韩骅
- 作品数：294 被引量：812H指数：12
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学经济管理更多>>
- 正常小鼠主动脉瓣膜的组织形态学研究
- 2010年
- 目的:建立转基因小鼠主动脉瓣疾病模型的评估标准。方法:采用3月龄C57成年小鼠20只,分离小鼠心脏称重后固定,经HE染色、免疫荧光、激光共聚焦和Massoon染色后光镜观察及电镜观察,分别对瓣膜的细胞数量、分布、胶原含量及瓣膜超微结构进行组织形态学分析。结果:正常小鼠主动脉瓣的面积为(0.1978±0.003)mm2,周长为(9.18±0.06)×102μm,平均细胞数为(9.75±0.04)×102个/mm2,其中内皮细胞数为(3.23±0.10)×102个/mm2,间质细胞数为(5.05±0.07)×102个/mm2,胶原含量为(23.77±8.38)%。此外,通过激光共聚焦显微镜观察还发现,成体内皮下层存在一些共表达CD31及α-SMA的细胞,表明成体瓣膜仍保留具有上皮-间质转化潜能的细胞。电镜观察发现,瓣膜的心室面内皮与主动脉面内皮在形态上存在有很大的差异:心室面内皮呈扁平形与血流方向一致,主动脉面内皮呈方形与血流方向垂直。间质中成纤维细胞处于静止状态,其细胞胞体较小,呈长梭形,粗面内质网和高尔基复合体均不发达。细胞外基质胶原的含量丰富,主要集中于流出道。结论:本实验首次详细观测了小鼠主动脉瓣形态学特征,建立了正常小鼠主动脉瓣组织形态学研究的标准,为今后小鼠主动脉瓣疾病模型的研究提供重要的参考依据。
- 历志魏旭峰顾春虎康晓军王春梅韩骅易定华
- 关键词：主动脉瓣膜上皮-间质转化小鼠
- 小胶质细胞的培养及鉴定被引量：4
- 2011年
- 目的:获得高纯度培养原代小胶质细胞的方法并检测Notch信号通路相关分子在小胶质细胞的表达情况。方法:取胎鼠利用反复机械振摇纯化分离小胶质细胞;利用流式细胞仪,根据CD11b及MHCII的表达水平对分离的小胶质细胞纯度进行鉴定;利用qPCR及琼脂糖凝胶电泳检测小胶质细胞中Notch通路相关分子的表达情况。结果:利用5只胎鼠采取反复机械振摇的方法可较稳定的获得1.1×106个的小胶质细胞,流式细胞术结果显示细胞纯度高达97.77%,并在小胶质细胞中检测到Notch相关分子的表达。结论:利用胎鼠反复机械振摇法可以获得较高纯度及产量的小胶质细胞,小胶质细胞表达Notch信号通路。
- 刘洪翠郑敏化张丙芳都艳玲王晓明韩骅
- 关键词：小胶质细胞原代培养纯化NOTCH通路
- 大鼠β细胞素基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2004年
- 目的 :获得大量重组大鼠β细胞素 (BTC) ,为研究 β细胞素的功能及制备其抗体奠定基础 .方法 :利用PCR方法从大鼠肾组织扩增出 5 4 4bp的β细胞素基因片段并按读框克隆到原核表达载体 pET2 8a(+)上 ,得到重组质粒pET2 8a rBTC ,转化大肠杆菌BL 2 1(DE3)菌株 ,IPTG诱导 β细胞素蛋白表达 ,SDS PAGE和Westernblot检测 .结果 :经IPTG诱导后 ,有明显的目的蛋白表达 ,分子量符合 β细胞素 ;表达的蛋白主要以包涵体形式存在 ;表达量约占菌体蛋白总量的2 0 %～ 30 % ;目的蛋白与抗His标签抗体具有良好的反应原性 .结论 :大鼠 β细胞素基因的克隆与表达为进一步开展 β细胞素蛋白功能和胰腺干细胞的研究奠定了基础 .
- 安家泽宋振顺窦科峰李开宗韩骅
- 关键词：Β细胞素基因克隆基因表达
- 人治疗性抗体的研究进展被引量：4
- 2005年
- 冯蕾韩骅
- 关键词：单克隆抗体人源化人抗体
- 质量·财政·管理——浅议现代高校面临的新抉择被引量：2
- 2000年
- 韩骅
- 关键词：高等教育高校教学质量财政管理
- HCV胞膜蛋白E2基因的融合表达、纯化及多克隆抗体制备
- 2005年
- 目的原核表达HCV胞膜蛋白E2,获得抗E2多克隆抗体。方法利用PCR方法从HCV基因组序列中扩增出831bp(384～661aa)的E2基因片段并按读框克隆到原核表达载体pET32a(+),IPTG诱导HCVE2蛋白表达,SDS-PAGE和WesternBlot法检测蛋白表达,Ni-NTA偶联的琼脂糖吸附柱纯化融合蛋白,薄层扫描及Bradford法检测纯化蛋白的纯度>90%;用表达的E2蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,利用间接ELISA法检测抗体效价,WesternBlot法检测抗体特异性。结果用原核诱导表达出HCV胞膜蛋白E2免疫新西兰兔后获得多克隆抗体的效价在1∶1280以上,能特异性识别E2蛋白。结论成功构建HCVE2基因的原核表达载体,利用原核表达HCV胞膜蛋白E2制备的多克隆抗体能特异性识别E2蛋白。为进一步开展HCVE2蛋白功能和HCV受体的研究奠定了基础。
- 杜德伟孙脊峰杨洁贾战生秦鸿雁周永兴韩骅
- 关键词：肝炎病毒金属螯合亲和层析多克隆抗体
- 肿瘤干细胞的研究现状被引量：3
- 2005年
- 王林秦鸿雁韩骅
- 关键词：肿瘤干细胞血液系统肿瘤干细胞分化脑部肿瘤自我更新能力多向分化
- Notch信号途径及在神经发育中的作用
- Notch途径可能与多种人类疾病有关.在MMTV转基因小鼠中有较高频率的胸腺瘤发生,研究发现这与Notch受体的异常激活有关<'[12]>.最近有人根据多种细胞生物学和分子生物学资料提出EB病毒的EBNA2抗原是通过模拟...
- 韩骅王骊丽王冀姝李荣陈萍孙强周鹏
- 关键词：神经发育基因调控NOTCH基因分子生物学神经细胞分化
- 文献传递
- TATPTD-BCR/ABL SH3融合蛋白对白血病细胞系K562凋亡诱导作用被引量：9
- 2002年
- 目的 研究基因重组 HIV- 1反式激活蛋白 (TAT)的蛋白转导域 (PTD)与 BCR/ ABL SH3结构域融合蛋白 (PTD-BCR/ ABL SH3)导入白血病细胞株 (K5 6 2 )的细胞后对 K5 6 2细胞增殖、凋亡的影响 .方法 通过台盼蓝拒染法、流式细胞术、透射电镜 (TEM)、激光共聚焦显微镜 (CL SM)及凋亡细胞原位标记 (TU NEL)等方法 ,测定了 PTD- BCR/ ABL SH3融合蛋白作用于 K5 6 2细胞后细胞的增殖、形态学变化、细胞凋亡和细胞周期参数的改变 .结果 ≥ 5μmol· L- 1 的 PTD-BCR/ ABL SH3融合蛋白对 K5 6 2细胞生长有抑制作用 ,浓度越高 ,抑制作用越强 ;苔盼蓝拒染法、细胞形态学、电镜超微结构、TUNEL原位杂交和 FCM检测的观察证明 ,PTD- BCR/ABL SH3融合蛋白可引起 K5 6 2细胞的凋亡和坏死 ;FCM检测显示该融合蛋白可将细胞阻滞在 G2 / M期 .结论 PTD-BCR/ ABL SH3融合蛋白进入 K5 6 2细胞后可引起细胞凋亡和坏死 ,导致细胞增殖抑制 .这一结果可能为慢性粒细胞性白血病 (CML )
- 梁英民蒋姗姗韩骅刘利孙强陈任安吴绒丽杜鹃李巧蛾
- 关键词：蛋白转导域融合蛋白白血病凋亡
- 单克隆天然抗体3B4抑制白念珠菌芽管形成的机制初探
- 2007年
- 目的观察单克隆天然抗体3B4对白念珠菌芽管形成的影响,并进一步分析其结合于白念珠菌的部位及成分,探讨其发挥作用的机理。方法将纯化的单克隆抗体3B4与白念珠菌共孵育,计数形成芽管的数量。采用间接免疫荧光方法和流式细胞仪分析抗体3B4与白念珠菌结合的部位;将白念珠菌用蛋白酶K、氢氧化钠等分别处理后,观察3B4对其的结合情况,初步确定其结合成分。结果相对于同型对照,抗体3B4作用组白念珠菌芽管生成率显著下降并有统计学差异。流式细胞仪和间接免疫荧光检测均发现3B4可以与白念珠菌的芽管相结合,而与酵母相的结合很弱;蛋白酶K、氢氧化钠等处理后,3B4对芽管相和酵母相白念珠菌均不发生结合,提示抗体3B4结合的成分是主要表达于菌丝相的一种糖蛋白。结论单克隆天然抗体3B4可能通过与主要表达在芽管上的一种糖蛋白结合而抑制其芽管形成。
- 张欣苏雯静李巍安金刚刘斌韩骅刘玉峰
- 关键词：天然抗体白念珠菌芽管形成
