贾维胜 作品数:54 被引量:125 H指数:6 供职机构: 第三军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 一般工业技术 更多>>
应用CD4^+CD25^+Treg细胞诱导大鼠肾移植免疫耐受的研究 被引量:4 2007年 目的应用供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞诱导移植免疫耐受,抑制大鼠肾移植慢性排斥反应。方法以SD、Wister大鼠分别为供、受体建立同种异体肾移植慢性排斥反应动物模型;受体脾细胞悬液同供体肾组织抗原孵育培养,诱导获得对供体抗原的特异性;采用MACS法分选具有供体抗原特异性的CD4+ CD25+T细胞,FACS流式细胞法检测分选的CD4+CD25+T细胞及CD4+CD25+Treg细胞纯度;获得之供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞于同种异体肾移植术后2、4、6、8、10周,分别经尾静脉注射入受者体内(实验组,n=12),选取未注射组为对照(n=12)。观察两组移植肾脏存活时间;术后第10、40、80天MTT法检测比较两组受体脾细胞对供体抗原刺激反应程度;术后第10、20、40、60、80天分别监测各组血肌酐水平。结果FACS流式细胞法检测分选的CD4+CD25+T细胞得率为4.13%,分离纯度为73.34%;CD4+CD25+Treg细胞纯度为65.22%。所分选之CD4+CD25+Treg细胞成功获得供体抗原特异性,对供体抗原的抑制率(IR)为85.4%。移植肾存活时间:治疗组移植肾存活时间为(98.83±6.66)d,显著长于对照组的(78.25±4.71)d,组间差异有统计学意义(P<0.05);术后第40、80天治疗组脾细胞对供体抗原刺激反应程度均明显低于对照组,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。术后第20、40、60、80天对照组血肌酐指标明显高于治疗组,同治疗组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞可特异性抑制受体对供体抗原的免疫反应,有效抑制了移植肾慢性排斥反应的发生。 李健 黄赤兵 郑峻松 张艮甫 王琦 冯嘉瑜 肖亚 贾维胜 方针强关键词:免疫耐受 肾移植 肾移植受者巨细胞病毒感染与慢性移植物肾病 被引量:2 2004年 目的 探讨肾移植术后早期巨细胞病毒 (CMV)感染与慢性移植物肾病 (CAN)的关系。 方法 1999年 8月至 2 0 0 0年 12月行肾移植并随访 3年的患者 77例 ,根据术后 6个月内外周血CMV pp6 5 ( + )白细胞计数的数量和持续时间 ,将其分为 :非活动性 (A组 ,n =15 )、低活动性 (B组 ,n=32 )、短期高活动性 (C组 ,n =18)和长期高活动性 (D组 ,n =12 )CMV感染 4组。 6个月后行移植肾穿剌活检 ,通过免疫荧光和逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)比较 4组患者肾组织中转移生长因子β1(TGF β1)蛋白和mRNA的表达量 ;3年后比较 4组患者肾功能不全 (血肌酐持续 >114 μmol/L)的发生率和肌酐清除率 (Ccr)减损量 ;对肾功能不全的患者通过活检明确是否为CAN。 结果 肾移植 6个月后A、B、C组TGF β1蛋白表达量分别为 :( 5 .82± 1.32 )× 10 6、( 6 .34± 1.4 7)× 10 6和 ( 6 .5 8± 1.4 4 )× 10 6,TGF β1mRNA分别为 :0 .84± 0 .17、0 .78± 0 .15和 0 .82± 0 .16 ;D组TGF β1蛋白和mRNA表达量分别为 ( 10 .4 7± 2 .12 )× 10 6和 1.37± 0 .2 5 ,均明显高于前 3组 (P <0 .0 1)。前 3组 3年内Ccr减损量分别为 :( 5 .6± 5 .2 )、( 6 .2± 6 .4 )和 ( 5 .9± 4 .7)ml/min ;D组为 ( 15 .8± 9.6 )ml/min ,明显高于前 王平贤 方针强 黄赤兵 范明齐 冯嘉瑜 肖亚 贾维胜 张艮甫 金锡御关键词:肾移植 慢性移植物 肾病 受者 MRNA表达量 肾移植早期巨细胞病毒感染对移植肾远期预后的影响 2004年 目的 :探讨肾移植受者术后早期巨细胞病毒 (CMV)感染与远期肾功能的关系。 方法 :自 1999年8月~ 2 0 0 1年 6月 ,根据肾移植术后 6个月内CMV pp6 5抗原血症指数 (I)和持续时间 ,将 96例随访达 3年的肾移植受者分为CMV非感染组 (I =0 )、低感染组 (I =1~ 30 )、短期高感染组 (I >10 0 ,≤ 2周 )和长期高感染组 (I >10 0 ,≥ 8周 ) ,比较四组在肾移植 6个月时肾功能、移植肾活检组织中转化生长因子 β1(TGF β1)蛋白和mRNA表达 ;随访 3年期内肌酐清除率 (Ccr)减损量、肾功不全发生率 ,并对出现肾功不全者在血肌酐 (SCr)升高 1个月内进行移植肾穿剌活检 ,以明确病因。 结果 :在肾移植 6个月时 ,四组肾功能无明显差异 (P >0 0 5 ) ,但“长期高感染组”肾组织中TGF β1蛋白和mRNA表达量明显大于其他 3组 ;在肾移植 3年时 ,“长期高感染组”Ccr下降了(16 2± 7 2 )ml/min ,4 3 5 % (10 / 2 3)患者出现肾功能不全 ,二者均明显大于其他 3组 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。肾功不全者 ,移植肾活检均证实为慢性移植肾肾病。 结论 :肾移植术后早期长时间严重的CMV感染是影响移植肾远期肾功能、导致慢性移植肾肾病的重要原因。 王平贤 冯嘉瑜 肖亚 方针强 贾维胜 黄赤兵 范明齐 张艮甫关键词:肾移植 巨细胞病毒感染 预后 肾功能不全 转化生长因子 气膀胱腹腔镜下前列腺剜除术 目的介绍应用气膀胱腹腔镜(pneumovesicoscopy)下行前列腺剜除术的体会。方法 2005年1月~2010年1月治疗30例前列腺增生患者,年龄61岁~82岁。手术方法:经膀胱镜注CO气体扩张膀胱,膀胱镜观察下在... 王祥卫 叶钢 易善红 张远宁 方针强 贾维胜 周涛文献传递 小鼠颈部异位心脏移植手术方法的改进 被引量:1 2007年 贾维胜 张银甫 黄赤兵 肖亚 贺伟峰关键词:心脏移植 手术方法 小鼠 氯沙坦预防肾移植后慢性移植物肾病的临床研究 2006年 目的探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂氯沙坦(losartan)对同种异体肾移植患者移植肾远期功能的保护作用。方法2000年1月至2001年10月期间,对肾移植术后时间达1年、移植肾功能正常、尿TGF-β1(transform ing growth factorβ1,TGF-β1)相对浓度≥250.0 pg/mg的36例患者(A组)连续使用氯沙坦(50 mg/d)1年以上,与同期内、相同条件、未服用氯沙坦的31例患者(B组)作对比,观察两组肾功能的动态变化;3年后比较两组患者血和尿TGF-β1相对浓度、肌酐清除率(creatin ine c learance rate,Ccr)减少量和肾功不全的病例数有无差异;比较A组服用氯沙坦前后,移植肾组织中TGF-β1mRNA表达量有无变化;观察服用氯沙坦的不良反应。结果B组Ccr进行性降低;在3年随访期内,A组Ccr减少量为(5.1±4.6)m l/m in,有3例(8.3%)患者肾功能不全,均明显低于B组(P<0.01,P<0.05),后者分别为(13.2±9.7)m l/m in和11(35.5%)例;3年后A、B两组尿TGF-β1浓度分别为(327.0±45.6)、(511.9±50.8)pg/mg,A组明显低于B组(P<0.01);两组血TGF-β1浓度无明显差异(P>0.05);A组服用氯沙坦1年后,TGF-β1mRNA表达量由(1.52±0.33)降为(0.96±0.25);使用氯沙坦无不良反应发生;A、B两组中肾功不全者,穿刺活检证实均为慢性移植物肾病。结论氯沙坦对同种异体肾移植患者移植肾具有保护作用,其作用机制可能与降低移植肾内TGF-β1的分泌有关。 王平贤 张艮甫 黄赤兵 范明齐 冯嘉瑜 方针强 肖亚 贾维胜关键词:肾移植 肾病 转移生长因子 氯沙坦 肾移植术后泌尿系恶性肿瘤患者T淋巴细胞亚群的测定及意义 2012年 目的:观察肾移植术后并发泌尿系统恶性肿瘤患者血液T淋巴细胞亚群的变化,及其对调整免疫抑制剂及预防恶性肿瘤的意义。方法:9例肾移植术后并发泌尿系统恶性肿瘤患者为肿瘤组,9例未发生任何肿瘤或感染的肾移植患者为移植组,9例健康体检者为对照组。流式细胞术测定T淋巴细胞亚群(CD3'T、CD3'CD8'T、CD3'CD4'T、CD4'/CD8')比例,肿瘤组行肿瘤切除并减少免疫抑制剂用量,测定术前及术后2个月血药CsA和FK506浓度。结果:肿瘤组与另两组比较,CD3'T及CD3'CD8'T无明显变化,CD3'CD4'T明显减少,CD4'/CD8'比值明显降低(P<0.05)。肿瘤组肿瘤切除术后2个月与术前比较,CD3'T和CD3'CD4'T无明显变化;CD3‘CD8'T明显降低,而CD4'/CD8'比值明显升高(P<0.05),CsA和FK506血药浓度均明显降低(P<0.05)。结论:血T淋巴细胞亚群可作为肾移植免疫状态的有效评价指标,对指导肾移植免疫抑制剂的调整和预防肿瘤的发生具有重要的临床意义。 方针强 王祥卫 易善红 贾维胜 陈伟 何凡 沈崇星 叶钢关键词:肾移植 恶性肿瘤 T淋巴细胞亚群 免疫抑制 Foxp3基因转染小鼠CD4^+ CD25^- T细胞对同种T细胞增殖反应的影响 被引量:3 2006年 目的观察Foxp3基因转染的小鼠CD4+CD25-T细胞对同种T细胞增殖反应的影响。方法以免疫磁珠法分离小鼠脾细胞中的CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞,用流式细胞术检测细胞纯度,以电穿孔法将质粒PMFOXP3-IRES2-EGFP转染小鼠CD4+CD25-T细胞,用荧光显微镜观察转染细胞中Foxp3的表达,转染细胞和CD4+CD25+T细胞与同种T细胞做混合淋巴细胞培养,以3H-TdR掺入测定CPM值。结果在质粒PMFOXP3-IRES2-EGFP转染CD4+CD25-T细胞24h后,转染细胞中可检测到高水平的Foxp3;转染细胞和CD4+CD25+T细胞CPM值分别为3 927.0±674.7和3 895.3±504.6(P>0.05)。结论以质粒PMFOXP3-IRES2-EGFP转染的CD4+CD25-T细胞对同种T细胞增殖反应具有显著抑制作用,与CD4+CD25+T细胞的抑制作用等同。 肖亚 张艮甫 黄赤兵 贺伟峰 王平贤 贾维胜关键词:电转染 混合淋巴细胞反应 FOXP3基因 198例肾损伤的诊断与治疗 被引量:20 2006年 目的探讨总结198例肾损伤的诊断及治疗方法。方法本组均行B超、CT、静脉尿路造影(IVU)和数字减影血管造影(DSA)检查,阳性率分别为92.1%,96.4%,70.5%和77.8%;非手术治愈145例;手术治愈52例,其中肾切除29例,肾修补术8例,肾静脉修补术3例,肾部分切除2例,肾动脉栓塞术10例。结果死亡1例(0.5%),197例痊愈出院(99.5%)。结论B超检查具有简单、快速、无损伤、不受病人条件限制等优点,应作为肾损伤的首选检查方法。CT检查准确率高,可判断肾损伤程度。DSA适宜诊断肾蒂伤,及肾动脉栓塞治疗。选择性肾动脉栓塞治疗肾挫伤安全有效,对严重肾损伤和开放性肾损伤应及时手术探查。 方针强 张艮甫 叶钢 冯嘉瑜 肖亚 贾维胜关键词:肾损伤 人BMP-7基因重组腺病毒的构建与鉴定 被引量:9 2008年 目的构建含有人骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)基因的重组腺病毒载体,并对其相关指标进行鉴定,观察其对肾小管上皮细胞株(HKC)细胞的转染情况。方法用基因工程技术将人BMP-7基因cDNA亚克隆至穿梭质粒pDC316上,利用脂质体介导的方法将AdMax腺病毒包装系统的骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre和穿梭质粒pDC316-BMP-7转染入HEK293细胞,进行同源重组,得到腺病毒重组质粒Ad5-BMP-7,并在其中包装扩增病毒。采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中所带绿色荧光蛋白GFP报告基因,进行病毒滴度的测定和对HKC细胞感染效率的检测。结果酶切鉴定及PCR结果证明BMP-7基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达1.25×1010PFU/ml,对HKC有较强感染能力。结论应用细胞内同源重组方法成功构建了含人BMP-7基因的重组腺病毒载体。 方针强 叶钢 欧阳一辛 刘永亮 贾维胜 冯嘉瑜关键词:腺病毒 骨形成蛋白-7 同源重组