铁轶
- 作品数：34 被引量：72H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划全球变化研究国家重大科学研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 血浆miRNA快速制备方法建立和优化被引量：1
- 2014年
- 目的建立并优化用于血浆microRNA(miRNA)检测分析的miRNA快速提取方法。方法使用含表面活性剂的提取液和加热方法提取血浆miRNA,采用RNA酶抑制剂抑制RNA降解,利用检测miRNA的poly(A)加尾、逆转录反应和实时定量PCR法检测血浆miRNA表达水平,评估方法的可行性。结果成功建立了提取液和加热提取miRNA一步法,实时定量PCR结果表明该方法具有良好的扩增特异性、可重复性,方法稳定可靠。结论提取液和加热一步法简便、快速、低成本,血浆用量少,为临床血浆miRNA检测分析提供了一种新的技术方法。
- 李函蔚钟一然付汉江铁轶朱捷李桂英郑晓飞
- 关键词：血浆微RNA
- mRNA氧化损伤检测方法的优化及p53 mRNA氧化损伤分析被引量：2
- 2013年
- 目的建立并优化检测真核细胞mRNA氧化损伤的方法——反转录阻断-双引物扩增法,检测p53 mRNA氧化损伤。方法建立非细胞体系和细胞体系mRNA氧化损伤模型,提取RNA并反转录成cDNA,根据所检测mRNA的5'端和3'端各设计一对引物,以cDNA为模板进行实时定量PCR。结果非细胞体系和细胞体系氧化处理组GAPDH和p53 mRNA的氧化损伤程度均明显高于对照组,且随着过氧化氢浓度增加RNA氧化损伤增强;同时一定限度内降低反转录酶用量能提高检测灵敏度。结论本研究建立并优化的RNA氧化损伤检测方法能检测特定mRNA对氧化的敏感性及损伤程度,为分析相关疾病造成的RNA氧化损伤以及探索其发病机制和治疗方法提供了技术支持。
- 马春花铁轶付汉江刘斌邢瑞云朱捷丁勇郑晓飞
- 关键词：RNAP53MRNA
- DNA双链断裂感应分子ATM能与PTC1相互作用被引量：1
- 2003年
- 目的 :研究DNA双链断裂感应分子ATM与原癌基因ret重排活化蛋白PTC1的相互作用。方法 :用Flag抗体Western印迹检测 ,ATM免疫共沉淀真核细胞内过表达的PTC1;RET抗体检测ATM免疫共沉淀真核细胞内过表达的c_ret;用HA myc抗体Western印迹检测 ,HA_retTK +myc_LZPR免疫共沉淀蛋白复合物 ;荧光蛋白标记的亚细胞定位。结果 :PTC1可以与ATM激酶相互作用 ,此作用不依赖于电离辐射 ,且不被PI3K家族特异性抑制剂沃氏蓝霉素 (wortmannin)所抑制 ,而野生型RET蛋白则不能同ATM结合 ;缺失体实验进一步证明两者的结合区段为ATM的LZPR结构域与PTC1的酪氨酸激酶结构域。构建PTC1绿色荧光蛋白表达质粒的亚细胞定位实验显示 ,PTC1以弥散形式分布于细胞质内。结论 :胞浆蛋白PTC1可能借助某种途径使ATM在DNA损伤反应发生后重新定位 。
- 铁轶毛建平孟祥兵刘斌宋宜梅柱中董燕孙志贤
- 关键词：RETATM电离辐射蛋白相互作用原癌基因
- 非克隆cDNA文库与RACE技术克隆小剂量辐射诱导新基因RIG1被引量：2
- 2001年
- 目的 在获得了低剂量辐射诱导新基因RIG1EST片段的基础上 ,简便、有效地获得其全长cDNA ,进行下一步的基因功能研究。方法 结合应用非克隆cDNA文库技术及增强RACE技术 ,设计了巢式RACEPCR、生物素磁性分离、生物素标记探针杂交、再次磁性分离的纯化流程。结果 成功地克隆到RIG1EST片段 3′端约 1kb的序列 ,该序列 3′端具有明显的polyA加尾信号 ,有编码区的终止密码子。进一步的分析明确了RIG1EST的正、负链及其蛋白编码方向 ,为RIG15′端的克隆提供了大量可靠的信息 ,目前RIG15′端的克隆已得到很好的进展。结论 所得结果与我们的设计完全一致 ,说明这一技术路线是简便可行的 ,为下一步研究RIG1基因在细胞辐射应激反应中的功能及被辐射诱导表达的调控模式奠定了基础。
- 罗瑛隋建丽铁轶张元平周平坤孙志贤
- 关键词：探针杂交
- 肝癌早期预警和诊断miRNA标志物研究
- miRNA是一类小分子非编码RNA,能够在转录后水平参与调控蛋白质合成,进而影响细胞活动的多个环节.研究证实,多种miRNA参与了癌细胞的发生和发展,直接或间接地起着癌基因或抑癌基因的作用,在肿瘤中起着至关重要的作用.m...
- 曲秋月铁轶付汉江胡铮朱捷邢瑞云郑晓飞
- 循环microRNA与肿瘤诊断被引量：14
- 2009年
- miRNA是一类小分子调控RNA,在肿瘤的发生与控制方面发挥着重要的作用.已经发现在肿瘤患者的循环核酸中存在源自肿瘤的miRNA分子,这一现象提示循环miRNA分子可能成为无创诊断癌症的一个有效的方法.本文综述了循环miRNA作为循环生物标志物在肿瘤诊断中的应用,以及该领域的最新研究进展.
- 铁轶付汉江郑晓飞
- 关键词：肿瘤
- 两种高效RNA干涉载体系统的构建及应用被引量：2
- 2005年
- 在真核细胞基因功能研究中,RNA干涉(RNAi) 已成为一种强有力的选择性沉默基因表达的实验工具. 建立一套可在哺乳动物培养细胞中高效、经济地表达siRNA的载体系统是RNA干涉研究的必要前提之一. 从HepG2细胞基因组DNA中克隆得到H1全长启动子(374 bp),以之为基础构建了两套RNA干涉载体系统,pSL和带有绿色荧光蛋白(EGFP) 标签的pESL,并对p53基因进行了相应的RNA干涉研究. 干涉质粒瞬时转染HepG2细胞后,分别利用半定量RT-PCR和蛋白质印迹检测p53表达水平. 与商品化载体pSilencerTM 3.1-H1 hygro相比,pSL和pESL对p53基因表达具有更高的干涉效率. 结果显示:干涉载体pSL和pESL能高效特异地下调目的基因表达,可作为哺乳动物中基因功能分析的有效工具.
- 杨明付汉江铁轶朱捷江红郑晓飞
- 关键词：RNA干涉P53基因
- RNA抗体的制备和初步应用
- 为了进一步研究细胞外RNA的存在和功能,我们利用甲基化白蛋白作为酵母RNA载体,增加免疫原性,免疫新西兰纯种大白兔,将酵母sRNA溶于0.15MNaCl,0.05%MBSA,最终MBSA与RNA的质量比为1:1,MBSA...
- 铁轶焦虎平付汉江朱捷邢瑞云郑晓飞
- 文献传递
- 乳头状甲状腺癌基因ret重排活化的致癌机制研究
- 该研究首先运用RT-PCR法对部分中国人PTC患者病理切片进行了ret基因重排与否及重排类型的检测表明:有PTC1-PTC4等4种重排,其中以PTC1重排形式较为常见,并且存在一个病例中多种重排形式共存的现象.第二部分研...
- 铁轶
- 关键词：乳头状甲状腺癌ATM蛋白相互作用
- 文献传递
- RNAi抑制apobec-1基因表达对NF1编辑的影响
- 对多发性神经纤维细胞瘤(neurofibromatosis type 1,NF1)的研究发现mRNA的转录后修饰-RNA编辑的异常能导致细胞的癌变。在恶性多发性神经纤维瘤细胞中,neurofibromin mRNA中编码...
- 孙芳付汉江铁轶江红朱捷郑晓飞
- 文献传递
