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乙型肝炎的免疫及治疗性疫苗研究被引量：1: 2012年; 乙型肝炎是一种危害严重的传染病.全世界有超过3.5亿人为乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)慢性感染者,每年因乙型肝炎相关性肝病死亡的人数达一百万[1].我国是乙型肝炎的高发地区,虽然经过近年来全国性的新生儿乙型肝炎疫苗接种,5岁以下儿童的HBsAg阳性率已降为0.96％,但现有的慢性HBV感染者仍有约9300万人,其中慢性乙型肝炎患者约2000万人[2],乙型肝炎仍然是威胁我国人民健康的最严重的传染病.; 金博; 关键词：疫苗研究慢性化治疗性乙型肝炎细胞反应特异性细胞免疫

还原型谷胱甘肽联合甘草酸二铵对腹部开放伤后海水浸泡犬肝功能损伤的治疗作用被引量：2: 2009年; 目的探讨保肝药物还原型谷胱甘肽联合甘草酸二铵对腹部开放伤后海水浸泡实验犬肝功能损伤的治疗作用。方法致腹部开放伤后的24只犬随机分为对照组（海水浸泡1．5h后打捞出水，单纯观察），普通治疗组（经海水浸泡后打捞出水，给予一般急救及补液处理）和保肝药物治疗组（经海水浸泡后打捞出水，给予一般急救及补液处理，同时给予保肝药物治疗），每组8只。于致伤前及致伤后定时取血测定总胆红素（TB）、血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、凝血酶原时间（PT）、内毒素、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6），同时对肝组织进行病理检查。结果对照组血清TB、ALT、AST和LDH明显升高，并且生存时间小于24h。普通治疗组血清TB、ALT、AST和LDH也有明显升高，但生存时间均超过24h。还原型谷胱甘肽联合甘草酸二铵能在伤后12～24h内较明显减轻肝脏受损的程度。结论还原型谷胱甘肽联合甘草酸二铵对外伤后海水浸泡导致的肝功能损伤的防治效果良好，可作为该类肝损害的首选防治方法。; 孙涛刘超群李欣金博浦江段蕴铀; 关键词：海水浸泡腹部开放伤肝功能还原型谷胱甘肽甘草酸二铵

丙型肝炎病毒非结构蛋白3的体外表达与纯化: 2012年; 目的构建丙型肝炎病毒非结构蛋白3(HCV NS3)表达质粒并在大肠杆菌中表达其全长蛋白。方法克隆HCV NS3的核酸序列3420-5312位点,插入pQE-11质粒的BamH1限制性酶切位点,将此重组质粒转入大肠杆菌表达,用Westernblot方法筛选阳性克隆,将含有额外拷贝的argU、ileY和leuW的tRNA基因的pACYA质粒引入HCV NS3表达系统以提高HCV NS3蛋白的表达量。收集培养扩增的大肠杆菌菌体,用卵白溶菌酶裂解,收集含有HCV NS3重组蛋白的不溶性包涵体,将包涵体充分洗涤后,溶于含10mmol/L二硫苏糖醇的缓冲液中。释放的可溶性蛋白用SDS-PAGE电泳分离、洗脱,用离心过滤方法浓缩,乙醇沉淀,重复洗涤去除内毒素。结果用此方法克隆的HCVNS3全长基因片段表达的重组蛋白分子量为69kD。含有额外拷贝的argU、ileY和leuW的tRNA基因的pACYA质粒引入HCV NS3表达系统后,HCV NS3蛋白的产出率可提高10倍以上。此方法生产的NS3纯化蛋白质产量,每升培养物为40mg。内毒素含量低于20EU/mg NS3蛋白。结论 HCV NS3与HCV的免疫逃逸及感染的慢性化有密切关系,是HCV的抗病毒治疗和疫苗研究的重要靶点,全长HCV NS3蛋白的体外合成为HCV研究提供了一个有用的工具。; 金博李楠吴凯张林王艳梅翟俊山朱超慧宋久刚; 关键词：肝炎病毒属病毒非结构蛋白质类重组蛋白质类

不同类型部队消化系统医疗需求分析被引量：7: 2009年; 目的了解部队消化系统疾病的发病情况,为部队提供更有针对性的医疗服务,同时也为领导机关调整部队医疗队伍结构提供依据。方法采用横断面调查方法,共调查了10支不同类型的部队,按照所执行任务不同分为A类部队、B类部队和C类部队,按照被调查者的病情诊断分为功能性胃肠病、慢性胃炎、消化性溃疡、健康咨询及其他。结果A类部队功能性胃肠病患病率和健康咨询的比率最高,分别为44.64%和30.36%;B类部队慢性胃炎患病率最高,为25.84%;C类部队其他消化系疾病的患病率最高,为41.89%。结论A类部队迫切需要加强心理疏导以及心理学知识和医学保健常识的普及;而B类部队需要改变以辣为主的饮食习惯,加强卫生宣教,减少饮酒;C类部队消化系疾病谱与普通人群相似。; 金博贺声周山黄叶莉鹿尔训; 关键词：消化系统疾病流行病学

腹部开放伤后海水浸泡对犬肠功能及形态学的影响被引量：15: 2007年; 目的探讨腹部开放伤后海水浸泡对实验犬肠功能及其形态学的影响。方法实验动物致伤后随机分为对照组（10只）和海水浸泡组（10只）。对照组致伤后直接观察，海水浸泡组致伤后放人海水中浸泡1．5h。于致伤前（0h）及出水后4、8、12、16、20h取血测定血清内毒素、谷氨酰胺、乳酸、肿瘤坏死因子一d（TNF—d）、白介素-6（IL-6）含量，测量腹围，监测肠鸣音。进行大便常规及潜血检查，记录呕血和黑便的发生率，24h取小肠组织进行病理检查。结果海水浸泡组24h均死亡，对照组无死亡。血清内毒素、乳酸、TNF—α和IL-6升高并且呈进行性发展，谷氨酰胺出现进行性下降，20h指标与对照组比较差异有统计学意义。海水浸泡组大便常规及潜血检查出现阳性，与对照组相比差异有统计学意义，并有6只犬出现黑便，1只出现呕血；腹围增加，肠鸣音减弱，与对照组相比差异有统计学意义；小肠病理检查有明确的形态学改变，对照组病理变化不明显。结论海水浸泡可导致实验犬的肠道屏障功能损伤和小肠细胞病理形态学变化，海水浸泡组还可出现消化道出血以及肠麻痹，原因可能与肠道菌群移位、海水直接损伤等因素有关。; 孙涛李欣金博刘超群浦江付山峰段蕴铀; 关键词：海水浸泡腹部开放伤肠功能

兔四氯化碳实验性肝硬化模型的建立被引量：12: 2005年; 目的应用四氯化碳造成兔肝硬化模型。方法雄性新西兰大白兔给予皮下注射四氯化碳,每周2次,12周后检测肝脏病理改变及肝组织羟脯氨酸含量。结果四氯化碳注射12周后,兔肝组织出现典型的假小叶,肝组织羟脯氨酸含量较正常组升高3.5倍。结论此方法成功地建立了一种兔肝硬化动物模型。; 金博程留芳孙涛张志成; 关键词：肝硬化四氯化碳新西兰大白兔肝硬化模型四氯化碳肝脏病理改变皮下注射

剂量和佐剂对丙型肝炎病毒脱氧核糖核酸疫苗免疫效果的影响被引量：1: 2005年; 目的研究几种佐剂对不同剂量丙型肝炎病毒脱氧核糖核酸疫苗免疫效果的影响。方法小鼠分别用脂质体溴化二甲基双+烷基铵/卵黄卵磷脂和氢氧化铝为佐剂的丙型肝炎病毒脱氧核糖核酸疫苗免疫3次,用酶联免疫斑点测定方法观察脾淋巴细胞受丙型肝炎病毒蛋白抗原刺激后细胞因子的产生情况。结果溴化二甲基双+烷基铵/卵黄卵磷脂组产生γ-干扰素和白细胞介素-4较多,用核心、E2或E1/E2刺激,显著高于裸脱氧核糖核酸和氢氧化铝组(P<0.05)。以氢氧化铝为佐剂,用每种脱氧核糖核酸100μg剂量免疫的小鼠,在受抗原刺激后,其脾淋巴细胞产生白细胞介素-4的能力显著高于相应的裸脱氧核糖核酸组(P<0.05)。在多数情况下,接受每种脱氧核糖核酸100μg剂量的小鼠产生γ-干扰素和白细胞介素-4的能力显著高于接种每种50μg者(P<0.05);与裸脱氧核糖核酸组及溴化二甲基双+烷基铵/卵黄卵磷脂组比较,氢氧化铝组小鼠淋巴细胞产生的白细胞介素-4多于γ-干扰素。结论溴化二甲基双+烷基铵/卵黄卵磷脂对丙型肝炎病毒脱氧核糖核酸疫苗有很强的免疫佐剂效应,为Ⅰ型辅助性T细胞佐剂,氢氧化铝是Ⅱ型辅助性T细胞佐剂,可将脱氧核糖核酸疫苗Ⅰ型辅助性T细胞为主的免疫特性转换为以Ⅱ型辅助性T细胞为主,50μg的丙型肝炎病毒脱氧核糖核酸疫苗似乎不能诱导小鼠产生有效的免疫反应。; 金博程留芳孙涛; 关键词：核酸疫苗丙型肝炎病毒免疫佐剂

腹部开放伤合并海水浸泡后致肠功能障碍半胱氨酸蛋白酶-3的表达与细胞凋亡的关系被引量：4: 2010年; 目的研究腹部开放伤合并海水浸泡所致肠功能障碍发生过程中小肠上皮细胞的半胱氨酸蛋白酶(Caspase)的表达与细胞凋亡的关系。方法原位末端标记(TUNEL)法检测大鼠腹部致伤后不浸泡、0.9%氯化钠溶液浸泡、海水浸泡结束后细胞凋亡的发生及变化特点。免疫组化检测各组凋亡相关蛋白Caspase-3表达变化。结果正常大鼠小肠上皮散在TUNEL阳性细胞,Caspase-3阳性细胞主要在小肠上皮绒毛处呈中等阳性表达。腹部致伤后不浸泡及0.9%氯化钠溶液浸泡组TUNEL阳性细胞较对照组增多,而Caspase-3表达亦较对照组增高。海水浸泡组的TUNEL阳性细胞及Caspase-3表达较0.9%氯化钠溶液浸泡组及不浸泡组明显增多。结论在大鼠腹部开放伤合并海水浸泡导致的肠功能障碍无论从形态学上及凋亡蛋白的表达上均较不浸泡和0.9%氯化钠溶液浸泡严重,大量肠细胞凋亡的发生可能是海战伤中早期出现肠功能障碍的主要原因。; 吴姗珊李欣金博浦江王蕙孙涛; 关键词：腹部半胱氨酸蛋白酶类细胞凋亡

肝脏纤维化的可逆性被引量：5: 2005年; 肝纤维化和肝硬变是当前肝病研究的重点。近年来研究的结果表明肝纤维化是一种可逆性的改变,而肝硬变的逆转往往是不完全的。肝纤维化的逆转与肝内基质金属蛋白酶的活性有密切关系。近年来肝病学者通过各种方法试图增加肝内基质金属蛋白酶的活性,并取得了一定的进展。; 金博程留芳; 关键词：肝脏纤维化可逆性基质金属蛋白酶

胶原酶门静脉灌注对兔肝硬化及组织中星状细胞激活的影响被引量：1: 2011年; 目的 CCl4皮下注射建立兔肝硬化动物模型,观察Ⅳ型胶原酶门静脉灌注对肝硬化及肝组织中α-平滑肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法取雄性新西兰大白兔,采用臀部皮下注射50%CCl4橄榄油0.23ml/kg,每周2次,共12周制作肝硬化动物模型,注射等量橄榄油作为对照。12周后各组动物均建立门静脉给药通路,将已形成肝硬化并门静脉插管成功的33只兔随机分为两组(组1,组2),组1为16只、组2为17只。组1经门静脉给药通路注入0.1%Ⅳ型胶原酶1.5ml,组2注入等量0.9%氯化钠,5次/周,共4周。将造模对照组中门静脉插管成功的30只兔同样随机分为两组(组3,组4),每组15只,处理方法同前。4周后,将各组动物处死后留取肝脏组织,观察其病理学及羟脯氨酸含量变化,标本固定后,行α-SMA免疫组织化学染色,行积分光密度、面密度分析。结果肝硬化动物肝脏α-SMA表达显著增强;门静脉灌注0.1%Ⅳ型胶原酶肝硬化动物肝脏纤维化程度明显降低,羟脯氨酸含量显著降低,但α-SMA表达强度显著增高。结论采用门静脉灌注0.1%Ⅳ型胶原酶可显著降低肝纤维化程度,但α-SMA表达增高,可能与肝脏星状细胞激活有关。; 于晓红邱慧彬付山峰路平杨英祥孙涛金博; 关键词：胶原酶类辅肌动蛋白羟脯氨酸门静脉灌注

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