赵勇
- 作品数：47 被引量：148H指数：7
- 供职机构：广州军区武汉总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省卫生厅科研基金中国博士后科学基金更多>>
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- VEGF-C在替代性活化的巨噬细胞转分化为淋巴管内皮细胞中的作用
- 2007年
- 目的观察替代性活化的巨噬细胞(aaMphi)在血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的诱导下能否转分化为淋巴管内皮细胞(LEC),初步探讨aaMphi促进淋巴管生成的可能机制。方法以重组小鼠白细胞介素-4(IL-4)处理小鼠巨噬细胞(RAW264.7)24h,建立aaMphi模型。分别以不同浓度的小鼠重组VEGF-C处理aaMphi,通过测定后者在基质胶中形成簇样物和管样结构的情况,最终确定以浓度为100ng/ml的VEGF-C建立aaMphi转分化系统。在此系统中,分别于第0、7、14和28天以实时定量RT-PCR法检测aaMphi LEC特异性标志物[血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)、Prox1]和aaMphi特异性标志物(Fizz1)的情况。连续28天在倒置相差显微镜下观察aaMphi在基质胶中形成管样结构的情况。结果成功地建立了以VEGF-C为诱导剂,以EBM-2为培养基,以基质胶作为支持物的aaMphi转分化系统,其VEGFR-3和Prox1 mRNA的表达逐渐增加,而Fizz1 mRNA的表达逐渐下降,至第14天分别达到最高值和最低值;第28天和第14天的情况无明显差别。从第7天到第28天,可见aaMphi在基质胶中逐渐形成明显的管样结构,且随着时间延长数量逐渐增加。结论VEGF-C通过诱导aaMphi中VEGFR-3和Prox1的表达上调,促使aaMphi转分化为LEC:这是aaMphi促进淋巴管生成的可能机制之一。
- 章必成王俊赵勇郭燕饶智国高建飞
- 关键词：巨噬细胞淋巴管内皮细胞淋巴管生成
- 以鼠尾胶为贴黏剂的小鼠淋巴管内皮细胞培养体系的建立被引量：8
- 2007年
- 目的:建立一个简便、廉价和稳定的小鼠淋巴管内皮细胞(LEC)培养体系.方法:应用不完全弗氏佐剂诱导小鼠腹腔淋巴管瘤形成,消化法分离获得LEC,置于自制的鼠尾胶包被的培养瓶(板)中培养.以免疫荧光化学法检测LEC特异性标记物VEGFR-3和LYVE-1的表达,以3H-TdR掺入率测定和细胞倍增时间检测LEC的增殖活力,以淋巴管形成试验判定LEC能否形成淋巴管样结构.结果:不完全弗氏佐剂能诱导小鼠腹腔淋巴管瘤形成,所获LEC活细胞数大于98%.免疫荧光化学检测表明,LEC表达VEGFR-3和LYVE-1.在鼠尾胶包被的培养瓶(板)中,LEC生长状况良好,3H-TdR掺入率明显增加,倍增时间为(42.7±3.2)h;在鼠尾胶凝胶中,LEC能形成淋巴管样结构.结论:鼠尾胶为贴黏剂的体系是一种简便、廉价和稳定的小鼠LEC培养体系.
- 章必成王俊赵勇高建飞郭燕陈正堂
- 关键词：细胞培养
- 经皮肝胆管穿刺套针
- 本实用新型涉及医疗器械领域中的一种用于经皮肝胆管穿刺引流的经皮肝胆管穿刺套针，其不同之处在于：其包括穿刺针套、内套于穿刺针套内的穿刺针芯，穿刺针套尾部设置有针套接头，穿刺针芯尾部设置有与针套接头相匹配的针芯接头。本实用新...
- 高建飞赵勇
- 文献传递
- 不同活化表型的巨噬细胞对Lewis肺癌细胞增殖和侵袭的影响被引量：6
- 2007年
- 目的探讨不同活化表型的小鼠巨噬细胞对小鼠Lewis肺癌(LLC)细胞增殖和侵袭的影响。方法分别以mr IFN-γ+LPS、mr IL-4处理小鼠RAW264.7巨噬细胞,24h后以RT-PCR鉴定它们表达经典活化的巨噬细胞(caMphi)或替代性活化的巨噬细胞(aaMphi)的标识iNOS或Fizz1的情况。采用Transwell系统共培养活化的巨噬细胞(分为4组:空白对照组、caMphi组、aaMphi组、RAW264.7组)和LLC细胞,绘制LLC细胞生长曲线,并以免疫细胞化学法检测LLC细胞表达血管内皮生长因子-C(VEGF-C)情况,以硝酸还原酶法检测培养液上清中NO含量。分别采用3H-TdR掺入法和Tran-swell侵袭模型观察活化的巨噬细胞对LLC细胞增殖和侵袭的影响。结果成功地建立了小鼠caMphi和aaMphi模型。在4个共培养组中,aaMphi组的LLC细胞生长最快,表达VEGF-C最强,RAW264.7组次之;caMphi组大量分泌NO,其余3组未见NO分泌。通过3H-TdR掺入法和Transwell侵袭模型观察到,aaMphi组的LLC细胞增殖速度最快,侵袭能力最强;RAW264.7组次之;caMphi组的LLC细胞的增殖和侵袭则受到抑制。结论aaMphi能够促进LLC细胞的增殖和侵袭,与其上调后者表达VEGF-C有关;caMphi能够抑制LLC细胞的增殖和侵袭,与其大量分泌NO有关。在与LLC细胞共培养后,RAW264.7细胞的功能朝着aaMphi的方向极化。
- 章必成王俊赵勇高建飞郭燕陈正堂
- 关键词：巨噬细胞LEWIS肺癌增殖
- 腹膜后副神经节瘤2例报告被引量：2
- 2005年
- 章必成高建飞杜光祖李欣赵勇
- 关键词：副神经节瘤腹膜后肿瘤
- 双氢青蒿素对小鼠淋巴管内皮细胞增殖与迁移及管样结构形成的影响被引量：4
- 2008年
- 目的探讨双氢青蒿素(DHA)对小鼠淋巴管内皮细胞(LEC)增殖、迁移和管样结构形成的影响。方法腹腔注射不完全弗氏佐剂诱导小鼠淋巴管瘤形成,分离并培养小鼠LEC。采用MTT法检测DHA对LEC增殖的抑制作用,流式细胞仪检测LEC的凋亡率,Transwell迁移实验观察DHA对LEC迁移的影响;基质胶实验检测DHA对LEC管样结构形成的影响,实时定量RT-PCR和Western-blot检测DHA处理后LEC表达VEGFR-3 mRNA和蛋白的情况。结果5~40μg.mL-1DHA能显著抑制LEC增殖,并诱导不同程度的凋亡,且具有剂量效应关系。Transwell迁移实验和基质胶实验分别显示DHA能抑制LEC迁移和体外自发性管样结构形成。DHA处理之后,LEC表达VEGFR-3 mRNA和蛋白均下调。结论DHA能抑制LEC增殖、迁移和管样结构形成,诱导LEC凋亡和下调VEGFR-3表达,有望成为拮抗淋巴管生成的药物。
- 章必成赵勇王俊郭燕饶智国高建飞
- 关键词：双氢青蒿素淋巴管内皮细胞淋巴管生成VEGFR-3
- 替代性活化的巨噬细胞促进淋巴管内皮细胞增殖的机制
- 2007年
- 目的:观察替代性活化的巨噬细胞(aaMphi)对淋巴管内皮细胞(LEC)增殖的影响机制.方法:以重组小鼠IL-4处理小鼠RAW264.7巨噬细胞24h,建立aaMphi模型.采用Transwell系统共培养aaMphi和小鼠LEC,台盼蓝拒染法绘制LEC生长曲线,3H-TdR掺入法观察LEC增殖状况,实时定量RT-PCR法分别检测共培养前后血管内皮生长因子(VEGF)-C,VEGF-DmRNA在aaMphi中的表达,以及VEGFR-3,Prox1mRNA在LEC中的表达.结果:与aaMphi共培养后,LEC生长速度加快,增殖指数(PI)高于其他对照组.与共培养前比较,aaMphi表达VEGF-C mRNA增加(P<0.01),但表达VEGF-D mRNA无统计学变化(P>0.05);LEC表达VEG-FR-3和Prox1 mRNA均增加(P<0.01,P<0.05).结论:aaMphi能促进LEC增殖;aaMphi表达VEGF-CmRNA和LEC表达VEGFR-3,Prox1 mRNA增加是其作用机制之一.
- 章必成王俊赵勇郭燕饶智国高建飞
- 关键词：巨噬细胞淋巴管内皮细胞细胞增殖淋巴管生成
- 胃癌中Cks1、P27Kip1和Skp2蛋白的表达
- 目的:探讨Cks1在胃癌发生及其在Skp2调节 P27Kipl降解过程中的作用。方法:应用流式细胞术测定正常胃粘膜、胃粘膜异型增生组织及胃癌组织中Cksl、P27Kipl、 Skp2蛋白表达。结果:由正常胃粘膜、胃粘膜异...
- 赵勇高建飞欧武陵朱宇泽章必成杜光祖
- 关键词：SKP2蛋白P27KIPL蛋白泛素
- 文献传递
- 青蒿素对小鼠淋巴管内皮细胞凋亡和淋巴管形成的作用被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨抗疟药青蒿素(ART)对小鼠淋巴管内皮细胞增殖、凋亡和淋巴管形成的作用。方法:腹腔注射不完全弗氏佐剂诱导小鼠淋巴管瘤形成,分离并培养小鼠淋巴管内皮细胞(LEC)。采用MTT法检测ART对LEC的生长抑制作用。倒置相差显微镜和Hoechst 33258荧光染色观察细胞核形态学变化。FITC-Annexin V/PI双染流式细胞仪检测LEC细胞凋亡率。基质胶实验检测LEC体外淋巴管形成。结果:5-40μmol/L的ART显著抑制LEC细胞增殖。细胞经不同浓度的ART处理后,LEC细胞出现明显的凋亡特征。FITC-Annexin V/PI双染显示,与对照组比较,ART提高了LEC细胞凋亡率,具有一定的剂量依赖性效应关系。基质胶实验显示ART抑制LEC体外自发性管状结构形成。结论:青蒿素可作为抗淋巴管生成的抑制剂,其作用与其诱导LEC细胞凋亡有关。
- 郭燕王俊章必成陈正堂赵勇高建飞
- 关键词：青蒿素淋巴管内皮细胞淋巴管生成血管内皮生长因子-C
- 胃癌中Cks1、P27^(Kip1)、Skp2蛋白表达相关性及其意义被引量：3
- 2006年
- 目的:探讨Cks1在胃癌发生及Skp2调节P27Kip1降解过程中的作用。方法:应用流式细胞术检测正常胃黏膜、胃不典型增生组织及胃癌组织中Cks1、P27Kip1、Skp2蛋白的表达。结果:由正常胃黏膜、胃不典型增生组织到胃癌中Cks1、Skp2的表达均呈上升趋势(P<0.05),P27Kip1表达则呈下降趋势(P<0.05)。胃癌中Cks1、Skp2表达均与P27Kip1表达呈负相关(r=-0.649,P<0.05;r=-0.732,P<0.05);而Cks1蛋白表达与Skp2蛋白无相关性(P>0.05)。胃癌中Cks1表达与肿瘤分化程度相关(P<0.05),而与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及临床分期不相关(P>0.05)。结论:Cks1可能参与胃癌的发生;胃癌中Cks1可能参与Skp2调节P27Kip1泛素化的降解过程。
- 赵勇高建飞欧武陵朱宇泽杜光祖
- 关键词：胃肿瘤
