韦安慧
- 作品数：10 被引量：12H指数：2
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中国博士后科学基金吉林省中医药管理局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 甲型流感病毒M2e与人血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达被引量：1
- 2010年
- 目的将甲型流感病毒M2蛋白胞外区(M2e)基因与人血清白蛋白(HSA)基因融合,以构建高效分泌表达的毕赤酵母菌株。方法通过RT-PCR扩增HSA基因,构建pPICZα-HSA质粒,将人工合成的M2e序列与pPICZα-HSA质粒分别经BstBI和KpnI酶切消化后连接,构建真核表达载体pPICZα-HSA/M2e,线性化后电转化毕赤酵母X-33。用PCR法筛选Zeocin抗性阳性的克隆,SDS-PAGE和Western印迹法筛选高表达HSA/M2e菌株。结果经RT-PCR法克隆的HSA基因序列与GenBank登录的cDNA序列一致,构建的pPICZα-HSA/M2e真核表达载体,经电转化获得Zeocin抗性阳性的克隆。SDS-PAGE和Western印迹分析证实了甲醇诱导的培养基上清中含有HSA/M2e,分子量约为68kD。结论成功构建了分泌表达重组HSA/M2e融合蛋白的毕赤酵母菌株,为进一步研究其生物学活性奠定了基础。
- 牟旭鹏韦安慧申茉函孔宁颜炜群
- 关键词：甲型流感病毒血清白蛋白毕赤酵母
- 人脂肪基质细胞向胰岛素分泌细胞分化诱导的研究
- 糖尿病是由多种病因引起的以慢性高血糖为特征的代谢性疾病，严重危害着人类健康。目前糖尿病的治疗手段有胰岛素注射，胰腺和胰岛移植，细胞治疗等。由于长期注射胰岛素存在自体耐受和较高的并发症，胰岛移植面临着供体不足和长期使用免疫...
- 韦安慧
- 关键词：脂肪基质细胞胰岛素分泌细胞诱导分化
- 文献传递
- 重组人碱性成纤维细胞生长因子在大豆毛状根中的表达被引量：1
- 2007年
- 目的利用基因重组技术在大豆毛状根中表达hbFGF。方法将hbFGF基因克隆到pCambia1301载体,以大豆子叶节和下胚轴为外植体,通过发根农杆菌C58C1介导转入到大豆中。经潮霉素抗性筛选,PCR法检测hbFGF基因的整合。用Western blot印迹分析hbFGF的表达。结果阳性毛状根中整合并表达了hbFGF基因。结论克隆hbFGF基因并转染到大豆的毛状根中,在毛状根中表达。
- 陈伟莉范伟全张新民刘楠韦安慧孔宁牟旭鹏颜炜群
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子大豆发根农杆菌毛状根
- 人脐带间充质干细胞的分离培养及成脂成骨分化被引量：3
- 2010年
- 目的建立小胎龄人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)的分离和培养方法,探讨hUCMSCs的成脂、成骨分化潜能。方法采用Ⅱ型胶原酶和透明质酸酶消化法从胎龄12～18w的流产胎儿脐带中分离hUCMSCs;流式细胞仪检测其免疫表型;应用不同因子诱导hUCMSCs向脂肪细胞及成骨细胞分化并进行鉴定。结果体外培养的hUCMSCs呈长梭形,细胞形态均一;表达CD29、CD44、CD73、CD105、CD166;不表达CD34、CD45、CD40、CD40L、CD80、CD86、HLA-DR;油红O、茜素红染色及RT-PCR证实hUCMSCs可分化为脂肪细胞和成骨细胞。结论建立了小胎龄hUCMSCs分离培养方法,证实其具有成脂、成骨分化潜能,有望成为细胞治疗及组织工程更为理想的种子细胞。
- 赵磊王文加付常皓韦安慧颜炜群
- 关键词：脐带间充质干细胞免疫表型脂肪细胞
- 一种八臂聚乙二醇齐墩果酸药物载体的纳米粒子及制备方法
- 本发明公开了一种八臂聚乙二醇齐墩果酸药物载体的纳米粒子及制备方法，包括齐墩果酸、八臂聚乙二醇、乳酸羟基乙酸共聚物、水溶性维生素E、纯化水、聚己内酯、玉米朊以及保护剂，其中保护剂为甘露醇，所述齐墩果酸的占比设为18份‑26...
- 王浩天韦安慧梁迪
- 文献传递
- 人羊水来源干细胞的实验研究
- 糖尿病是由多种病因引起的以慢性高血糖为特征的代谢性疾病，严重危害着人类健康。目前胰岛素注射是临床上治疗糖尿病的主要方法，可以短期内控制血糖。不足之处是需要频繁监测血糖及胰岛素注射，而且不能阻止糖尿病所引起的肾衰、心脏病变...
- 韦安慧
- 关键词：羊水干细胞胰岛素分泌细胞诱导分化
- 文献传递
- 基于Fe_3O_4@SiO_2/Ni-NTA磁性微球的His-tag融合蛋白纯化体系的建立被引量：6
- 2012年
- 合成了表面共价结合Ni-氨基三乙酸(Ni-NTA)基团的Fe3O4@SiO2微球,这种磁性微球可用于分离含有His-tag标签的融合蛋白.微球中心由尺寸约402 nm的Fe3O4微粒组成,赋予了微球极好的磁性分离和离心分离的特性.应用Fe3O4@SiO2/Ni-NTA磁性微球对含有6×His-tag(6聚组氨酸)标签的蛋白进行了分离纯化,结果表明,10 mg Fe3O4@SiO2/Ni-NTA微球能够从10 mL重组蛋白裂解液中纯化出约1 mg带有6×His-tag标签的融合蛋白.微球的高效分离效果使其能够用于含量较低的带有6×His-tag标签蛋白的分离纯化.
- 王文加郭晓林韦安慧付常皓韩振国
- 关键词：磁性微球
- 人脂肪基质细胞向胰岛素分泌细胞的分化诱导
- 2012年
- 目的:体外分离培养人脂肪来源基质细胞(hADSCs),并定向诱导hADSCs向胰岛样细胞分化,探讨hADSCs分化为胰岛素分泌细胞的潜能。方法:从脂肪抽吸物中分离hADSCs,利用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、上皮细胞生长因子(EGF)、尼克酰胺和exendin-4等因子诱导hADSCs向胰岛样细胞分化。采用RT-PCR检测诱导前后胰岛素、胰十二指肠同源性盒因子(Pdx-1)、葡萄糖转运因子2(Glu-t 2)和胰高血糖素(glucagon)基因的表达;双硫腙染色鉴定胰岛样细胞团;免疫荧光染色检测诱导后细胞胰岛素和Pdx-1的表达;ELISA检测诱导后细胞在低糖和高糖环境中胰岛素的分泌量。结果:诱导7 d左右细胞由长梭形逐渐变成多边形,并且细胞开始呈岛状聚集,21 d左右形成胰岛样细胞团。双硫腙染色阳性;RT-PCR显示,诱导后细胞表达胰岛素、Pdx-1、Glu-t2和glucagon基因;免疫细胞化学显示,诱导后细胞表达胰岛素和Pdx-1;葡萄糖刺激实验显示胰岛素的释放,并且随着葡萄糖浓度增加胰岛素的释放量也增加。结论:体外hADSCs具有分化为胰岛素分泌细胞的潜能,为将来应用于临床移植治疗糖尿病奠定了基础。
- 韦安慧李会敏付常皓王浩天王文加苏曼曼颜炜群
- 关键词：脂肪基质细胞胰岛素分泌细胞分化
- 人碱性成纤维细胞生长因子在植物毛状根和毕赤酵母中的表达
- 2010年
- 目的在植物毛状根和毕赤酵母中表达人碱性成纤维细胞生长因子(Human basic fibroblast growth factor,hbFGF),并对发酵条件进行优化。方法将hbFGF基因分别克隆至表达载体pCAMBIA1301和pPICZα上,构建重组表达质粒pCAMBIA1301-hbFGF和pPICZα-hbFGF。通过发根农杆菌介导,将pCAMBIA1301-hbFGF质粒转入大豆毛状根;采用电转化法将质粒pPICZα-hbFGF转入毕赤酵母X-33菌株,PCR法筛选阳性转化子,诱导表达。筛选高效稳定表达株,发酵培养并优化发酵条件,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物,并进行纯化。结果经酶切及测序证明两个重组表达质粒构建正确;经PCR鉴定证明hbFGF基因已整合入大豆毛状根及毕赤酵母基因组中;筛选出了在两种体系中发酵培养的最佳条件;hbFGF在大豆毛状根和毕赤酵母中的表达量分别占总蛋白的31%和42%,且均具有良好的反应原性;经纯化后,均可见相对分子质量约18000的单一条带。结论 hbFGF能够在大豆毛状根和毕赤酵母中高效表达,为其大规模工业化生产奠定了实验基础。
- 范伟全牟旭鹏韦安慧刘永刚张宏桂
- 关键词：毛状根毕赤酵母发酵
- 重组人β-淀粉样蛋白1-42大规模发酵及纯化工艺被引量：1
- 2009年
- 目的：在毕赤酵母（Pichia pastoris）中高效表达人β-淀粉样蛋白1-42（hAβ1-42），用80L的发酵罐大量制备hAβ1-42。方法：在成功构建表达载体pPICZα—hAβ1-42并电转化至毕赤酵母X-33的基础上，筛选高表达hAβ1-42工程菌，对发酵液的pH值、溶解氧、甲醇流加速度以及诱导表达的时间等发酵条件进行系统优化，通过阳离子交换层析和反向疏水层析对其进行纯化，实现其大规模制备。结果：筛选出的高表达工程菌采用80L发酵罐甲醇诱导补料批式发酵，在pH4．0、溶解氧浓度20％～30％、罐内压力为10psi、甲醇诱导48h时产量最高可达150mg·L^-1；纯化的hAβ1-42经SDS-PAGE分析显示单一区带，相对分子质量约为4200。结论：构建、筛选出高效表达hAβ1-42的毕赤酵母工程菌，并建立稳定的发酵和纯化制备工艺。
- 申茉函王全才刘佳伟韦安慧朱洁颜炜群
- 关键词：Β-淀粉样蛋白发酵提纯
