严稽文
- 作品数：11 被引量：21H指数：3
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 聚醚砜膜对AST生物学行为的影响及ACM对缺氧与机械损伤神经元的保护作用
- 前言星形胶质细胞/(AST/)作为中枢神经系统/(CNS/)内主要的胶质细胞成分之一,在CNS的发育和再生中起着十分重要的作用。研究表明在正常和活化状态下,AST可分泌包括神经营养因子在内的细胞因子多达100余种。其中神...
- 严稽文
- 关键词：星形胶质细胞聚醚砜膜星形胶质细胞条件培养液神经营养因子细胞缺氧
- 文献传递
- BMP2在SVZa神经干细胞向TH^+神经元分化中的作用被引量：3
- 2007年
- 目的研究BMP2对室管膜前下区(anterior subventricular zone,SVZa)神经干细胞分化为TH+(酷氨酸羟化酶)神经元的作用。方法体外培养SVZa神经干细胞,以0、0.1、1、10、20、100(ng/ml)浓度的BMP2分别诱导SVZa神经干细胞分化,通过免疫组化和流式细胞仪技术检测不同浓度下SVZa神经干细胞分化为TH+神经元的比例。结果0.1~100(ng/ml)组的TH+细胞比例均明显高于0ng/ml组,10ng/ml组达最高峰,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论BMP2可以促进SVZa神经干细胞向TH+神经元分化,可以明显提高分化比例。
- 辛志成周政刘俊何家全宋业纯严稽文
- 关键词：神经干细胞BMP2细胞分化
- 星形胶质细胞条件培养液体外诱导胎鼠室管膜前下区神经干细胞向多巴胺能神经元的分化被引量：1
- 2009年
- 背景:在神经干细胞移植治疗神经系统退行性变及修复神经系统功能损伤过程中,有效的神经干细胞体外增殖与多巴胺能神经元的定向诱导分化尤为关键。目的:以星形胶质细胞条件培养液为诱导剂,观察胎鼠室管膜前下区神经干细胞体外向多巴胺能神经元的分化。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2006-12/2007-08在解放军第三军医大学新桥医院实验中心完成。材料:清洁级新生2d龄KM小鼠15只,孕16dWistar大鼠40只,均由解放军第三军医大学实验动物中心提供。方法:采用差速黏附法和振荡分离法纯化培养KM小鼠星形胶质细胞,收集传至第3代、培养5d的星形胶质细胞条件培养液,-20℃冻存待用。体外分离Wistar胎鼠室管膜前下区神经干细胞,加入含B27和碱性成纤维细胞生长因子的DMEM/F12无血清培养基进行原代培养,传至第3代后按0.5×108L-1密度接种,设立2组:对照组单纯加入含体积分数0.1为胎牛血清的DMEM/F12培养基予以自然分化,实验组加入已制备的星形胶质细胞条件培养液进行诱导分化。主要观察指标:免疫细胞化学染色鉴定胎鼠室管膜前下区神经干细胞,流式细胞仪检测胎鼠室管膜前下区神经干细胞向多巴胺能神经元分化的阳性率。结果:培养的神经球细胞表达巢蛋白,可分化为神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白阳性细胞。诱导分化7d后,实验组可见酪氨酸羟化酶阳性细胞,胞体呈圆形或椭圆形,酪氨酸羟化酶位于胞质及突起中;对照组酪氨酸羟化酶阳性细胞在数量、细胞成熟形态上均未达到实验组水平。实验组酪氨酸羟化酶阳性细胞分化率明显高于对照组(t=35.296,P<0.01)。结论:在体外星形胶质细胞条件培养液可显著促进胎鼠室管膜前下区神经干细胞向多巴胺能神经元分化。
- 辛志成周政严稽文
- 关键词：神经干细胞星形胶质细胞条件培养液多巴胺能神经元
- 星形胶质细胞条件培养液对机械损伤神经元的保护被引量：1
- 2007年
- 目的研究体外培养的小鼠星形胶质细胞(Ast)条件培养液(ACM)对机械损伤神经元的保护作用。方法用微量移液器塑料滴头机械性划割培养之神经细胞建立神经元机械损伤模型,神经元培养液加入ACM。用台盼蓝染色计数法测定存活细胞数,测定损伤神经元释放一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)的变化,并与常规培养基组进行对比。结果20%ACM可对机械损伤神经元存活增殖起明显促进作用,并减少机械损伤神经元NO、LDH的生成和分泌。结论ACM对机械损伤神经元的存活有促进作用,可减少其NO、LDH的生成和释放,保护机械损伤神经元。
- 严稽文黄其林
- 关键词：星形胶质细胞条件培养液神经元神经营养因子脑损伤
- Nogo对中枢神经再生与疾病的影响
- 2007年
- 严稽文黄其林
- 关键词：NOGO
- 少突胶质细胞祖细胞高效分离培养及EGFP基因转染
- 2008年
- 目的:建立高效分离少突胶质细胞祖细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)的方法,并转染增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因。方法:采用2次接种培养和差速振荡分离,结合使用神经营养因子(bFGF、PDGF-AA),体外分离纯化和扩增培养OPCs,用抗A2B5、GFAP、CNPase免疫荧光抗体鉴定细胞类型。采用脂质体介导EGFP基因转染OPCs,筛选获得稳定表达EGFP的OPCs细胞。结果:分离培养的OPCs细胞呈A2B5阳性,纯度达到99%,具有增殖和双向分化的潜能(GFAP阳性的2型星形胶质细胞和CNPase阳性的少突胶质细胞),传代培养1个月仍具有增殖能力。EGFP基因转染后OPCs细胞能发出绿色荧光,并继续保持增殖分化特性。结论:二次接种培养和差速振荡分离法可获得高纯度OPCs细胞;EGFP基因转染可作为示踪OPCs迁移的有效方法。
- 陈焕然黄其林杨辉马玉新阴金波张伟严稽文
- 关键词：细胞培养增强型绿色荧光蛋白基因转染
- 星形胶质细胞条件培养液对缺氧损伤神经元的保护作用被引量：10
- 2007年
- 为了探讨星形胶质细胞条件培养液(ACM)对缺氧损伤神经元的保护作用,本实验将新生的KM小鼠的皮层星形胶质细胞分离、纯化并传代培养第三代第5d后,将星形胶质细胞(Ast)条件培养液,加入到缺氧损伤的神经元细胞培养液中,观测其对缺氧神经元的存活及其合成和释放一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)和胞膜ATP酶(ATPase)的影响。结果显示:10%和20%ACM对神经元存活有明显促进作用;与对照组相比,20%ACM还有效地减少了缺氧神经元NO、LDH的生成和分泌,保护和提高了ATPase的活性。以上结果提示ACM促进缺氧神经元的存活,其机制可能与减少NO、LDH合成释放及保护细胞膜上ATPase的活性有关。
- 严稽文黄其林
- 关键词：星形胶质细胞条件培养液神经元神经营养因子细胞缺氧
- 星形胶质细胞条件培养液对缺氧损伤神经元的保护作用
- 目的：研究星形胶质细胞条件培养液(ACM)对缺氧损伤神经元细胞的保护作用.方法：取传代培养第三代第5天的星形胶质细胞(Ast)条件培养液(ACM),加入到缺氧损伤的神经元细胞培养液中,观测其对缺氧神经元的存活及其一氧化氮...
- 严稽文黄其林
- 关键词：神经元缺氧损伤星形胶质细胞神经营养因子细胞保护
- 文献传递
- 聚醚砜膜对星形胶质细胞生物学行为的影响被引量：3
- 2007年
- 目的研究聚醚砜膜对星形胶质细胞(AST)生长、存活增殖及分泌神经营养因子的影响。方法取小鼠皮层组织进行AST原代培养,传代纯化培养后分为3组:A普通培养板组;B聚醚砜膜组;C层粘连蛋白包被膜组,观察和比较细胞形态学、细胞存活增殖能力的变化,同时测定培养基中神经生长因子(NGF)、脑源性生长因子(BDNF)含量。结果在原代和传代培养期,聚醚砜膜上培养第3天后的AST细胞数较其他组明显减少(P<0.05)。在传代培养期,3组的细胞存活增殖能力均在第7天后逐渐衰退,分泌NGF和BDNF的能力也呈相同的下降趋势,聚醚砜膜组AST的变化较另外2组的变化更为明显(P<0.05)。结论聚醚砜膜对星形胶质细胞的存活增殖有一定抑制作用,并降低AST分泌NGF和BDNF的能力,层粘连蛋白可在一定程度上减轻聚醚砜膜对AST功能的抑制作用。
- 严稽文黄其林
- 关键词：星形胶质细胞聚醚砜膜神经营养因子层粘连蛋白
- SVZa神经干细胞诱导分化为多巴胺能神经元的实验研究被引量：5
- 2008年
- 目的研究骨形成蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP2)及星形胶质细胞条件培养液(astrocyte-conditioned medium,ACM)在室管膜前下区(anterior subventricular zone,SVZa)神经干细胞分化为多巴胺能神经元中的作用。方法体外培养SVZa神经干细胞,然后分为对照组、BMP2组、ACM组、BMP2+ACM组,通过免疫组化和流式细胞仪技术检测各组中SV-Za神经干细胞分化为TH+(酪氨酸羟化酶)细胞的比例。结果各实验组的TH+细胞比例均明显高于对照组,其中BMP2+ACM组分化比例最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论BMP2及ACM可以促进SVZa神经干细胞向多巴胺能神经元分化,而且BMP2与ACM有正协同作用。
- 辛志成周政杨辉刘俊何家全宋业纯严稽文
- 关键词：神经干细胞BMP2ACM多巴胺能神经元
