℃培养,1.0 mmol/L IPTG诱导6 h时,菌浓为16.83,总酶活达到27 905 U/L,单位酶活1 658 U/L/OD600的最佳结果。通过分析培养条件对PGA蛋白表达量(SDS聚丙烯凝胶电泳)和酶活的影响,发现PGA前体表达后的后翻译过程是产生活性酶的关键因素,该结果将为后期研究和工业应用提供重要参考依据。
- 蒋咏梅贺望兴章文贤
- 关键词:青霉素G酰化酶酶活聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 灵芝全局性调控基因LaeA的克隆及其在灵芝酸生物合成过程中的差异表达
- 灵芝是我国名贵中药,现代医学研究发现灵芝中的灵芝酸具有抗肿瘤和抗艾滋病毒等重要生物学功能。目前对灵芝酸的部分生物合成途径已有一定了解,发现灵芝酸的积累与灵芝孢子的形成息息相关。在丝状真菌中,全局性调控因子LaeA不仅能够...
- 贺望兴
- 关键词:灵芝灵芝酸LAEA荧光定量PCR
- 文献传递
- 灵芝14-3-3蛋白基因的电子克隆与表达分析被引量:2
- 2013年
- 通过电子克隆技术,获得14-3-3基因的cDNA序列全长,并采用生物信息学方法,借助电子计算机和相关的生物信息学软件,对该基因编码蛋白从基本理化性质、疏水性/亲水性、亚细胞定位、跨膜区结构、信号肽、高级结构及系统发育树分析等进行了预测和分析。该cDNA编码蛋白由257个氨基酸组成,相对分子质量为29.014 5 kDa,亲水性和疏水性比较平衡,定位于细胞质,不存在信号肽,无跨膜螺旋区,且二级结构由6.23%无规则卷曲,66.54%α-螺旋和27.24%延伸链组成。同源比对分析显示,该酶基因编码的氨基酸序列与污叉丝孔菌、双孢菇和木耳等蘑菇类高等真菌中的14-3-3基因所编码的氨基酸序列高度同源。实时荧光定量PCR结果表明,灵芝14-3-3基因在液体静置培养过程中的表达量显著高于振荡培养。
- 章文贤蒋咏梅贺望兴郭文燕黄晓菊郑素云
- 关键词:灵芝电子克隆生物信息学