郭永
- 作品数:14 被引量:10H指数:2
- 供职机构:国家人口计生委科学技术研究所更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项北京市自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 表达多肽的方法
- 本发明公开了一种表达多肽的方法。其中,多肽具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列,表达多肽的方法包括:利用重组杆状病毒表达毒种,感染第一昆虫Sf9细胞,以便使得第一昆虫Sf9细胞表达多肽,其中重组杆状病毒表达毒种包含...
- 郭永邹检平李芳芳张瑶楠
- 文献传递
- 米非司酮抑制乳腺癌细胞增殖及促凋亡作用的初步研究
- 崔芳芳郭永李芳芳丁宁邹检平
- 关键词:米非司酮乳腺癌细胞细胞凋亡BRCA1/2
- 米非司酮抑制人子宫内膜基质细胞增殖被引量:5
- 2014年
- 目的在改良子宫内膜细胞原代分离培养方法的基础之上,探讨米非司酮对原代分离培养的人子宫内膜基质细胞增殖的抑制作用。方法利用改良后的"二次消化法"分离培养增殖期人子宫内膜基质和上皮细胞,进行细胞形态学观察,并通过流式细胞术检测人子宫内膜基质和上皮细胞的波形蛋白和角蛋白表达阳性的细胞比率,计算分离培养的基质和上皮细胞的纯度;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测米非司酮对原代分离培养人子宫内膜基质细胞的半数抑制浓度(IC50)。结果原代分离培养的基质细胞较上皮细胞生长迅速。流式细胞检测结果显示,分离培养的基质细胞波形蛋白阳性率达97%,上皮细胞角蛋白阳性率达90%。米非司酮处理人子宫内膜基质细胞2d或3d后,结果均显示,随着米非司酮浓度增加,基质细胞的细胞抑制率(IR)逐渐升高。米非司酮作用基质细胞2d后,50和100μmol/L组的IR值均高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);米非司酮作用3d后,25、50和100μmol/L组的IR值均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。通过对IR值进行直线回归分析,结果表明:米非司酮处理2d和3d对原代人子宫内膜基质细胞的IC50分别为52.85μmol/L和86.46μmol/L。结论改良后的"二次消化法"可获得高纯度人子宫内膜基质细胞和上皮细胞。米非司酮对原代人子宫内膜基质细胞有抑制作用,并呈时间和剂量依赖效应。
- 郭永赵爱华苏晨丁宁张瑶楠刘庆王乾兴
- 关键词:米非司酮人子宫内膜细胞细胞增殖半数抑制浓度
- 脆性X智力低下蛋白(FMRP)ISO 10在大肠杆菌中表达与纯化
- 脆性X综合征(fragile X syndrome,FXS)是X连锁先天性智力低下中最常见的疾病之一,在智力低下患者中所占比例仅次于唐氏综合征.FXS是由于脆性X智力低下基因1(fragile Xmental retar...
- 李芳芳郭永崔芳芳丁宁邹检平
- 关键词:脆性X综合征FMRP蛋白纯化
- 脆性X智力低下蛋白(FMRP)ISO 10在大肠杆菌中表达与纯化
- 脆性X综合征(fragile X syndrome,FXS)是X连锁先天性智力低下中最常见的疾病之一,在智力低下患者中所占比例仅次于唐氏综合征。FXS是由于脆性X智力低下基因1(fragile X mentalretar...
- 李芳芳郭永崔芳芳丁宁邹检平
- 关键词:脆性X综合征蛋白纯化
- 文献传递
- 一种快速制备甲胎蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的方法被引量:1
- 2013年
- 目的建立一种快速制备甲胎蛋白单克隆抗体(AFP-McAb)杂交瘤细胞系的方法。方法以常规和改良两种方式同时免疫8~12周Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合并行次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养。用间接酶链免疫吸附试验法(ELISA)筛选阳性克隆株,并建立细胞系。结果在较短时间内,改良法能获得高效价的免疫抗体,与常规免疫法相比有极显著差异(P<0.01),同时改良法的细胞融合率和抗体阳性率也显著高于常规免疫法(P<0.001)。筛选获得的高效分泌抗人AFP-McAb的阳性杂交瘤细胞珠进行了初步鉴定。结论新的改良疗法优化了常规的McAb制备中动物免疫程序,并能成功筛选出AFP-McAb杂交瘤细胞系。
- 丁宁石心泉郭永张瑶楠邹检平
- 关键词:甲胎蛋白杂交瘤单克隆抗体
- 米非司酮调控乳腺癌细胞增殖的研究被引量:3
- 2014年
- 目的研究米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的增殖抑制作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的半数抑制浓度(IC50)。不同浓度米非司酮(0.25、2.5、25和50μmol/L)分别处理人乳腺癌细胞系MCF-7和T47D1、2、3d后,观察细胞形态变化,以及检测各组细胞生长曲线。结果米非司酮对乳腺癌MCF-7和T47D细胞均有抑制作用,其抑制率均随着米非司酮浓度的增加而变化,存在明显的量效关系。通过对两种细胞抑制率(IR)值直线回归分析,米非司酮对MCF-7细胞的IC50为51.21μmol/L,对T47D细胞的IC50为54.29μmol/L。形态学观察发现,各组细胞体积变小,细胞间的链接消失,细胞内明显有黑色小颗粒聚集。25和50μmol/L浓度米非司酮对MCF-7乳腺癌细胞株生长抑制作用明显,特别是50μmol/L干预24h后在高倍镜下可见明显的核质浓缩。结论米非司酮对病理分型、激素受体型不同的乳腺癌MCF-7和T47D细胞均具有抑制增殖的作用,并呈时间和剂量依赖效应。
- 郭永何森苏晨张瑶楠王乾兴邹检平
- 关键词:米非司酮乳腺癌细胞增殖半数抑制浓度
- 子宫内膜细胞生长和分化中基质-上皮相互作用的研究进展
- 2009年
- 子宫内膜由上皮、基质细胞等成分构成,它们之间的相互作用在子宫内膜周期性变化中的作用机制还不清楚。近年来,随着各种新技术的出现,对于子宫内膜功能的分子机制有了更深入的认识。深入研究基质-上皮相互作用具有重要意义,不仅可以揭示子宫内膜发生、生长、分化的过程,而且可以对子宫内膜异位症和子宫内膜癌等内膜相关疾病的防治提供有效的手段。本文就子宫内膜基质-上皮相互作用在子宫内膜增殖和分化中的研究,参与基质-上皮相互作用的重要因子,以及基质-上皮相互作用在子宫内膜相关疾病中研究的最新进展进行简要综述。
- 郭永王介东
- 关键词:基质上皮细胞相互作用月经周期
- 脆性X智力低下蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化
- 2012年
- 目的:在大肠杆菌中对脆性X智力低下蛋白(FMRP)进行重组表达,获得高产量及高纯度的可溶性重组蛋白。方法:以人脑cDNA文库为模板,PCR扩增FMR1基因后将其克隆至融合表达载体pGEX-6P-1中,重组载体转化进入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,并用IPTG进行诱导表达。应用谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B进行亲和层析纯化GST-FMRP融合蛋白,并以SDS-PAGE电泳和Westernblot对融合蛋白的表达进行检测。结果:亲和纯化后的融合蛋白经FMRP及GST单抗分别进行Westernblot鉴定为GST-FMRP融合蛋白。结论:大肠杆菌中FMRPISO10的重组表达产量高,纯化得到可溶性重组蛋白,为FMRP抗体的制备及FXS检测试剂盒的开发奠定基础。
- 李芳芳郭永崔芳芳丁宁张嵘邹检平
- 关键词:脆性X综合征蛋白纯化
- 表达多肽的方法
- 本发明公开了一种表达多肽的方法。其中,多肽具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列,表达多肽的方法包括:利用重组杆状病毒表达毒种,感染第一昆虫Sf9细胞,以便使得第一昆虫Sf9细胞表达多肽,其中重组杆状病毒表达毒种包含...
- 郭永邹检平李芳芳张瑶楠
- 文献传递