郭官鹏
- 作品数：14 被引量：34H指数：4
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划NSFC-河南人才培养联合基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 猪细小病毒河南分离株全基因组克隆及序列分析被引量：4
- 2015年
- [目的]进一步了解河南地区猪细小病毒（PPV）的变异特点。[方法]利用PCR方法,对河南郑州、周口、济源等地采集的疑似PPV感染的病料进行检测。PCR检测为阳性的病料经处理后,同步接种猪睾丸细胞盲传6代,对4株PPV全基因组进行分段克隆及测序,并与Gen Bank登录的国内外PPV流行株全基因组进行比较。[结果]获得的4株PPV全基因组序列全长均为4 679 bp。4个毒株之间的核苷酸同源性介于99.6%-99.8%,与其他毒株间核苷酸同源性为98%-100%,遗传进化较为稳定。[结论]为PPV在河南地区分子流行病学调查及遗传变异分析奠定了基础。
- 陈龙彪高晓云吴宇阳冯亚琼陈红英崔保安马世杰郭官鹏
- 关键词：猪细小病毒全基因组克隆
- A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达纯化及活性检测被引量：2
- 2013年
- 为获得具有活性的A型FMDV VP1蛋白,以A型vp1重组质粒pMD19T-A-vp1为模板,利用PCR扩增得到A型FMDV vp1基因片段,将此基因片段与原核表达载体pET28a连接,构建重组质粒pET-Avp1。经IPTG诱导表达含重组质粒pET-A-vp1的E.coli BL21(DE3)菌后,SDS-PAGE显示VP1蛋白以包涵体形式获得高效表达,蛋白分子质量约为29ku。通过对IPTG浓度及诱导时间进行优化,结果表明,在37℃条件下,IPTG终浓度为0.3mmol/L,诱导表达6h后,VP1蛋白的表达量最大。Western-Blot分析表明,VP1重组蛋白能够被A型口蹄疫阳性血清特异性识别。ELISA检测结果显示,VP1包涵体蛋白经洗涤纯化,尿素浓度梯度透析复性后具有较高的活性。
- 刘畅卢清侠杨继飞王世红王寅彪郭官鹏邓瑞广张改平
- 关键词：A型口蹄疫病毒VP1蛋白蛋白纯化活性鉴定
- 免疫系统的感知和信号传导
- 2013年
- 信号感知和传导是免疫系统对致病因素进行适当反应和维持机体内环境稳态的关键。尽管炎症性免疫应答对于消除暂时性微生物入侵和保护机体不受继发感染来说是很必要的，但是过度的免疫或者对无害物质的主动免疫则是有害的，因为会导致慢性的组织损伤。
- 郭官鹏
- 关键词：免疫系统信号传导微生物入侵体内环境致病因素继发感染
- A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达纯化及活性检测
- 前言口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(FMD virus,FMDV)引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。FMD的传播途径广泛,传染性强,曾在一些地区和国家多次发生...
- 刘畅卢清侠杨继飞王世红王寅彪郭官鹏邓瑞广张改平
- 关键词：A型口蹄疫病毒VP1蛋白蛋白纯化活性鉴定
- 猪圆环病毒2型ORF2基因截断表达及ELISA抗体检测方法的初步建立
- 前言猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)是断奶仔猪多系统衰竭综合征等相关疾病的主要病原。PCV2感染可损伤猪体的免疫系统造成免疫抑制,易造成PPV、PRRS及其他病原的继发感染,给养猪业造...
- 郭官鹏刘畅陈龙彪高小云马世杰陈红英崔保安
- 关键词：猪圆环病毒2型ORF2基因蛋白表达ELISA
- 猪圆环病毒2型河南株全基因组的克隆与遗传进化分析被引量：13
- 2016年
- 为了解近几年河南地区猪圆环病毒2型（PCV2）的遗传进化情况,本研究对采自2011年-2015年河南省13个地区的28份疑似患断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）猪的病料样品进行PCR检测,并将检出的阳性病料样品接种无PCV的PK-15细胞,分离PCV2,进而用IPMA进行鉴定。最后对所获分离株进行全基因组克隆和序列分析。结果显示,28份样品中阳性率为75%（21/28）,并成功分离出21株PCV2,其全基因序列同源性为95.4%-99.9%;在遗传演化关系上,21株PCV2分离株分布于两个基因型（PCV2b和PCV2d）,16株属于PCV2d,而其余5株属于PCV2b基因型,这也说明PCV2d逐渐成为河南地区的优势流行株。此外,通过对其Cap蛋白氨基酸序列的预测与分析,发现其主要抗原区存在12处位点明显变异,这可能影响其抗原性及免疫原性。本研究为河南地区PCV2的防控提供了依据。
- 徐朋丽张宇韩昊莹乔涵杨兴武郭官鹏王晓星刘起涛陈红英
- 关键词：猪圆环病毒2型断奶仔猪多系统衰竭综合征
- 猪圆环病毒2型ORF2基因截断表达及ELISA抗体检测方法的初步建立被引量：3
- 2014年
- 为建立以重组PCV2Cap蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法,构建了猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因原核表达质粒pET28a-ORF2。SDS-PAGE显示,在0.1mmol/L IPTG和37℃条件下诱导4h,重组Cap蛋白高效表达。Western blotting证实该蛋白能够被PCV2阳性血清特异性识别。以纯化的蛋白为抗原建立了检测PCV2抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原最适包被质量浓度为2mg/L;血清最佳稀释度为1∶100;酶标二抗最适浓度为1∶2 000,该方法的敏感性为86.96%,特异性为100%。用该方法对河南省152份猪血清样品进行检测,与间接免疫荧光(IFA)的符合率为85.53%(130/152),与商品化的韩国金诺PCV2ELISA试剂盒的符合率为88.16%(134/152)。本试验成功建立了PCV2血清抗体间接ELISA方法,具有较高的敏感性和特异性,可用于大规模的血清学检测。
- 郭官鹏刘畅陈龙彪马世杰高晓云陈红英崔保安
- 关键词：猪圆环病毒2型CAP蛋白蛋白纯化间接ELISA
- 猪圆环病毒2型高敏感性PK15细胞系L8的制备方法
- 本发明公开了一种猪圆环病毒2型高敏感性PK15细胞系L8的制备方法，它的步骤如下：（1）将PK15细胞复苏后培养于细胞瓶中长成细胞单层，用质量分数为0.25%的胰酶消化，然后加入DMEM生长液吹打，所述DMEM生长液含质...
- 侯贤敏郭敬崔保安郭官鹏陈红英
- 文献传递
- 猪细小病毒河南分离株全基因组克隆及序列分析
- 引言猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是引起母猪繁殖障碍的主要病原体之一,主要表现为胎儿和胚胎的感染和死亡。PPV又常同猪伪狂犬病毒(PRV)、乙型脑炎病毒(JEV)、猪圆环病毒(PCV)、猪瘟(...
- 陈龙彪高晓云冯亚琼陈红英崔保安郭官鹏马世杰吴宇阳
- 关键词：PPV全基因克隆
- 一种猪圆环病毒Ⅱ型毒株
- 本发明公开了一种猪圆环病毒Ⅱ型毒株，猪圆环病毒Ⅱ型(Circoviridae)，CCTCC NO：V201312。本发明对PCV2体外培养增殖条件进行优化并筛选出一株对PCV2敏感性较高的命名为L8的PK15细胞克隆株，...
- 崔保安陈红英卢权威郭官鹏郭敬李新生魏战勇
- 文献传递
