邢志军
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：吉林大学中日联谊医院更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅白求恩医学专项基金国家自然科学基金吉林省科技厅国际合作项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向LIMK1的siRNA真核表达载体(pSUPER-LIMK1)的构建、鉴定及在人成骨肉瘤MG63细胞中的表达被引量：3
- 2009年
- 目的构建靶向人LIMK1的siRNA真核表达载体(pSUPER-LIMK1)并检测其在人成骨肉瘤MG63细胞中进行表达。方法将设计的LIMK1的siRNA的寡聚脱氧核苷酸链与真核表达载体pSUPER连接,构建重组pSUPER-LIMK1真核表达载体,并将其转染入MG63细胞株中。采用RT-PCR检测pSUPER-LIMK1质粒转染后LIMK1在人成骨肉瘤中的基因表达,Westernblot检测LIMK1蛋白的表达。结果构建的真核表达载体pSUPER-LIMK1可在人成骨肉瘤MG63细胞中的表达。结论构建的人LIMK1-siRNA蛋白的真核表达载体pSUPER-LIMK1,为进一步骨肉瘤基因靶向治疗的研究奠定了基础。
- 邢志军王岩高忠礼
- 关键词：LIMK1SIRNA真核表达载体
- 人LIMK1基因荧光真核表达载体的构建及在人成骨肉瘤MG63细胞中的表达被引量：1
- 2009年
- 目的构建并表达人LIMK1与绿色荧光蛋白(EGFP-C1)的融合蛋白EGFP-LIMK1,并监测其在人成骨肉瘤MG63细胞内的表达及活性。方法利用基因重组技术将LIMK1与绿色荧光蛋白融合并构建真核细胞表达质粒,通过脂质体介导法导入人成骨肉瘤MG63细胞内,用荧光显微镜观察LIMK1基因表达情况,通过Western blot检测其在MG63细胞中的活性。结果双酶切鉴定证实LIMK1片段已克隆到pEGFP-C1载体的KpnⅠ和NotⅠ位点之间,测序结果证实了插入片段的正确性,转染MG63细胞后,利用荧光显微镜观察可见到绿色荧光蛋白的表达;Western blot检测证实LIMK1在MG63细胞中活性上调。结论成功构建了含有绿色荧光蛋白基因的LIMK1真核表达载体并检测到其在真核细胞MG63中的表达及活性。
- 邢志军赵建武王岩高忠礼
- 关键词：转染LIMK1MG63
- 靶向人SSH1L的siRNA真核表达载体的构建及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的构建靶向人SSH1L的siRNA真核表达载体(pSUPER-SSH1L)。方法将设计好的SSH1L的siRNA的寡聚脱氧核苷酸链与真核表达载体pSUPER连接,构建重组pSUPER-SSH1L真核表达载体。对该重组表达载体进行酶切鉴定及DNA测序;通过Western blot检测SSH1L蛋白的表达。结果酶切鉴定、DNA测序以及Western blot检测结果证实表达质粒构建成功,无碱基突变。结论成功构建了靶向人SSH1L基因表达的siRNA干扰质粒载体pSUPER-SSH1L,为进一步运用RNA干扰技术进行SSH1L基因功能研究奠定了基础。
- 邢志军赵建武王岩高忠礼
- 关键词：SIRNA真核表达载体
