黄长晖
- 作品数：33 被引量：55H指数：5
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- P48L和D74N突变影响P16基因功能
- 1998年
- 应用PCR技术，对P16抑癌基因（CDKN2）进行体外定点突变．在P16cDNA中引入第48位密码子CCG（Pro）→CTG（Leu）和第74位密码子GAC（Asp）→AAC（Asn）突变，构建了p16－P48L和p16－D74N突变体，并把它们导入纯合缺失P16基因的人肺癌细胞株H460．经RNA点杂交、Northern印迹、Western印迹和细胞免疫化学染色，检测到P16表达．通过比较表达野生型和突变型P16的H460细胞在3H－TdR掺入及细胞所处周期的差异，证实P16表达抑制细胞进入S期，而P48L和D74N突变体对细胞进入S期没有影响．为了确证P48L和D74N突变体丧失抑制细胞增殖的功能是因为与CDK4结合功能下降，将野生型和突变型P16cDNA克隆于酵母表达载体plexA，用酵母双杂交筛选实验研究野生型和突变型p16蛋白与CDK4的结合．结果野生型P16和CDK4在酵母中表达并相互作用．而突变型P16cDNA和CDK4在酵母中相互作用受到影响．说明P48L和D74N突变影响了p16蛋白与CDK4的结合，从而影响了其调控细胞周期的功能．
- 黄长晖傅继梁
- 关键词：P16基因肿瘤抑制基因
- NADH-细胞色素b_5还原酶研究进展
- 1992年
- NADH-细胞色素b_5还原酶是红细胞内还原高铁血红蛋白的主要酶。该酶含FAD 基团,以NADH 为辅酶,生理性底物为细胞色素b_5,体外可利用二氯酚靛酚、高铁氰化钾等为电子递体.该酶具有膜结合性和可溶性两种形式,膜结合性较可溶性酶N 末端多了一个由25个氨基酸组成的疏水区。两种形式的酶分子量分别为36000Dal 和32000Dal,由同一基因编码。基因位干22号染色体,长31kb,有9个外显子,8个内含子。该酶缺陷导致遗传性高铁血红蛋白血症,现有的研究表明酶缺陷是基因位点突变的结果,目前对酶缺陷的实验室诊断巴从单纯检测酶活力,发展到用免疫学方法检测酶蛋白含量,直至用基因诊断技术检测酶基因的突变位点.
- 黄长晖朱忠勇
- 关键词：NADH细胞色素B5还原酶
- 细胞色素b5还原酶缺陷的分子生物学研究最新进展被引量：4
- 1997年
- 遗传性高铁血红蛋白血症主要由NADH-细胞色素b5还原酶(Cytb5R)缺陷引起。膜结合型和胞浆可溶型cytb5R由定位于22号染色体的同一基因编码。多种突变类型可导致该基因编码有缺陷的酶蛋白。本文就目前有关NADH-细胞色素b5还原酶蛋白特性与基因结构特点,基因突变与酶缺陷机制,以及可能建立的基因诊断方法等研究现状作一综述。
- 吴玉水黄长晖朱忠勇
- 关键词：血红蛋白病高铁血红蛋白分子生物学
- P16基因的cDNA克隆和功能研究
- 黄长晖
- 关键词：肿瘤抑制基因P16基因克隆
- 从DNA修复机理看细胞癌变的发生机制被引量：4
- 1996年
- ＤＮＡ损伤是引起基因突变，导致细胞恶性转化的重要原因．ＤＮＡ损伤的修复过程非常复杂，是与细胞周期调节、ＤＮＡ复制和ＤＮＡ转录等生命活动紧密相连的．首先ＤＮＡ修复需要细胞周期停滞，避免ＤＮＡ损伤进入子代细胞．其次，参与ＤＮＡ转录的某些基因产物参与ＤＮＡ损伤的识别，有利于转录链的优先修复．最后，ＤＮＡ修复系统ＮＥＲ、ＭＭＲ参与损伤修复．上述ＤＮＡ修复过程任何环节的异常，都将造成ＤＮＡ修复功能减弱，导致某些功能基因突变，从而导致细胞的恶性转化．
- 黄长晖傅继梁
- 关键词：肿瘤细胞癌DNA修复病理
- 中国人遗传性高铁血红蛋白血症NADH-细胞色素b5还原酶基因L72P突变被引量：7
- 1998年
- 目的：鉴定导致中国人遗传性高铁血红蛋白血症（ＲＣＭ）的ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶（ｂ５Ｒ）基因突变类型，探讨ＲＣＭ发病的分子基础。方法：逆转录－聚合酶链反应产物直接测序和ｃＤＮＡ克隆测序分析先证者的ｂ５Ｒ编码基因；限制性酶切分析其基因组ＤＮＡ。结果：发现一例ＲＣＭ患者ｂ５Ｒ基因第７２密码子存在新的错义突变（ＣＴＣ→ＣＣＣ）。结论：该突变导致ｂ５Ｒ蛋白第７２位亮氨酸被脯氨酸替换（Ｌ７２Ｐ）是该先证者致病的分子基础；进一步证实Ⅰ型ＲＣＭ患者的ｂ５Ｒ基因突变多发生在近５′端部分。
- 吴玉水黄长晖朱忠勇王瑶王瑶郑培蒸
- 关键词：RCM血红蛋白血症细胞色素B5还原酶
- 外源性野生型P16^(ink4a)基因在兔损伤动脉壁的表达
- 2000年
- 目的 :研究转染外源性野生型P16 ink4a基因逆转录病毒重组质粒对兔颈总动脉壁损伤后再狭窄形成的抑制作用。方法 :构建野生型P16 ink4a基因的复制缺陷型逆转录病毒重组质粒 ,经包装细胞包装后取得高滴度病毒液 ,并以此病毒转染损伤后即刻的兔颈总动脉。应用膜杂交和原位杂交技术检测损伤动脉壁的外源性P16 ink4a基因表达 ,并通过病理学等方法观察动脉内膜增生情况及管腔狭窄程度。结果 :逆转录病毒重组质粒可有效地将外源基因P16 ink4a转入兔体内动脉壁并在其中表达。P16 ink4a基因转染组动物的损伤动脉壁内膜平滑肌细胞增生 (11 80± 3 5 4vs 2 5 2 0± 5 12 ,P <0 0 5 )和管腔狭窄程度 (5 0 2 %± 9 6 0 %vs 82 2 %±12 83% ,P <0 0 5 )均显著低于对照组。结论 :体内转染外源性野生型抑癌基因P16
- 张亚文张国元黄长晖邹祝英
- 关键词：P16^INK4A基因基因表达
- 中国人遗传性高铁血红蛋白血症二个家系所见 Cytb5R 基因 Arg^(57)→Gln 突变被引量：5
- 1997年
- 目的：探明遗传性高铁血红蛋白血症ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶（Ｃｙｔｂ５Ｒ）缺陷的分子机制。方法：用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，克隆３个遗传性高铁血红蛋白血症家系Ｃｙｔｂ５Ｒ９２１ｂｐ的ｃＤＮＡ编码序列，并用限制性酶切ＰＣＲ产物分析３个家系的基因组ＤＮＡ。结果：２个家系存在Ａｒｇ５７→Ｇｌｎ突变，３个家系均未发现Ｇｌｕ２２２→Ｇｌｙ突变。结论：Ａｒｇ５７→Ｇｌｎ突变是中国人遗传性高铁血红蛋白血症的致病原因之一。
- 黄长晖谢毅王瑶王瑶吴玉水朱忠勇
- 关键词：遗传性
- 中国人遗传性高铁血红蛋白血症研究进展被引量：7
- 1999年
- 兰风华王瑶黄长晖吴玉水唐玉钗何菊英谢毅俞秀玲朱忠勇
- 关键词：RCM分子基础
- 转移基因体内表达的时空特异调控
- 1996年
- 转移基因体内表达的时空特异调控黄长晖，傅继梁转基因小鼠作为一种在活体内研究特定基因功能的有用工具在发育遗传学、免疫学和医学遗传学等生命科学领域的应用愈来愈广泛，关于转移至体内的外源基因（简称转移基因）在特定组织或器官中的特异性表达，以及发育过程中特定...
- 黄长晖傅继梁
- 关键词：转移基因
