郭海涛
- 作品数：17 被引量：33H指数：5
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 间接ELISA在过敏性哮喘模型干预性实验中检测IgE含量的应用
- 2014年
- 目的:探讨间接ELISA法在检测过敏性哮喘模型血清Ig E中的应用价值。方法:对SD大鼠采用卵清蛋白(OVA)雾化法建立过敏性哮喘模型,采用方阵滴定法确定Ig E标准品和血清样本的最佳稀释浓度、酶标二抗的最佳工作浓度。检测45只SD大鼠(哮喘组15只,空白对照组15只,西药治疗组15只)血清Ig E,确定阴阳临界值并评价特异性。用本研究建立的ELISA法检测各组实验动物Ig E的OD450。结果:确定Ig E标准品最佳工作浓度为1:1,样本选用原液,酶标二抗最佳稀释倍数为1:4,阳性临界值为0.752,特异性为100%。测得各组动物血清Ig E的OD450,经统计发现哮喘组血清中的Ig E的OD450值(0.944±0.083)与空白对照组(0.687±0.039)和西药治疗组(0.859±0.014)存在显著差异(P<0.05)。结论:试验建立的间接ELISA法能够检测过敏性哮喘模型的Ig E,该方法可用于临床上诊断过敏性哮喘。
- 郭海涛杨光勇何光志
- 关键词：过敏性哮喘间接ELISAIGE
- 单链抗体的研究进展及其应用被引量：10
- 2015年
- 单链抗体(single chain Fv,ScFv)是继单克隆抗体之后的基因工程抗体,为第3代抗体,其分子质量小,穿透力强,与抗原结合能力较好。ScFv可应用于靶向治疗载体、影像诊断和生物检测等方面,展示出了广阔的应用空间,被誉为一次革命性的进展。相信不久的将来,ScFv将凭借自身的优势,在医学、食品卫生和农业等领域发挥巨大作用。文章综述了Sc Fv的研究进展及其应用。
- 郭海涛杨光勇何光志
- 关键词：基因工程抗体单链抗体库
- 基因工程技术在医学中的应用被引量：10
- 2013年
- 目的:为了了解基因工程技术在医学中的应用及其利弊。方法:通过查阅相关文献,了解基因工程技术在重组药物、疫苗、诊断和治疗等方面的应用,并分析其利弊。结果:基因工程技术的快速发展使其在医学中得到了广泛的应用,但同时也存在着不利的一面。结论:发展基因工程技术的造福功能,抑制其危害功能。
- 郭海涛何光志
- 关键词：基因工程基因工程疫苗基因诊断基因治疗
- 一种抗IL-4R单链抗体与蜂毒肽融合蛋白及其应用
- 本发明公开了一种抗IL‑4R单链抗体与蜂毒肽融合蛋白及其应用，其制备方法为：通过重叠延伸PCR技术方法将抗IL‑4R单链抗体与蜂毒肽基因连接成scFv‑MLT基因，构建pET‑32a重组质粒scFv‑MLT，转入BL21...
- 何光志杨光勇郭海涛刘茜明田维毅王文佳蔡琨梁建东王平
- 抗IL-4R单链抗体的制备方法及其在抗肿瘤上的应用
- 本发明公开了一种抗IL?4R单链抗体的制备方法及其在抗肿瘤上的应用，其制备方法包括动物免疫、构建pCANTAB5E?scFv重组质粒、构建抗IL?4R抗体库、噬菌体抗体库的富集与筛选、scFv序列优化和pET?32a?s...
- 何光志杨光勇郭海涛刘茜明田维毅蔡琨王文佳梁建东王平韩洁
- 文献传递
- 重组IL-4R蛋白对SD大鼠过敏性哮喘干预作用的研究
- 2017年
- 目的探索重组IL-4R蛋白对过敏性哮喘动物模型的干预作用。方法选择6周龄SD大鼠60只,采用安全随机分组法分成哮喘模型组、IL-4R组、布地奈德组和对照组,每组15只。哮喘模型组在腹部选取3处于皮下注射10%鸡卵清白蛋白(OVA)混合液1ml(OVA 100mg、氢氧化铝100mg及灭活的百日咳杆菌5×109个)进行致敏,1周后用上述同样药物再进行致敏,第2次致敏1周后将大鼠分别放入不完全封闭的箱中,用5%OVA与0.9%氯化钠混合溶液,连续10d超声雾化激发30min。IL-4R组和布地奈德组同法造模,但每次雾化激发前30min,IL-4R组腹腔注射重组IL-4R蛋白稀释液(400μg/d)。布地奈德组腹腔注射布地奈德稀释液(400μg/d),对照组用0.9%氯化钠溶液连续10d超声雾化激发30min。取4组大鼠肺组织作HE染色的光镜病理切片,观察肺组织病理变化。建立间接ELISA方法,检测实验中4组大鼠肺泡灌洗液中的IL-4和IFN-γ的含量。结果哮喘模型组大鼠肺组织有大量嗜酸性粒细胞浸润,对照组大鼠肺组织几乎无嗜酸性粒细胞浸润,IL-4R组和布地奈德组大鼠肺组织嗜酸性粒细胞浸润明显少于哮喘模型组。IL-4R组和布地奈德组肺泡灌洗液中IL-4和IFN-γ的含量明显高于哮喘模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论研究结果提示IL-4R蛋白对过敏性哮喘有良好的干预作用。
- 杨光勇郭海涛刘茜明刘莉莉何光志
- 关键词：IL-4RIFN-Γ过敏性哮喘
- 一种抗IL-4R单链抗体与蛇毒L-氨基酸氧化酶融合蛋白及应用
- 本发明公开了一种抗IL‑4R单链抗体与蛇毒L‑氨基酸氧化酶融合蛋白，所述融合蛋白这样制备：通过重叠延伸PCR技术方法将抗IL‑4R单链抗体与竹叶青蛇毒LAAO基因连接成scFv‑LAAO融合基因，构建重组质粒pET28a...
- 何光志杨光勇郭海涛刘茜明田维毅梁建东蔡琨王平王文佳韩洁
- 文献传递
- 蛇毒的功效及研究现状被引量：5
- 2016年
- 蛇毒可致人死亡,然中医学很早就有以毒攻毒的思想,以蛇入药的文字记载最早可以追溯到战国时期的《山海经》,后经过历代医家不断的临床实践,筛选总结出了几种像金钱白花蛇、蕲蛇、乌梢蛇和蝮蛇这些具有代表性的蛇类药以及它们的临床功效,比如乌梢蛇具有祛风通络止痉的作用,可以用于治疗中风半身不遂、破伤风、荨麻疹和恶疮等。然而，真正对蛇毒展开全面深入的研究当属现代，采用现代手段研究蛇毒，蛇毒的部分成份已经能被提取、分离、纯化、克隆重组等，预示着蛇毒在医学上的应用研究将越来越广泛。
- 刘茜明郭海涛杨光勇何光志田维毅蔡琨王平黄高梁建东王文佳
- 关键词：蛇毒凝血溶栓镇痛抗炎
- 白细胞介素-4及其受体的研究现状被引量：9
- 2014年
- 白细胞介素-4（interleukin-4，IL-4）是域型辅助T细胞（Th2细胞）分泌的细胞因子。人类白细胞介素-4受体（interleukin-4 receptor，IL-4R）属于红细胞生成素受体超家族成员，与IL-4特异性结合后发挥其生物学功能，现已发现有可溶性IL-4R（Solu-bleinterleukin-4 receptor，sIL-4R）及膜型IL-4R （murine interleukin-4 receptor，mIL-4R），两者与IL-4的结合时的亲和力相同。其中sIL-4R可作为IL-4的保护性载体，并且具有调节IL-4生物学活性的功目前，临床上将IL-4及其受体作为免疫调节剂，在检测和防治哮喘、类风湿性关节炎和肿瘤等相关疾病的效果已经日渐显著。笔者以IL-4及IL-4R对有关文献进行查阅、整理和归纳。现将介绍IL-4及其受体研究现状如下。
- 杨光勇郭海涛何光志
- 关键词：IL-4
- scFv-LAA0融合蛋白的制备及对人肺腺癌细胞H460、小鼠肺腺癌增殖抑制作用观察被引量：1
- 2016年
- 目的：制备重组抗白介素4受体（IL-4R）单链抗体基因与竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶（LAAO）的融合蛋白（scFv-LAAO融合蛋白），并观察其对人肺腺癌细胞H460、小鼠肺腺癌增殖抑制作用。方法①采用重叠延伸PCR技术将抗IL-4R单链抗体与竹叶青蛇毒LAAO基因连接成scFv-LAAO融合基因，构建重组质粒pET28a-scFv-LAAO，转染BL21（DE3）原核表达菌，诱导表达scFv-LAAO融合蛋白，用SDS-PAGE法检测scFv-LAAO融合蛋白的分子量，用Western blotting法检测scFv-LAAO融合蛋白的His-tag表达。②设空白对照组、环磷酰胺组和融合蛋白组（包括高、中、低剂量融合蛋白组），分别用培养基、2．0 mg／mL环磷酰胺及4．0、2．0、1．0 mg／mL的scFv-LAAO融合蛋白培养人肺腺癌H460细胞，用MTT法测算环磷酰胺组和高、中、低剂量融合蛋白组细胞增殖抑制率。取75只小鼠，建立荷肺腺癌动物模型，随机分为空白对照组、环磷酰胺组和融合蛋白组（包括高、中、低剂量融合蛋白组），分别腹腔注射生理盐水、0．1 mL／10 g体质量的环磷酰胺和100、50和20 mg／kg的scFv-LAAO融合蛋白，1次／d，连用10 d后停药，停药7 d后称量各组小鼠瘤重，计算环磷酰胺组和高、中、低各剂量融合蛋白组抑瘤率；同时统计存活时间。结果 scFv-LAAO融合基因长度2000～3000 bp。用融合基因转染BL21（DE3）原核表达菌后，将细菌裂解从裂解液中分离出的蛋白分子量86 kD，与scFv-LAAO融合蛋白分子量相符，且用Western blotting法在分离到的蛋白中检出scFv-LAAO融合蛋白组氨酸标签。环磷酰胺组和高剂量融合蛋白组人肺腺癌H460细胞增殖抑制率、小鼠抑瘤率和生存时间相比，P均＞0．05；环磷酰胺组和高剂量融合蛋白组H460细胞增殖抑制率、小鼠抑瘤率和生存时间高于低、中剂量融合蛋白组，P均＜0．05；低剂量融合蛋白组H460细胞增殖抑制率、小鼠抑�
- 杨光勇郭海涛刘茜明何光志
- 关键词：肺腺癌
