黄元铭
- 作品数：28 被引量：22H指数：3
- 供职机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项中国中医科学院自主选题项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学农业科学更多>>
- 甲型流感病毒H1N1感染致小鼠肠道损伤机制的研究
- 2023年
- 目的观察甲型流感病毒H1N1感染小鼠的一般状态、肺组织病理、肠组织病理、结肠转录组、肠内容物代谢组的变化,探究甲型流感病毒H1N1感染致小鼠肠道损伤的机制。方法用流感病毒PR8感染C57BL/6J小鼠,留取感染后第7天肺组织、结肠组织和盲肠内容物,计算肺指数,测量结肠长度,采用苏木素–伊红染色观察肺、肠组织病理,RNA-seq法进行结肠转录组测序,非靶向代谢组学检测盲肠内容物。结果感染模型组小鼠较空白对照组小鼠体质量减轻、活动减少,肺指数增加,结肠长度缩短,肺、结肠组织病理出现损伤。空白对照组和感染模型组小鼠共有1609个差异基因,437个差异代谢物,这些差异基因和差异代谢物共同富集到的通路包括花生四烯酸代谢通路和色氨酸代谢通路。结论甲型流感病毒感染可能通过改变小鼠结肠内基因表达水平和盲肠内的代谢产物造成小鼠肠道损伤。
- 李金桐晏军任志鸿宋利琼肖玉春黄元铭班承钧
- 关键词：甲型流感病毒肺损伤结肠损伤转录组学代谢组学
- 水苏糖和清酒乳杆菌联合使用对慢传输型便秘的缓解效果及机制研究
- 目的为筛选研发可改善便秘的合生元,利用复方地芬诺酯建立小鼠慢传输型便秘(STC)模型,筛选出一株具有通便效果的清酒乳杆菌furu2019(L.sakeifuru2019),并将其与益生元水苏糖(Stachyose,ST)...
- 郭雅南黄元铭李先平宋利琼肖玉春王治寰任志鸿
- 关键词：慢传输型便秘水苏糖清酒乳杆菌肠道菌群
- 清酒乳杆菌和水苏糖组合物在制备便秘治疗药物中的应用
- 本发明公开了一种乳酸杆菌益生菌菌株，所述菌株的保藏号为CGMCC NO.22254，保藏日期为2021年4月28日，保藏分类命名为Lactobacillus sakei（清酒乳杆菌），保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员...
- 任志鸿宋利琼肖玉春黄元铭
- 多氏拟杆菌益生菌及在制备流感治疗或预防药物中的应用
- 本发明公开了一株益生菌候选菌株，所述菌株的保藏号为CGMCCNO.21251，保藏日期为2020年11月26日，保藏分类命名为Bacteroides doreiXR2020(多氏拟杆菌XR2020，B.dorei XR2...
- 徐建国任志鸿卢珊宋利琼肖玉春李先平黄元铭
- 文献传递
- 高危型HPV-16E6在小鼠骨髓源性树突细胞的表达
- 2013年
- 目的探讨高危型HPV-16E6在树突细胞中的定位。方法构建真核表达载体pGFP-16E6,转染小鼠骨髓源性的树突细胞,在荧光显微镜下动态观察高危型HPV-16E6蛋白在树突细胞内的定位和表达水平。结果树突细胞在分别转染pGFP-16E6和pEGFP-C1质粒后,GFP-16E6主要定位于细胞核内,而对照组的只表达GFP的蛋白则均匀分布于树突细胞。蛋白表达水平的检测表明,在转染树突细胞后的12h,GFP-16E6和GFP蛋白开始表达(荧光强度分别为31.29,39.52),转染后至24h,蛋白表达均到达高峰(荧光强度分别为119.37,134.23),24h后,蛋白表达逐渐降低。结论 HPV-16E6主要定位于树突细胞核内,随时间其蛋白表达水平不同,这为HPV E6的树突细胞疫苗发挥有效的抗癌作用提供理论依据。
- 王淑京黄元铭温晓婷孙丽娜
- 关键词：GFP
- 河弧菌AL536_RS29525基因功能研究
- 2021年
- 目的探讨河弧菌基因组中VflT6SS2核心基因簇上游paar基因簇中AL536_RS29525的序列特征、对VflT6SS2分泌功能和杀菌活性的影响以及可能的调控机制。方法利用Muscle、GeneDoc软件进行AL536_RS29525基因编码产物的序列特征分析;同源重组技术构建AL536_RS29525的缺失株,PCR扩增AL536_RS29525编码序列克隆于pSRKTc获得回补质粒pSR-29525,继而导入ΔAL536_RS29525得到回补株;Western Blot(WB)检测相应菌株中VflT6SS2 Hcp蛋白的表达和分泌,以大肠埃希菌为prey的细菌竞争/杀菌实验检测VflT6SS2介导的菌株杀菌能力;基于Lux报告基因的启动子融合系统冷光检测确定AL536_RS29525缺失对VflT6SS2核心基因簇启动子和hcp启动子活性的影响;荧光定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测hcp(tssD2)和vipA(tssB2)mRNA的相对表达水平。结果AL536_RS29525同源基因编码蛋白的结构和功能较为保守;缺失AL536_RS29525负性影响VflT6SS2 Hcp蛋白的表达及分泌,降低VflT6SS2介导的菌株杀菌能力,回补AL536_RS29525可恢复缺失株Hcp的表达、分泌和杀菌能力;缺失株ΔAL536_RS29525中hcp(tssD2)和vipA(tssB2)的mRNA表达量均低于野生株;而VflT6SS2的核心基因簇启动子和hcp启动子活性在ΔAL536_RS29525缺失株和野生株之间无显著差异。结论河弧菌AL536_RS29525基因较为保守,与霍乱弧菌以及弗尼斯弧菌的同源基因均具有较高的同源性。AL536_RS29525基因是河弧菌VflT6SS2的重要组成部分,为其Hcp效应子的正常表达、分泌功能以及VflT6SS2介导的杀菌活性所必需。AL536_RS29525可能转录后水平影响VflT6SS2的功能表达。
- 张安冉刘笑舒黄元铭韩雨刘平李杰阚飙梁未丽
- 关键词：河弧菌HCP
- 重组表达的猪溶素及其突变体诱导小鼠巨噬细胞的细胞毒性和IL-1β释放被引量：1
- 2014年
- 目的观察猪溶素（Suilysin，SLY）及其无溶血活性的突变体诱导小鼠腹腔巨噬细胞（peritoneal macrophage，PM）释放IL-1β和细胞毒的差异，为进一步研究SLY诱导炎性体激活通路奠定基础。方法重组表达纯化SLY及第353氨基酸位点突变体rSLY^353L，体外和小鼠PM相互作用，用乳酸脱氢酶释放法检测细胞毒作用，用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测IL-1β的水平。结果不同浓度rSLY（0．1～10μg）诱导小鼠PM细胞毒性呈现明显的剂量效应，rSLY（1μ/ml）诱导产生750pg／ml的IL-1β同时细胞毒〈20％；rSLY（5μg/ml）可引起最大量的IL-1μ释放但细胞毒高达90％。相同剂量的rSLY^353L不能诱导可检测到的IL—1β和细胞毒性。rSLY与PM共孵育20hIL-1β产量最高，20h后IL—1β产量下降但细胞毒性随孵育时间延长而增大。结论1μ/ml SLY和PM作用20h可诱导较高的IL-1β产生同时细胞毒性较低，该实验条件适用于进一步进行SLY激活PM炎性体信号通路的机制研究。
- 任志鸿黄元铭王淑京杜华茂宋利琼
- 关键词：炎症因子细胞毒性
- 姜黄素抑制猪链球菌诱导的炎症反应的体外研究被引量：3
- 2014年
- 目的观察姜黄素对猪链球菌诱导的小鼠脾细胞促炎性细胞因子的影响,探讨姜黄素对猪链球菌引起的急性中毒性休克的干预作用。方法采用乳酸脱氢酶释放法检测猪链球菌和姜黄素的细胞毒作用,酶联免疫吸附试验和流式细胞术检测相关炎症因子。结果所选剂量猪链球菌和姜黄素均未发现明显细胞毒作用。猪链球菌诱导脾细胞产生了促炎性细胞因子IL-6、TNF-α、IL-12和较高剂量的IFN-γ以及少量的IL-1β,同时也产生了抗炎因子IL-10。姜黄素对促炎因子都有抑制作用同时降低了促炎因子与抗炎因子的比例。结论姜黄素能够降低猪链球菌诱导小鼠脾细胞产生的促炎因子而发挥抗炎作用。
- 温晓婷黄元铭王智昊韩存芝
- 关键词：猪链球菌姜黄素中毒性休克细胞因子
- 肠出血性大肠埃希菌感染人巨噬细胞产生白介素-1β水平的研究
- 2013年
- 目的通过构建EHEC O157∶H7野生株和突变株等不同菌株,来感染THP-1细胞,从而比较以上不同菌株的细胞毒和IL-1β等细胞因子的产生水平,同时比较使用有无胎牛血清(FBS)培养的THP-1对产生细胞因子水平的影响。方法将上述各菌株分别定量稀释于RPMI1640,5%FBS的细胞培养液中,在感染后2～10 h,用cytotox96试剂盒定量检测乳酸脱氢酶(LDH)的释放。同时用Luminex和酶联免疫吸附试验试剂盒定量检测多种细胞因子的水平。结果 EHEC-O157∶H7-ehxA是THP-1细胞毒作用的主要贡献者,并可引起高水平IL-1β的产生;在OPT1-MEM无血清培养基中,野生型菌株和突变型之间IL-1β的产生差异则更加显著。结论 EHEC-O157∶H7-ehxA可诱导高水平IL-1β的产生,FBS能刺激细胞产生一定非特异性的IL-1β,这可能会导致高的背景和隐藏细胞株之间的真正差别。
- 王淑京程喻力熊衍文张晓嫒黄元铭任志鸿宋利琼
- 关键词：肠出血性大肠埃希菌人巨噬细胞白介素-1Β
- 基于转录组测序技术分析中医三阳合治法减轻流感病毒致小鼠结肠损伤的作用机制
- 2023年
- 目的应用转录组测序技术研究麻杏石甘汤合小柴胡汤(以下称"三阳合治")减轻流感病毒感染小鼠结肠损伤的作用机制。方法甲型流感病毒H1N1滴鼻诱导流感病毒致小鼠结肠损伤模型。小鼠分为空白组、模型组和三阳合治组,每组10只小鼠。模型组、三阳合治组分别以PBS、麻杏石甘汤合小柴胡汤灌胃,7天后取各组小鼠结肠组织,观察结肠长度及结肠病理损伤情况,并进行转录组测序,筛选三阳合治组与模型组显著差异基因进行GO、KEGG和GSEA分析。结果三阳合治干预后显著改善了小鼠的结肠长度,减轻了结肠病理损伤。三阳合治组与模型组有92个显著差异表达基因,GO分析提示差异基因富集于细胞因子和趋化因子产生的调节、炎症应答、防御反应、免疫反应、NIK/NF-κB信号的调节以及MAPK级联等生物过程,以及刷状缘膜、刷状缘、微绒毛等与肠道屏障相关的细胞组分。KEGG分析提示差异基因富集于Toll样受体信号通路、产生IgA的肠道免疫网络、补体和凝血级联以及PPAR信号通路等。GSEA分析提示产生IgA的肠道免疫网络、PPAR信号通路以及丙酸代谢和丁酸盐代谢等在三阳合治干预后显著上调,而凋亡和MAPK信号通路在三阳合治干预后显著下调。结论三阳合治法主要通过免疫、炎症、代谢等发挥对流感病毒感染小鼠的肠道保护作用。
- 张亚楠晏军宋利琼黄元铭刘畅刘国星李金桐张悦王明哲翟志光王成祥张立山班承钧许文波程淼
- 关键词：流感病毒转录组测序结肠损伤
