马智静
- 作品数：12 被引量：65H指数：2
- 供职机构：北京生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 流行性腮腺炎疫苗株S79全基因序列测定与分析被引量：2
- 2010年
- 目的 腮腺炎疫苗株S79工作种子噬斑纯化及全基因组测序,针对国内已经分离出的毒株,从分子生物学角度探讨疫苗保护力相关问题.方法 噬斑纯化S79疫苗株,利用RT-PCR分段扩增S79株两种亚株的全基因并测序,比较S79株与其来源株Jeryl Lynn（JL）核酸序列差异;从GenBank中获得WHO各基因型参考株和中国腮腺炎流行株疏水蛋白（SH）序列,分析病毒株和疫苗株遗传距离,并构建基因亲缘性关系树.结果 S79疫苗株由两种亚株构成,比例为2∶5（major∶minor）,获得全基因序列并递交GenBank;与相应的JL株相比,核苷酸序列同源性分别为99.7%和100%.亚株序列中存在散在区段异源重组.S79疫苗株为A基因型,中国的流行株为F基因型,遗传距离为11.2%～20.0%.结论 S79疫苗株由两种亚株构成,两亚株的全基因序列与JL株基本一致,但亚株的比例与国际上应用的其他JL疫苗株存在较大差异.疫苗株与中国流行株不属于同一基因型,遗传距离较远.S79疫苗免疫保护效果的差异可能主要与疫苗株和流行株不属于同一基因型有关.
- 张靖梁宇陈实于洁靳玉琴马智静张学峰卫江波李启明
- 关键词：腮腺炎病毒
- 一种重组多形汉逊酵母菌及其制备方法
- 本发明提供了一种重组多形汉逊酵母菌及其制备方法。本发明的重组多形汉逊酵母菌(Hansenula polymorpha)包含乙肝病毒的L蛋白的编码基因和S蛋白的编码基因。本发明的多形汉逊酵母菌与现有技术相比具有以下优点和积...
- 李启明张靖张学峰梁宇靳玉琴马智静陈实于洁
- 文献传递
- 重组诺如病毒GⅠ．1和GⅡ．4型类病毒颗粒免疫效果初步评价被引量：10
- 2016年
- 目的初步评价基于汉逊酵母表达系统的重组诺如病毒（norovirus，NoV）GⅠ.1和GⅡ.4型VP1蛋白类病毒颗粒（virus-like particles，VLPs）的免疫效果。方法将纯化后VLPs经SDS-PAGE和Western blot分析及鉴定，透射电镜观察颗粒形态，动态光散射仪分析颗粒粒径大小及分布情况。将GⅠ.1和GⅡ.4型VLPs按照不同的免疫方案免疫BALB/c小鼠，组织血清抗原（histo-blood group antigen，HBGA）-VLPs阻断试验检测50%阻断滴度（50% of blocking titer，BT50）。结果纯化后重组GⅠ.1和GⅡ.4型VP1蛋白纯度大于90%，Western blot分析可见特异性条带。VLPs直径为30～50 nm，界限清晰，颗粒直径与天然病毒颗粒接近，颗粒大小分布均一。免疫小鼠血清中佐剂组BT50明显高于无佐剂组。结论应用含铝佐剂的GⅠ.1和GⅡ.4型VP1 VLPs免疫小鼠，诱生了较好的HBGA阻断抗体，可作为诺如病毒疫苗的组分抗原。
- 马智静唐芳张学峰张靖侯俊伟陈实李启明
- 关键词：诺如病毒
- 人乳头瘤病毒类病毒颗粒的制备方法和外源蛋白表达盒、表达系统
- 本发明涉及一种人乳头瘤病毒类病毒颗粒的制备方法，该方法使人乳头瘤病毒的结构蛋白L1和L2在同一双缺陷型甲醇酵母菌表达系统中共表达，所述表达系统使用包含以下元件的外源蛋白表达盒：a)标记基因序列；b)源自甲醇酵母菌的启动子...
- 李启明张靖陈实靳玉琴马智静梁宇张学峰于洁卫江波沈心亮
- 文献传递
- 黏膜免疫佐剂与多糖结合疫苗的研究进展
- 2009年
- 机体95％以上的感染发生在黏膜或由黏膜入侵机体。目前对人类生命与健康危害极大和难以防治的重要传染病，多起源于黏膜表面。传统疫苗大多是采用肌肉或皮下注射等方式，与大多数病原的自然感染途径不同，在诱发全身免疫的同时，难以产生有效的黏膜局部免疫应答。而黏膜投递途径简单、安全，避免了注射疫苗所需的严格标准，有利于开展大规模人群的免疫接种^[1]。本文将结合本实验室从事黏膜投递型多糖一蛋白结合疫苗研究的一些体会，着重对黏膜免疫的特点、优势及最新进展和发展黏膜投递型多糖结合疫苗的可能性进行综述，为新型疫苗的研究提供参考。
- 马智静李启明
- 关键词：多糖结合疫苗人类生命皮下注射
- 一种重组多形汉逊酵母菌及其制备方法
- 本发明提供了一种重组多形汉逊酵母菌及其制备方法。本发明的重组多形汉逊酵母菌(Hansenula polymorpha)包含乙肝病毒的L蛋白的编码基因和S蛋白的编码基因。本发明的多形汉逊酵母菌与现有技术相比具有以下优点和积...
- 李启明张靖张学峰梁宇靳玉琴马智静陈实于洁
- 文献传递
- 多糖结合疫苗及其制备方法
- 本发明涉及一种多糖结合疫苗，包含细菌多糖与载体蛋白的化学偶联物，所述载体蛋白为细菌粘膜侵袭相关蛋白，如大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位、空肠弯曲菌鞭毛分泌蛋白A1、空肠弯曲菌鞭毛分泌蛋白A2、肺炎球菌表面蛋白、肺炎球菌表面黏...
- 李启明张学峰马智静唐玉龙张靖陈实靳玉琴卫江波
- 文献传递
- 肺炎球菌表面蛋白A的原核表达及其作为多糖结合疫苗载体的可行性
- 2011年
- 目的原核表达肺炎球菌表面蛋白A(Pneumococcal surface protein A,PspA),并探讨其作为多糖结合疫苗候选载体的可行性。方法合成PspA基因,定向克隆至pET-30a(+)载体,构建重组表达质粒pET-30a-rPspA,转化E.coli Sta(rDE3)菌株,IPTG诱导表达。表达产物经Ni离子亲和层析纯化后,经Western blot鉴定。取破伤风类毒素(Tetanus toxoid,TT)及纯化的rPspA,分别与A群脑膜炎球菌多糖(Group A meningococcal capsular polysaccharide,GAMP)通过溴化氰活化法进行偶联,获得rPspA-GAMP与TT-GAMP多糖蛋白结合物,对其进行纯化及检定。多糖结合物分别以滴鼻和肌肉注射途径免疫BALB/c小鼠,评价其诱发的体液免疫和黏膜免疫水平。结果重组表达质粒经双酶切及测序鉴定构建正确;表达产物主要以可溶形式存在,表达量约占菌体总蛋白的20%,经纯化后纯度可达90%,可与His单抗特异性结合;肌肉注射途径显示,两种蛋白载体的结合物均能诱发较高水平的体液免疫,不同载体间差异无统计学意义(P>0.05);滴鼻途径显示,载体蛋白rPspA的结合物刺激产生sIgA的能力优于传统载体TT,差异有统计学意义(P<0.05)。结论原核表达并纯化了rPspA,其具有新型多糖蛋白载体的潜力,也可作为黏膜投递型多糖结合疫苗的候选载体。
- 李启明唐玉龙张学峰靳玉琴马智静张靖
- 关键词：多糖结合疫苗
- 双蛋白载体A、C群脑膜炎球菌多糖结合物的免疫效果观察
- 2011年
- 目的 比较和评价在A、C群脑膜炎球菌多糖结合物中应用两种蛋白作为载体的免疫效果.方法 构建不耐热肠毒素B亚单位（LTB）的克隆载体和表达载体.确定rLTB主要为可溶性表达.应用一步阳离子交换层析对rLTB进行纯化,获得较纯的目的蛋白.利用GM1-ELISA和非变性SDS-PAGE的方法确定纯化后的rLTB能够形成具有生物学活性的五聚体.最后利用化学方法（ADH方法）将通过基因工程手段获得的重组LTB五聚体蛋白与C群脑膜炎球菌多糖（GCMP）耦联,获得多糖蛋白结合物GCMP-rLTB.以单一蛋白破伤风类毒素（TT）为载体的A＋C群脑膜炎球菌多糖蛋白结合物（GAMP-TT和GCMP-TT）及同时应用两种蛋白载体的A＋C群脑膜炎球菌多糖蛋白结合物（GAMP-TT和GCMP-rLTB）分别通过腹腔注射途径免疫小鼠.应用ELISA方法分别检测小鼠血清中IgG水平.结果 单独以TT为载体的A＋C群脑膜炎球菌多糖蛋白结合物（GAMP-TT和GC-MP-TT）和同时以两种蛋白作为载体的A＋C群脑膜炎球菌多糖蛋白结合物（GAMP-TT和GCMP-rLTB）通过注射途径免疫小鼠,后者产生的血清多糖特异性IgG水平显著高于前者.结论 双蛋白载体在改善A、C群脑膜炎球菌多糖结合物疫苗的免疫原性方面具有明显优势.
- 李启明马智静张靖靳玉琴陈实张学峰刘梅影
- 关键词：多糖结合疫苗
- DNA序列、重组载体、单和双营养缺陷型多形汉逊酵母菌、及其制备方法
- 本发明涉及一种双营养缺陷型酵母菌，所述酵母菌为多形汉逊酵母菌(Hansenula polymorpha)，该多形汉逊酵母菌的乳清酸苷-5-磷酸脱羧酶基因和β-异丙基苹果酸脱氢酶基因都被阻断。本发明还涉及该双营养缺陷型酵母...
- 李启明梁宇靳玉琴张靖陈实张学峰马智静于洁卫江波沈心亮
- 文献传递
