郑方亮
- 作品数：39 被引量：104H指数：6
- 供职机构：辽宁大学更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高校重点实验室项目国家自然科学基金病毒学国家重点实验室开放研究基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学医药卫生更多>>
- 杆状病毒HearNPV LEF-9蛋白多克隆抗体的制备
- 本发明涉及杆状病毒HearNPV LEF-9蛋白多克隆抗体的制备。通过设计引物克隆 lef-9 基因；原核表达构建重组质粒pET-28a-lef-9；将构建的重组质粒pET-28a-lef-9转化大肠杆菌BL21，构建表...
- 朱春玉郑方亮于亮
- 文献传递
- 蜱传脑炎病毒报告病毒TBEV Nluc 2*2A的构建方法及其应用
- 本发明公开了蜱传脑炎病毒报告病毒TBEV Nluc 2*2A的构建方法及其应用。本发明构建出了含有Nluc2*2A报告基因的报告病毒，使可以通过检测Nluc荧光素酶信号来监测TBEV、研究病毒毒力，并且可作为抗病毒药物筛...
- 郑方亮陈庆艳王博王莹霍雅鹏胡媛媛朱春玉
- H5N1亚型禽流感病毒NS1基因截短体的克隆与原核表达被引量：3
- 2012年
- 禽流感病毒H5N1 NS1蛋白是一种非结构蛋白,在病毒感染过程中发挥着重要的作用。构建基因截短的重组蛋白,可为进一步研究NS1不同结构域与宿主蛋白间的相互作用奠定基础。在成功克隆禽流感病毒H5N1全长NS1基因并测序的基础上,将部分截短基因序列克隆到表达载体pET28a(+)上,构建基因截短的重组表达质粒pET28a-NS1-RBD和pET28a-NS1-ED,转化大肠埃希菌BL21(DE3),阳性重组质粒经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测,获得预期蛋白的表达,然后利用Ni-NTA树脂蛋白纯化系统对重组蛋白进行纯化,并通过Western Blotting进一步确认NS1及截短体蛋白的表达。结果表明,实验成功构建禽流感病毒H5N1亚型的NS1蛋白截短体,并在大肠埃希菌中高效表达,这为进一步研究NS1蛋白不同结构域与宿主蛋白的相互作用提供了实验材料,为深入研究NS1蛋白的生物学功能奠定了坚实基础。
- 郑方亮朱春玉商玲玲马杰良孙婷婷艾海新朱俊峰段艳婷朱应刘宏生
- 关键词：NS1原核表达纯化
- 抗生素产生菌Lnu-13的发酵条件
- 本发明涉及一种抗生素产生菌Lnu-13的发酵条件。本发明针对抗生素产生菌Lnu-13的发酵条件进行了研究，比较在不同的营养条件和培养条件下，菌株Lnu-13抗生素的产生情况。确定最佳发酵培养基配方为：玉米粉3.0％、花生...
- 郑方亮朱春玉潘思明郑甜甜佘晓双刘宏生
- “太岁”生物学组分的研究被引量：18
- 2011年
- ＂太岁＂是一种存在于地球上分类地位尚不清楚的生物体。对实验室保藏的7种不同的＂太岁＂样品进行了生物学组分的定性定量分析,旨在科学地了解＂太岁＂的组成成分,同时为＂太岁＂有效成分的开发利用和分类鉴定提供理论依据。对实验室保藏的7种＂太岁＂样品做生物组分及含量分析,具体包括：苯酚硫酸法测粗多糖含量、凯氏定氮法测粗蛋白含量、索氏提取法测粗脂肪含量、钒钼酸显色法测核酸含量、灼烧重量法测粗灰分含量、恒温干燥法测水分含量、原子吸收法测微量元素含量。实验结果表明,7种＂太岁＂样品含水量均较高,除LNUT006含水量73.58%外,其余＂太岁＂样品均达到90%以上;＂太岁＂样品中粗多糖含量在8.97~46.57 mg/g之间,其中LNUT006多糖含量明显高于其他＂太岁＂样品;粗蛋白含量在20.35~184.18 mg/g之间,其中LNUT006蛋白含量明显高于其他＂太岁＂样品;＂太岁＂样品中净核酸含量在2.053~35.128 6μg/g之间;灰分含量在42.93~246.4 mg/g之间;＂太岁＂样品钙、铁含量较高,分别为2 907.09μg/g和3 929.09μg/g,铅、镉含量最低。首次对未知生物＂太岁＂样品的组成成分进行初步系统的研究,为明确其组分和对其进一步的开发利用均有很重要的意义。
- 朱春玉白婷婷姜秋实郑方亮艾海新朱俊丰刘宏生
- 抗生素产生菌Lnu‑13的发酵条件
- 本发明涉及一种抗生素产生菌Lnu‑13的发酵条件。本发明针对抗生素产生菌Lnu‑13的发酵条件进行了研究，比较在不同的营养条件和培养条件下，菌株Lnu‑13抗生素的产生情况。确定最佳发酵培养基配方为：玉米粉 3.0％、花...
- 郑方亮朱春玉潘思明郑甜甜佘晓双刘宏生
- 文献传递
- 微波结合紫外诱变选育辅酶Q_(10)高产菌株被引量：6
- 2010年
- 以根瘤土壤杆菌LNUB335为出发菌株,以维生素K3和NaN3双抗性为筛选标记,在根瘤土壤杆菌中首次利用紫外线及微波联合诱变处理,获得1株生产性能比LNUB335显著提高的突变株ARN007,其CoQ10产量为12.01mg/L,较出发菌株提高68.67%,每克干细胞含CoQ102.46mg,较出发菌株提高38.20%。通过传代实验证明该突变株的遗传性稳定,可作为进一步研究的实验菌株。
- 朱俊丰郑方亮艾海新朱春玉季士坤丁国伟白婷婷王加友李雪娇朱光宇刘宏生
- 关键词：辅酶Q10诱变育种微波
- 抗生素产生菌及其应用
- 本发明涉及一种抗生素产生菌及其应用。本发明所述的抗生素产生菌系链霉菌属，命名为链霉菌Lnu‑13(Streptomyces sp.lnu‑13)，保藏编号为CCTCC NO：M2014555。本发明所述的Lnu‑13菌株...
- 郑方亮朱春玉潘思明郑甜甜张茂盛刘宏生
- 文献传递
- 纳豆激酶酶原基因的克隆与原核表达方法研究
- 目的构建纳豆激酶酶原基因表达载体,使纳豆激酶酶原基因在大肠杆菌中表达。方法通过PCR技术扩增纳豆激酶酶原基因。构建重组质粒,将其转化到大肠杆菌。纳豆激酶酶原基因在IPTG诱导下在大肠杆菌BL21中表达,并用SDS-PAG...
- 艾海新连昭李秀瑜王宁王家友白婷婷朱俊丰郑方亮朱春王刘宏生
- 关键词：原核表达纤溶活性纳豆激酶
- 文献传递
- 缺失ATP合酶和插入VHb基因对钝齿棒杆菌谷氨酸产量的影响被引量：2
- 2015年
- 为了提高钝齿棒杆菌生产谷氨酸的产量,以谷氨酸生产菌钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)T6-13为出发菌株,利用同源重组技术使其缺失ATP合酶基因(atp)并进一步插入透明颤菌血红蛋白基因(VHb),得到两株重组菌株T6-13-Δatp和T6-13-Δatp-tac-VHb,通过检测重组菌株谷氨酸产量及生长情况可以看出,在发酵32 h后,atp基因缺失菌株较出发菌株谷氨酸产出累积量高27.76%,但atp基因缺失导致菌体生长缓慢且无法到达出发菌株稳定期浓度,而插入VHb基因的atp基因缺失菌株的谷氨酸产出累积量较出发菌株高36.91%,且菌体的生长速率及稳定期浓度与出发菌株基本一致。
- 郑方亮于亮牟晓丛刘鹏刘宏生
- 关键词：钝齿棒杆菌谷氨酸ATP合酶透明颤菌血红蛋白
