高金亮
- 作品数:51 被引量:92H指数:6
- 供职机构:鄂尔多斯市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 青海血蜱“隐藏”抗原肌球蛋白碱性轻链分子的克隆与分析
- 蜱叮咬动物和利用蜱研磨物免疫动物所产生的抗体之间有很大的差异。利用青海血蜱唾液腺蛋白免疫绵羊产生的抗体能与该蜱唾液腺蛋白中分子量为22kDa(P22)和37kDa(P37)的两个天然蛋白发生免疫反应,而蜱自然吸血刺激绵羊...
- 高金亮罗建勋樊瑞泉关贵全任巧云马米玲殷宏
- 关键词:青海血蜱
- 文献传递
- 边缘无浆体MSP5重组抗原间接ELISA检测方法的建立被引量:1
- 2008年
- 将边缘无浆体MSP5基因在大肠杆菌DH5α中表达,获得45 ku的融合蛋白。Western-blot检测证实该表达蛋白具有良好的生物学活性。以纯化的融合蛋白为抗原,建立了边缘无浆体MSP5的间接ELISA检测方法。该方法对边缘无浆体阴性、阳性血清(各100份)的阳性检出率和阴性符合率分别为100%和98%,与双芽巴贝虫、大巴贝虫、环形泰勒虫、瑟氏泰勒虫、衣原体、血吸虫和羊肝片吸虫的阳性血清无交叉反应,与羊无浆体阳性血清有交叉反应。结果表明,建立的间接ELISA方法具有良好的特异性和敏感性。
- 马米玲殷宏关贵全李有全高金亮刘志杰刘爱红刘军龙任巧云罗建勋
- 关键词:边缘无浆体间接ELISA
- 青海血蜱cDNA表达文库的构建和免疫原基因的筛选、克隆与表达
- 青海血蜱(Haemaphysalis qinghaiensis)及其传播的血液原虫病严重威胁着我国畜牧业的发展。目前对蜱的防治主要依靠化学药物,但随着蜱耐药性的产生以及环境污染和药物残留等严重公共卫生问题的出现迫使人们寻...
- 高金亮殷宏关贵全刘志杰党志胜马米玲刘爱红李文卉任巧云罗建勋
- 关键词:青海血蜱免疫学筛选
- 文献传递
- 四川省汶川县两种牛梨形虫的分离鉴定被引量:6
- 2006年
- 自四川省汶川县黄牛体表采集长角血蜱的饥饿或半饱血成虫,带回实验室感染除脾牛。血液涂片检查发现,感染后第10 d,病牛血液中出现一种大型巴贝虫,感染后第24 d,出现一种小杆形的泰勒虫。形态学观察和18 S rRNA基因测序和进化关系分析证明,它们分别为卵形巴贝虫与瑟氏泰勒虫。
- 刘爱红罗建勋殷宏关贵全马米玲党志胜刘志杰高金亮任巧云李有全刘军龙史耀旭樊瑞泉王凡白启
- 关键词:泰勒虫形态学RRNA基因
- 一种重组螺旋藻超氧化物歧化酶制备工艺
- 一种重组螺旋藻超氧化物歧化酶及其制备工艺,属于超氧化物歧化酶制备技术,克隆钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶的编码基因sod,构建原核表达载体pET30a-sod,并在大肠杆菌BL21(DE3)里表达重组SOD;建立重组菌的发酵罐...
- 高金亮王文杰姜晓杰
- 文献传递
- 用反向线状印迹方法检测和区别羊的泰勒虫和巴贝斯虫
- 根据已报道的梨形虫18S rRNA基因序列设计针对所有梨形虫虫体的通用引物RLB-F和RLB-R(5’端用生物素标记),PCR扩增泰勒虫属和巴贝斯虫属的18S rRNA高变区域,同时,在扩增片段内设计针对不同羊梨形虫种的...
- 牛庆丽关贵全马米玲刘志杰刘爱红高金亮任巧云李有全刘军龙罗建勋殷宏
- 文献传递
- 边缘无浆体MSP5蛋白基因的克隆及原核表达被引量:5
- 2007年
- 参照已发表的边缘无浆体主要表面蛋白5(MSP5)基因的核苷酸序列,设计了1对特异性引物,以边缘无浆体基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增获得了MSP5蛋白基因。将其克隆到pGEM-T Easy载体,并进行测序分析。结果表明,克隆的MSP5基因与GenBank上登录的Florida株MSP5蛋白基因的序列同源性达98.6%,编码氨基酸的同源性为99.0%,并且该序列包含有完整的开放阅读框,大小为633 bp。将该基因亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建了重组原核表达载体。将其转化到DH5α宿主菌中,用IPTG进行诱导表达,实现了融合表达,表达产物的分子质量为45 ku。Western-blot分析表明,此表达产物能够被抗边缘无浆体阳性血清所识别。
- 马米玲罗建勋殷宏关贵全李有全刘志杰高金亮刘爱红任巧云刘军龙赵海平王凡
- 关键词:边缘无浆体克隆原核表达
- 青海血蜱核糖体蛋白L23a基因克隆与分析
- 通过对青海血蜱cDNA表达文库进行筛选获得了一个阳性克隆(Hq22)。利用5′RACE技术克隆到了该阳性克隆的全长cDNA序列。BLASTN/P(NCBI)分析表明其编码产物为蜱的核糖体蛋白L23a(Rp123a)。RT...
- 高金亮罗建勋李有全樊瑞泉赵海平关贵全刘军龙殷宏
- 文献传递
- 微小牛蜱Bm86基因的克隆与原核表达被引量:8
- 2007年
- 根据已发表的Bm86基因序列,设计表达型引物,利用RT-PCR技术,从微小牛蜱饥饿幼蜱的研磨物中扩增Bm86基因,将PCR产物连入pGEM-T Easy载体,构建重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86.测序分析表明:克隆的微小牛蜱Bm86基因序列与GenBank上登录的Bm86基因的核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97%和95.6%.然后对重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86进行双酶切,获得带有粘性末端的Bm86基因片段,并将此片段定向亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-Bm86,将其转化到BL21宿主菌中,用IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE检测表明表达产物为分子量为88 Ku的融合蛋白,目的蛋白约占蛋白总量的39%,表达量约为1.08 mg/mL.Western blot分析表明此表达产物能被兔抗微小牛蜱阳性血清所识别.
- 樊瑞泉罗建勋杨孝朴殷宏高金亮关贵全刘志杰党志胜马米玲任巧云刘爱红
- 关键词:微小牛蜱克隆
- 吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫内转录间隔区基因序列的测定与系统进化分析被引量:2
- 2008年
- 自试验感染吕氏泰勒虫(渭源株)和尤氏泰勒虫(隆德株)绵羊的血液中纯化虫体,提取虫体基因组DNA,通过PCR扩增内转录间隔区(ITS1-5.8S-ITS2 rRNA)基因,然后进行测序,构建了系统发生树并与GenBank中各种动物梨形虫的ITS1-5.8S-ITS2 rRNA基因序列进行比较。结果显示,这两种泰勒虫的ITS1-5.8S-ITS2 rRNA基因大小为817-842bp,同源性高达96.8%,分布在同一大枝上。通过比较ITS基因的同源性,尤其是ITS2基因的变异性,可以区别这两种泰勒虫与其他梨形虫。
- 牛庆丽邱家祥关贵全马米玲刘志杰党志胜刘爱红高金亮任巧云李有全刘军龙白启罗建勋殷宏
- 关键词:系统进化分析