马辰
- 作品数：12 被引量：15H指数：3
- 供职机构：大连海洋大学更多>>
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- 三倍体泥鳅鳍细胞的体外培养方法
- 本发明公开了一种三倍体泥鳅鳍细胞的体外培养方法，按如下步骤进行：选择DMEM/F12培养基，并加入胎牛血清、人碱性成纤维细胞生长因子、I型胰岛素样生长因子、表皮生长因子和硫酸软骨素制备细胞培养液；在工作台上取三倍体泥鳅的...
- 李霞马辰李雅娟秦艳杰
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- 三倍体泥鳅鳍细胞的体外培养方法
- 本发明公开了一种三倍体泥鳅鳍细胞的体外培养方法，按如下步骤进行：选择DMEM/F12培养基，并加入胎牛血清、人碱性成纤维细胞生长因子、I型胰岛素样生长因子、表皮生长因子和硫酸软骨素制备细胞培养液；在工作台上取三倍体泥鳅的...
- 李霞马辰李雅娟秦艳杰
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- 四倍体泥鳅鳍细胞系TEMF及其建立方法
- 本发明提供一种四倍体泥鳅鳍细胞系TEMF及其建立方法。所述细胞系于2013年8月19日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：C2013111。所述四倍体泥鳅鳍细胞系TEMF支持鲤春病毒血症病毒的生长和...
- 李霞马辰秦艳杰李雅娟杨艳津
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- 三倍体泥鳅鳍细胞系TRMF及其建立方法
- 本发明提供一种三倍体泥鳅鳍细胞系TRMF及其建立方法。所述三倍体泥鳅鳍细胞系TRMF于2013年8月19日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为C2013110。所述三倍体泥鳅鳍细胞系具有对鲤春病毒血症病毒的易感性。所...
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- 四倍体泥鳅鳍细胞系TEMF及其建立方法
- 本发明提供一种四倍体泥鳅鳍细胞系TEMF及其建立方法。所述细胞系于2013年8月19日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC？No：C2013111。所述四倍体泥鳅鳍细胞系TEMF支持鲤春病毒血症病毒的生长和...
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- 不同倍性泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus）鳍细胞系的建立及特性分析
- 采用组织块培养法启动二倍体、三倍体和四倍体泥鳅鳍组织细胞原代培养，胰蛋白酶消化法传代，目前二倍体、三倍体和四倍体细胞已经分别传至84代、75代和68代。三种细胞均为成纤维细胞样细胞。鳍组织无菌处理方法是：先用质量浓度为1...
- 马辰
- 关键词：泥鳅细胞系多倍体生物学特性
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- 不同倍性泥鳅鳍细胞系的建立及生物学特性分析被引量：8
- 2014年
- 采用组织块培养法启动二倍体、三倍体和四倍体泥鳅鳍组织细胞原代培养,采用胰蛋白酶消化法传代,目前二倍体、三倍体和四倍体细胞已经分别传至59代、68代和68代。三种细胞均为成纤维细胞样细胞。鳍组织无菌处理方法是:先用质量浓度为10%的碘伏浸泡15min;后用青霉素和链霉素的混合液(500 IU/mL青霉素,500μg/mL链霉素)浸泡30min;原代培养和早期传代培养所用的培养基为DMEM/F12,添加体积分数为20%的胎牛血清、10 ng/mL人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、20 ng/mLI型胰岛素样生长因子(IGF-I)以及10μg/mL硫酸软骨素。30代以后所用培养基为20%FBS-DMEM/F12。细胞培养在25℃、5%CO2培养箱中。在此条件下,二倍体、三倍体和四倍体的倍增时间分别为48.43h、36.01h和41.45h;二倍体、三倍体和四倍体的特征染色体数目分别为50条、75条和100条;测定的二倍体、三倍体和四倍体细胞及核的体积比分别为1︰1.37︰2.37和1︰1.53︰1.97;细胞经液氮冷冻保存60d后,解冻复苏后测定存活率分别为(80.88±1.38)%、(84.48±1.13)%、(81.57±1.28)%。不同倍性的泥鳅细胞系的建立丰富了鱼类细胞系的种类,为揭示多倍体鱼类生长、遗传等机制打下基础。
- 李霞马辰秦艳杰李雅娟吴迪白丽雯刘博
- 关键词：泥鳅细胞系多倍体生物学特性
- 三倍体泥鳅鳍细胞系TRMF及其建立方法
- 本发明提供一种三倍体泥鳅鳍细胞系TRMF及其建立方法。所述三倍体泥鳅鳍细胞系TRMF于2013年8月19日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为C2013110。所述三倍体泥鳅鳍细胞系具有对鲤春病毒血症病毒的易感性。所...
- 李霞马辰秦艳杰李雅娟杨艳津
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- 不同倍性泥鳅鳍细胞培养及染色体标本制备方法的研究被引量：4
- 2013年
- 以天然二倍体、杂交三倍体(4n♀×2n♂)和天然四倍体泥鳅Misgurnus anguillicaudatus的鳍组织为材料,对短期培养的消毒方法、秋水仙素的浓度(1.0、1.5、2.0μg/mL)与处理时间(2、3、4 h)和低渗处理时间(30、40、50 min)等细胞培养技术,及染色体标本制备方法进行了研究。结果表明:选择100 g/L的碘伏溶液杀菌效果良好,对于细胞生长影响较小,尤以处理15 min时的效果最明显,细胞迁出迅速;在终止培养前3 h加入秋水仙素至终浓度为1.5μg/mL,天然二倍体、杂交三倍体和天然四倍体泥鳅鳍细胞中期分裂相染色体众数最高,分别为93.33%、90.00%、70.00%;25℃下低渗处理40 min时,可以获得大量图像清晰、长度适中、分散良好、染色体数目完整的染色体中期分裂相。本研究中初步建立了以鳍组织培养法作为材料来源快速制备不同倍性泥鳅染色体标本的方法。
- 刘博李雅娟李霞隋燚高养春王玉生马辰
- 关键词：泥鳅二倍体染色体
- 泥鳅鳍细胞系的构建及特性分析被引量：3
- 2014年
- 采用组织块培养法对泥鳅Misgurnus anguillicaudatus鳍组织细胞进行原代培养,并采用胰蛋白酶消化法传代,目前已传63代。原代培养和早期传代培养所用培养基为DMEM/F12,并添加体积分数为20%的胎牛血清(FBS)、10 ng/mL人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、20 ng/mLⅠ型胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)和10μg/mL硫酸软骨素。30代以后所用培养基为20%FBS-DMEM/F12,在CO2培养箱(5%,25℃)中培养,培养的鳍细胞形态为成纤维细胞样,群体倍增时间为56.85 h,特征染色体数目为50条;细胞经液氮冷冻保存30 d,解冻复苏后,存活率为81.31%±1.46%。病毒敏感性试验结果表明,泥鳅鳍细胞系对鲤春病毒血症病毒(SVCV)敏感,病毒滴度为105.62TCID50/mL,而对鱼类诺达病毒(YGNNV)不敏感。泥鳅鳍细胞系的建立丰富了鱼类细胞系的种类,并为泥鳅毒理学、病毒学的研究提供了科学依据。
- 马辰王福景李霞秦艳杰李雅娟
- 关键词：泥鳅生物学特性
