陈竞
- 作品数：12 被引量：39H指数：4
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RNAi的研究进展被引量：5
- 2004年
- 陈竞
- 关键词：靶基因反义RNA双链RNA特异性RNA干扰
- TG2和Mertk基因共沉默腺病毒干扰载体的构建及其基因沉默作用被引量：1
- 2013年
- 目的构建转谷氨酰胺酶2(TG2)和Mer受体酪氨酸激酶(Mertk)基因共沉默腺病毒干扰载体,并检测其基因沉默作用。方法首先构建能干扰TG2和Mertk蛋白表达的质粒载体pSUPER/TG2及pSUPER/Mertk,再将其干扰序列和H1启动子序列切下并连接到pAdTrack上,构建成pAdTrack/TG2/Mertk载体。将其转入含有pAdEasy-1的BJ5183感受态细菌中,回收并酶切鉴定重组腺病毒载体。将阳性腺病毒载体感染HEK293细胞,收集病毒,反复扩增后测定病毒滴度。分别以pAdTrack/TG2/Mertk、pAdTrack/TG2、pAdTrack/Mertk及pAdTrack/绿色荧光蛋白(GFP)感染RAW264.7细胞,采用免疫印迹法检测其TG2蛋白和Mertk蛋白的表达水平。结果pAdTrack/TG2/Mertk载体的病毒滴度为6.13×1010GFU/mL。经酶切鉴定,pAdTrack/TG2/Mertk含有插入的2个启动子和2个干扰序列,载体构建成功。pAdTrack/TG2和pAdTrack/TG2/Mertk组TG2蛋白的表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05),但均低于pAdTrack/GFP和pAdTrack/Mertk组(P<0.01),后两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。pAdTrack/Mertk和pAdTrack/TG2/Mertk组Mertk蛋白的表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05),但均低于pAdTrack/GFP和pAdTrack/TG2组(P<0.01),后两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TG2和Mertk基因共沉默腺病毒干扰载体pAdTrack/TG2/Mertk构建成功,其能显著降低小鼠巨噬细胞样RAW246.7细胞中TG2蛋白和Mertk蛋白的表达水平。
- 郑江华陈竞陈开朱彦彬武国
- 关键词：RNA干扰腺病毒
- 大网膜血管内瘤1例被引量：2
- 2003年
- 患者,男,14岁,因“腹部外伤术后10^+天”急诊入院。10^+天前患者曾被足球砸伤腹部,当即腹痛剧烈,渐出现腹胀、恶心、口渴、气促,心慌,在当地县医院手术证实“大网膜出血”,术后第三天腹腔引流出2000ml鲜血。入院查体:重度贫血貌,腹膨隆,
- 高砚春陈竞
- 关键词：手术治疗剖腹探查术
- 甘草甜素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231生长的影响被引量：14
- 2016年
- 目的研究甘草甜素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231生长的影响。方法将对数生长期人乳腺癌细胞随机分为5组:对照组仅加等量培养液,实验A组、B组、C组及D组分别给予浓度分别为0,50,100,200μmol·L^(-1)的甘草甜素细胞培养液;用噻唑蓝(MTT)法检测5组人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡情况,并采用半定量逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)检测细胞中Fas、survivin、Bcl-2、Bax和caspase-3基因水平。结果随着甘草甜素浓度的增加和作用时间的延长,对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖抑制作用显著增强,其中48 h后对照组OD值为(0.61±0.21),实验A、B、C、D组分别为(0.61±0.11),(0.56±0.15),(0.48±0.17),(0.45±0.14),实验A、B、C、D组的抑制率分别为8.17%,10.01%,24.41%,31.82%,各组比较差异有统计学意义(P<0.05);Fas、survivin、Bax和caspase-3基因表达因甘草甜素浓度增加而降低,而Bcl-2表达则因甘草甜素浓度增加而上升。实验D组的Fas、survivin、Bax和caspase-3基因表达下降程度明显高于其他组(P<0.05),Bcl-2基因表达水平增加程度也明显高于其他组(P<0.05)。结论甘草甜素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞增殖抑制作用强,具有明显的量效和时效关系。
- 高砚春陈竞蔡燕
- 关键词：甘草甜素
- B超探视下麦默通系统在乳腺疾病中的诊疗价值被引量：5
- 2016年
- 目的探讨麦默通微创技术在B超探及的乳腺占位性病变中的临床应用,并结合临床对麦默通微创技术在乳腺占位性病变中的适应证进行总结。方法应用麦默通微创切除B超探及的乳腺占位性病变1220例,共计2272个肿物。结果 B超探视下肿物完整切除,切除肿物术后病理结果显示:乳腺纤维腺瘤1786个,乳腺腺病412个,乳腺囊肿病46个,导管内乳头状瘤15个,乳腺癌8个,不典型增生5个。结论麦默通微创技术可作为B超探及的乳腺良性占位切除手术的首选方式,并可作为亚临床乳腺癌的活检方式。
- 高砚春陈竞蔡燕
- 关键词：B超乳腺占位性病变乳管内乳头状瘤
- 细菌内同源重组法构建靶向Survivin的腺病毒载体的研究
- 2016年
- 目的:研究细菌内同源重组法构建靶向Survivin的腺病毒载体及其体外扩增表达。方法:将survivin基因克隆至穿梭质粒载体中,特异性酶切后回收、连接、转化,构建负载survivin片段的重组腺病毒载体。提取重组病毒基因酶切鉴定后,包装成病毒,并扩增到所需滴度。行Western blotting鉴定,观察重组腺病毒载体在真核细胞的表达。结果:(1)重组穿梭质粒的Mlu I酶切鉴定结果显示,酶切结果均与相应的载体及目的片段的大小相符合,基因测序结果基本一致。(2)凝胶电泳产生了两条大约15 kb和8.5kb的片段,由图2可知重组腺病毒质粒酶切充分完全,且回收率较高。(3)重组腺病毒载体转染AD293细胞24 h后已出现细胞病变效应,病变细胞细胞核变大。(4)D260/OD280的值为1.92,表明重组腺病毒纯度较高。(5)AD293细胞病毒上清中有能与抗Survivin单抗反应的蛋白,其相对分子质量与理论值相吻合,阴性对照组无对应条带出现。结论:本方法成功构建表达了含Survivin的重组腺病毒载体,为进一步进行Survivin基因功能的研究提供了实验基础和理论支持。
- 陈竞高砚春蔡燕李金穗郭冬梅
- 关键词：SURVIVIN腺病毒载体
- 靶向survivin基因反义寡核苷酸对MCF-7人乳腺癌细胞系凋亡及药物敏感性等生物学行为的影响被引量：2
- 2016年
- 目的探讨靶向survivin基因反义寡核苷酸(as ON)对MCF-7人乳腺癌细胞系凋亡及药物敏感性等生物学行为的影响。方法 MCF-7人乳腺癌细胞株分为正常组、脂质体组、正义组和反义组,正常组常规培养,并用Opti-MEM培养液代替转染液进行转染;脂质体组采用Lipofectamine 2000-Opti-MEM代替转染液进行转染;正义组采用survivin正义寡核苷酸进行转染;反义组采用survivin基因as ON转染。采用反转录聚合酶链反应检测各组survivin mRNA表达水平,四甲基偶氮唑盐法检测细胞抑制率;分别用紫杉醇处理MCF-7细胞株,并检测紫杉醇处理后survivin mRNA表达水平和细胞抑制率。结果 as ON转染后,MCF-7细胞中survivin mRNA表达水平显著降低,其中反义组survivin mRNA表达水平显著低于正常组、脂质体组和正义组(0.34±0.10比0.63±0.10、0.74±0.20、0.73±0.10),细胞抑制率显著高于正常组、脂质体组和正义组[(51.32±7.42)%比(3.72±0.10)%、(4.12±0.10)%、(4.53±0.10)%],差异有统计学意义(P<0.05)。转染后反义组细胞周期被阻滞于G2/M期;其中反义组G2/M期细胞比率显著高于正常组、脂质体组和正义组[(34.9±2.7)%比(21.5±2.8)%、(19.4±2.6)%、(18.8±1.9)%],反义组细胞凋亡率亦显著高于正常组、脂质体组和正义组[(16.3±1.2)%比(5.1±0.4)%、(5.3±0.5)%、(5.7±0.5)%],差异有统计学意义(P<0.05)。各组经紫杉醇处理后survivin mRNA表达水平和细胞抑制率均显著增加,与不加药组比较差异有统计学意义(P<0.05);其中反义组survivin mRNA表达水平显著低于正常组、脂质体组和正义组(0.62±0.15比1.37±0.33、1.47±0.33、1.33±0.26),细胞抑制率显著高于正常组、脂质体组和正义组[(84.75±9.62)%比(36.44±3.73)%、(41.45±5.36)%、(40.82±4.93)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论 survivin基因与MCF-7细胞增殖、抗凋亡、化疗耐药等生物学行为有关,通过as ON下调survivin基因的表达水平,能够促进肿瘤细胞�
- 高砚春陈竞李金穗
- 关键词：乳腺癌反义寡核苷酸凋亡抑制蛋白
- 凋亡抑制因子Survivin的研究进展被引量：3
- 2004年
- 陈竞
- 关键词：凋亡抑制因子SURVIVIN细胞凋亡恶性肿瘤
- 青蒿琥酯对生存素在乳腺癌细胞株MDA-MB-231表达的影响
- 2012年
- 目的探讨青蒿琥酯对生存素(survivin)在乳腺癌细胞株MDA-MB-231中表达的影响。方法以不同浓度(0、25、50μg/mL)的青蒿琥酯处理MDA-MB-231细胞,分别于药物处理后24、48和72h收集细胞及培养上清液,用RT-PCR检测不同组别、不同时间点的细胞中survivin的基因表达情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组、各时间点培养上清液中survivin的蛋白质表达水平。结果 PCR结果和ELISA结果均显示,随着药物浓度的增加和处理时间的延长,survivin基因水平和蛋白质水平的表达也逐渐降低,同一时间点各组间survivin的表达量进行单因素方差分析,差异有统计学意义(P<0.05);对照组(0μg/mL)在24h和48hsurvivin的表达量变化不大,经t检验分析,差异无统计学意义(P>0.05),而各浓度经药物处理48h后survivin的表达量明显低于24h的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论青蒿琥酯可通过抑制survivin的表达促进乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡。
- 陈竞高砚春
- 关键词：青蒿琥酯MDA-MB-231乳腺癌生存素
- 超声误诊为乳腺癌临床特征与风险预测模型构建
- 2024年
- 目的分析超声误诊为乳腺癌临床特征,并构建误诊风险预测模型。方法选取2021年1月至2023年12月行超声检查的乳腺肿块患者602例,按照误诊情况分为误诊组和诊断准确组,分析超声误诊为乳腺癌病例特征,并构建误诊风险预测模型。结果共有30例误诊为乳腺癌,误诊率为4.98%。诊断准确组与误诊组在病灶最大径、触诊、合并良性病灶、合并炎性病变、超声图像边缘、血流信号明显、腋下淋巴结回声、微钙化、病灶结构复杂多样方面比较差异有统计学意义(P<0.01)。经二元Logistic回归分析显示,病灶最大径(≥5 cm)、合并良性病灶、合并炎性病变、超声图像边缘(模糊)、血流信号明显、腋下淋巴结回声、微钙化、病灶结构复杂多样是超声误诊为乳腺癌的危险因素(P<0.05,P<0.01)。超声误诊为乳腺癌风险预测模型:2.623×病灶最大径(≥5 cm)+1.422×合并良性病灶+1.616×合并炎性病变+1.574×超声图像边缘(模糊)+1.134×血流信号明显+1.518×腋下淋巴结回声+2.027×微钙化+1.541×病灶结构复杂多样。Hosmer-Lemeshow拟合度检验显示,该模型拟合优度较好(χ^(2)=3.487,P=0.900);受试者工作特征曲线分析显示,预测模型预测超声误诊为乳腺癌风险的曲线下面积为0.921,约登指数为0.698,敏感度、特异度分别为83.3%、86.5%,95%CI为0.872,0.969,实际应用准确性为96.2%(579/602)。结论超声误诊为乳腺癌和多种因素有关,基于病灶最大径、合并良性病灶、合并炎性病变、超声图像边缘模糊、血流信号明显、腋下淋巴结回声、微钙化和病灶结构复杂多样危险因子构建的超声误诊为乳腺癌风险预测模型预测准确性较好。
- 陈竞
- 关键词：超声炎性病变纤维腺瘤乳腺囊性增生误诊乳腺肿瘤
