黄巍巍
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中国医科大学口腔医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 颌下腺细胞与丝素-壳聚糖在体内复合培养的动物实验
- 2011年
- 目的探讨在丝素一壳聚糖（silk fibroin-chitosan，SFCS）支架上接种颌下腺细胞后，在大鼠体内构建组织工程化颌下腺的可行性及生物学特性。方法将36只8周龄SD大鼠分成实验组和对照组，每组各18只。取1～3d龄sD大鼠颌下腺原代细胞培养、传代、细胞来源鉴定后，将第二代细胞标记5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷（5’-BrdU），制备成5×10’个／L的颌下腺细胞悬液，将其接种于5mm×5mm×5mm的SFCS上，体外培养1周后将细胞一支架复合物植入实验组，将单纯SFCS支架植入对照组，分别于3、7、14d处死大鼠后取材，进行大体、组织学、免疫组织化学及扫描电镜观察。结果大体观察：植人物表面被膜覆盖，周围组织反应较轻。组织学观察：随着培养时间延长细胞数逐渐增多，细胞黏附于材料表面或分散在支架内，聚集成集落、呈岛状排列，分泌粉染的细胞外基质。BrdU免疫组织化学观察：术后3个时间点均存在阳性细胞。细胞角蛋白8（cytokeratin 8，CK-8）免疫组织化学观察：术后3个时间点均存在阳性细胞，随时间延长数目逐渐增多。扫描电镜观察：SFCS呈网状结构，植入初期的颌下腺细胞呈圆形、表面光滑、散在的黏附于SFCS表面或网孔内；随时间延长，颌下腺细胞表面凹凸不平，细胞数目增多，黏附于材料表面并伸出突起，细胞间相互接触。结论利用SFCS支架接种颌下腺细胞后，可在体内构建组织T程化涎腺样结构，为进一步进行组织工程化颌下腺的研究奠定理论基础。
- 黄巍巍谭学新李波王哲李欣宇马丽
- 关键词：颌下腺丝素壳聚糖
- 丝素-壳聚糖共混膜与颌下腺细胞体外复合培养的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨丝素-壳聚糖共混膜(silkfibroin-chitosan blend,SFCS)与颌下腺细胞体外复合培养的可行性。方法体外原代培养SD大鼠颌下腺细胞(Rat submandibular gland cells RSMG-cell)并传代,将浓度为2.0×104个/ml的第2代颌下腺细胞接种于5mm×5mm×2mm丝素-壳聚糖共混膜上体外复合培养。观察颌下腺细胞附着率和增殖情况,扫描电镜观察细胞超微结构,分别取复合培养1～10d的培养上清液,测定淀粉酶含量。结果颌下腺细胞24h附着率大于90%,生长、增殖情况良好。扫描电镜下可见复合培养7d的颌下腺细胞在丝素-壳聚糖共混膜上伸展充分,表面有许多分泌颗粒。随着复合培养时间的延长,细胞上清液中淀粉酶含量有不同程度的增加。结论颌下腺细胞与丝素-壳聚糖共混膜复合培养,颌下腺细胞附着、增殖能力及分泌功能良好,丝素-壳聚糖共混膜可以作为颌下腺组织工程的支架材料进行进一步的研究。
- 王哲谭学新黄巍巍马丽李欣宇
- 关键词：颌下腺细胞
- 颌下腺细胞-丝素-壳聚糖复合体的体内实验研究
- 目的：
探讨丝素-壳聚糖(silk fibroin-chitosan,SFCS)为支架,接种颌下腺细胞后,于SD大鼠体内构建组织工程化颌下腺的可行性及生物学特征。
方法：
取1～3dSD大鼠颌下腺,原代...
- 黄巍巍
- 关键词：颌下腺丝素壳聚糖
- 文献传递
- 组织块法培养大鼠颌下腺细胞的实验研究被引量：9
- 2010年
- 目的探讨组织块法培养大鼠颌下腺细胞(RSGC)的方法与细胞生长的特点。方法采用组织块法培养RSGC,使用酶消化法和差速贴壁法进行细胞纯化,免疫组织化学SABC方法进行细胞角蛋白-8免疫组化染色,进行细胞来源鉴定。倒置显微镜下进行形态学观察,取第2代RSGC,FDA-PI双色荧光法检测细胞活力,MTT法绘制生长曲线。结果细胞角蛋白-8染色阳性。倒置显微镜下,细胞主要呈3种形态,为圆形亮细胞、多角形暗细胞、梭形暗细胞。细胞活力>95%,生长曲线表示细胞5d开始进入对数生长期。结论此方法简便,易操作,获得了大量的RSGC,为颌下腺细胞作为种子细胞的颌下腺组织工程研究提供了实验基础和理论依据。
- 黄巍巍谭学新李波王哲李欣宇马丽黄丹丹
- 关键词：颌下腺细胞酶消化法差速贴壁法
