鲍春雨
- 作品数：8 被引量：17H指数：2
- 供职机构：大连理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 参术抗白血病细胞作用的研究被引量：2
- 2004年
- 目的 :探讨参术对白血病细胞有无杀伤或诱导凋亡及分化作用 ,从细胞和分子水平探讨其作用机理 ,为寻找一种选择性杀伤白血病细胞、高效低毒的诱导凋亡及分化的中药方剂提供实验依据。方法 :a.通过MTT试验、台盼蓝拒染检测活细胞数 ,观察不同浓度参术作用后 HL-60细胞增殖的改变 ;b.通过细胞形态学、流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳进行细胞凋亡的检测和观察 ;c.以药物维甲酸为阳性对照组 ,采用6.2 5 mg/m L浓度参术作用 HL-60细胞 72 h,通过细胞形态学观察、硝基四氮唑蓝 ( NBT)还原实验、细胞吞墨实验来观察参术作用后 HL-60细胞分化情况。结果 :a.在 6.2 5～ 5 0 mg/m L浓度范围内 ,参术对 HL-60细胞的增殖有抑制作用并呈剂量、时间依赖关系 ,半数抑制浓度约为 2 5 .0 mg/m L;b.典型的细胞形态学改变、DNA琼脂糖凝胶电泳条形梯带的出现和流式细胞仪检测亚 G1 峰的检出等证实参术能诱导白血病细胞凋亡 ;c.NBT还原实验和细胞吞墨实验 :在参术 (浓度为 6.2 5 mg/m L)作用 72 h后 ,NBT阳性反应率和细胞吞墨率分别为5 0 .8%和 5 6.0 % ,明显高于对照组 (分别为 7.8%和 8.0 % ) P <0 .0 5。全反式维甲酸 ( 1 0 - 6 mol/L)作用组 NBT阳性反应率和细胞吞墨率分别为 5 5 .3 %和 69.0 % ,稍高于参术作用组 ,但无?
- 高大宋振岚鲍春雨
- 关键词：HL-60细胞系细胞凋亡细胞分化参术
- 一种使用同一份脐带血的血清来收获干细胞的方法
- 本发明公开了一种使用同一份脐带血的血清来收获干细胞的方法，属于生物技术与组织工程领域。用同一份脐带血的血清代替胎牛血清、不添加细胞因子及无基质细胞支持，采用微载体与生物反应器相结合的策略，实现脐带血来源造血干细胞与间充质...
- 刘天庆殷轶群关水鲍春雨葛丹李香琴崔占峰马学虎
- 文献传递
- 脐血造血干/祖细胞体外扩增及无血清培养的实验研究
- 目的:作为造血干细胞的新来源,脐血以其独特的优势已广泛应用于移植治疗、生物免疫治疗、基因治疗等领域.但由于单份脐血的采集量低,不足以满足成人移植的需要,长期以来,研究者们一直在探索脐血干/祖细胞的有效分离、扩增的方法.该...
- 鲍春雨
- 关键词：扩增无血清培养基
- 文献传递
- 应用搅拌式生物反应器大量扩增人胎盘间充质干细胞的实验研究被引量：2
- 2009年
- 探讨应用搅拌式生物反应器培养技术体外扩增人胎盘间充质干细胞(hPDMCs)的方法。以hPDMCs为种子细胞,利用微载体悬浮法在搅拌式生物反应器内进行体外培养,同时设置静态培养的培养瓶为对照组,观察细胞的扩增速率、细胞代谢(乳酸、葡萄糖、培养液的pH值)的变化,检测生物反应器培养前、后干细胞的表面标记物。hPDMCs在搅拌式生物反应器内每代可以扩增(10.55±1.62)倍,明显高于对照组(6.10±0.11)倍的扩增值(P<0.05),且细胞生长代谢指标优于对照组;流式细胞仪检测应用搅拌式生物反应器,培养后细胞表面标记物的表达率无明显改变(P>0.05)。搅拌式生物反应器能够提供良好的细胞生长环境,建立用于hPDMCs的大量扩增的体外三维培养体系。
- 于艳秋任海琴李昆鲍春雨刘天庆金玉楠云伟董博
- 关键词：间充质干细胞生物反应器细胞扩增人胎盘
- 旋转壁式生物反应器中微囊化骨髓间充质干细胞支持造血干/祖细胞的体外扩增被引量：10
- 2008年
- 为了构建一种新型的造血干细胞和基质细胞动态共培养体系,脐带血单个核细胞和包埋有兔骨髓间充质干细胞的海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠(alginate-chitosan-alginate,ACA)微胶囊在旋转壁式生物反应器(rotating wall vessel,RWV)中进行了7d动态悬浮共培养。培养液不含血清,补充多种生长因子(SCF50ng·mL-1,FL50ng·mL-1,TPO50ng·mL-1及IL-325ng·mL-1)。每24h进行总有核细胞计数,并测量培养液的pH和渗透压,在0h、72h和168h进行流式CD34+细胞分析以及集落形成能力检验。结果表明在RWV动态共培养过程中,培养液的pH保持在7.2~7.4,渗透压保持在280~310mmOsmol·kg-1,均适合造血干/祖细胞的体外扩增。经过7d的无血清动态共培养,总有核细胞、CD34+细胞以及混合集落(colony-formingunitsinculture,CFU-Cs)分别扩增了107.05±6.08,26.52±1.5和19.2±3.18倍。这种新型的动态微囊化共培养体系支持了造血干/祖细胞的大规模体外扩增,基质细胞抑制了造血干/祖细...
- 刘洋刘天庆范秀波刘铭彦赵国锋鲍春雨马学虎崔占峰
- 关键词：间充质干细胞
- 微囊化基质细胞对脐带血造血干/祖细胞扩增支持被引量：1
- 2010年
- 将脐带血单个核细胞与包埋有兔骨髓间充质干细胞的海藻酸钙微胶珠在3种不同的培养液中进行了7d的体外静态共培养.每24h进行总有核细胞计数,在0、72和168h进行流式CD34+细胞分析以及甲基纤维素集落检验.实验结果表明:经过7d的静态共培养,在添加常规剂量造血生长因子的培养液中,总有核细胞扩增了(15±2.85)倍,CD34+细胞扩增了(5.33±0.32)倍,CFU-Cs扩增了(5.6±1.21)倍.微胶囊可以作为一种新的共培养隔离手段,微囊化兔骨髓间充质干细胞在添加适量血清或者造血生长因子组合的条件下对于脐带血造血干/祖细胞在静态下的扩增有明显的促进作用.
- 刘洋刘天庆范秀波鲍春雨马学虎崔占峰
- 关键词：间充质干细胞
- 人体吸脂源干细胞与脂肪细胞共培养的研究被引量：1
- 2010年
- 通过共培养人脂肪干细胞(hADSCs)与脂肪细胞来诱导hADSCs成脂分化。将hADSCs和脂肪细胞分别采用1:5、1:1、2:1和5:1共4个比例,在Transwell中进行共培养。共培养8d后,用油红O和台盼蓝对共培养后的hADSCs进行染色,显微镜下观察细胞形态及其成脂分化情况。此外,将共培养时间延长至20d,进行油红O和台盼蓝染色、流式细胞仪分析及hoechst33342/PI死活染色以检测其成脂分化情况。实验结果表明:油红O和台盼蓝染色结果显示共培养8dhADSCs具有较高活性,但并不能成脂分化;而油红O和台盼蓝染色及hoechst33342/PI死活染色结果显示共培养20d后,hADSCs亦具有高活性但仍不能成脂分化;然而流式细胞仪分析结果表明,共培养20d后hADSCs的CD105表达有所减弱。研究结果表明:hADSCs与脂肪细胞共培养尚不能促使hADSCs成脂分化。
- 宋克东郭文华刘天庆宁睿明鲍春雨马学虎
- 关键词：脂肪细胞脂肪干细胞共培养成脂分化
- 造血干/祖细胞的体外扩增培养研究被引量：2
- 2007年
- 利用旋转壁式生物反应器（Rotating wall vessel，RWV）体外培养脐带血干细胞，使其大量扩增。以满足临床应用对造血干／祖细胞的数量与质量要求。从脐带血分离得到的单个核细胞（Mononuclear cells,MNC）在T—flask中培养24h，之后接种到RWV反应器中。培养200h。每24h细胞计数，测量培养基的pH和渗透压变化；在144h和197h测CD34^＋细胞含量并做CFU—GM半固体培养。有核细胞（Nucleated cells，NC）与CD34^＋细胞在第197h，分别扩增了435．5±87．6倍和32．7±15．6倍，CFU—GM（Colony—forming unit—granuloeyte／maerophage）细胞扩增了21．7±4．9倍。整个培养过程中。RWV反应器中的pH和渗透压都保持在造血细胞最佳的扩增条件内，pH基本保持在7．2～7．4之间，渗透压基本保持在290-310mmol／kg之间。由于旋转壁式生物反应器（RWV）结构上的特殊性，可以保证细胞在悬浮流动的状态下生长，很好地模拟了脐带中的造血微环境。使脐带血造血干细胞在该反应器中短期内得到大量扩增。
- 范秀波鲍春雨刘洋刘天庆孙相玉葛丹马学虎
- 关键词：脐带血体外扩增
