何小周
- 作品数：22 被引量：150H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于一步巢式qPCR法或一步巢式PCR法检测病毒用锁核酸引物及检测试剂盒
- 本发明提供了基于一步巢式qPCR法或一步巢式PCR法检测病毒用锁核酸引物及检测试剂盒，属于肠道病毒检测技术领域。所述锁核酸引物包括上游外引物和下游外引物，所述上游外引物和下游外引物中分别标记有2～6个LNA单体。所述锁核...
- 马学军王佶张益申辛欣何小周
- 文献传递
- 表达SIV Gag/Env基因的DNA疫苗、重组腺病毒和重组痘苗病毒三载体疫苗联合免疫小鼠的细胞免疫研究被引量：2
- 2016年
- 获得性免疫缺陷综合征即艾滋病是人类面临的严重公共卫生威胁,目前常用的药物疗法仍存在一定的缺陷,尚不能彻底治愈AIDS并阻断HIV的传播。将治疗型疫苗用于HIV感染的治疗具有一定的发展潜力,但缺乏适宜的HIV感染动物模型阻碍了治疗型HIV疫苗的研制。SIV能够感染非人灵长动物并引起类似AIDS的猴免疫缺陷病,因而常被用作研究HIV及其疫苗的替代动物模型。为了对SIV疫苗在猴感染模型中治疗SIV感染的效果进行评价,我们分别构建了表达SIV gag和env基因的DNA疫苗、重组腺病毒和重组痘苗病毒疫苗,并联合使用这三种疫苗免疫小鼠,对包括不同抗原组合、不同免疫次序及间隔的免疫策略进行探索和优化。IFN-γ酶联免疫斑点和小鼠体内杀伤试验的结果显示,通过三载体疫苗联合免疫,能够在小鼠体内诱导出强度较高、持续时间较长的SIV Gag/Env特异性细胞免疫反应。并且,重复免疫后仍可以诱导较高水平的免疫反应。该结果为在SIV感染猴模型中评价多载体疫苗序贯和重复免疫治疗SIV感染的研究奠定了基础,也为治疗型HIV疫苗的研究提供了参考。
- 何小周陈丹瑛王琬玓徐柯曾毅冯霞
- 关键词：SIVDNA疫苗重组腺病毒重组痘苗病毒
- 负载Ad5-HIVgag/env的DC疫苗在小鼠体内的免疫原性研究
- 2016年
- 目的 用Ad5-HIV gag/env负载小鼠树突状细胞（Dendritic cell,DC）,探索其在小鼠体内诱导的HIV Gag/Env特异性细胞免疫应答.方法 贴壁法分离纯化BALB/c小鼠DCs,并用细胞因子诱导DC细胞成熟,采用流式细胞术鉴定其纯度.利用重组腺病毒Ad5-HIV gag/env感染DC细胞,制备DC疫苗.用所制备DC疫苗免疫小鼠,在免疫后的不同时间点,用ELISPOT方法检测小鼠体内HIV特异性细胞免疫应答水平.结果 成功培养出Ad5-HIVgag/env负载的DC疫苗;免疫荧光以及流式细胞术检测到Gag/Env抗原可在DC内有效表达;上述DC疫苗免疫小鼠后能诱导高水平HIV特异性细胞免疫反应.结论 Ad5-HIV gag/env负载的树突状细胞疫苗可以在小鼠体内诱导较强的HIV特异性细胞免疫反应.
- 刘超何小周刘雪徐柯曾毅冯霞
- 关键词：树突状细胞疫苗HIV-1HIV-1
- 基于探针导向的重组酶介导的等温扩增法检测SNP位点用探针和试剂盒
- 本发明提供了一种基于探针导向的重组酶介导的等温扩增法检测SNP位点用探针和试剂盒，属于SNP位点检测技术领域。所述基于探针导向的重组酶介导的等温扩增法检测SNP位点用探针，所述探针在重组酶介导的等温扩增法用探针的基础上，...
- 马学军段素霞王佶张益申辛欣何小周
- 文献传递
- HIV-1B/C重组型外膜蛋白env基因序列分析及表型预测
- 2014年
- 目的 克隆并分析HIV-1B/C重组型外膜蛋白env基因序列,根据其氨基酸序列进行表型预测,为疫苗的抗原设计奠定基础.方法 采集北京地区HIV-1 B/C重组型的抗凝全血标本,分离血浆和提取基因组DNA,采用巢式PCR方法扩增rev-env基因,对扩增产物进行序列测定.根据核苷酸序列推导出相应的氨基酸序列,并对重要的Env功能结构域进行深入的分析和比较.结果 从12例B/C重组型HIV-1感染者中成功克隆到7个rev-env基因,序列分析发现其中6个有完整的开放读码框（ORF）,全部为CRF_07B/C重组型.6个Env蛋白氨基酸N糖基化位点和数目没有显著变化;CD4受体结合位点高度保守;根据V3环氨基酸序列及静电荷数目预测全部使用CCR5辅助受体;GP120/GP41剪切位点高度保守,预测所有GP160前体都能有效剪切;对几个已知中和抗体的中和位点分析推测全部的6个序列都对2G12、2F5中和不敏感;对4E10、PG9及PG16中和敏感.结论 有必要进一步阐明env基因型与相关功能的关系,这将为疫苗和药物研究提供依据.
- 汪孟冉陈丹瑛何小周叶景荣余双庆徐柯曾毅冯霞
- 关键词：HIV-1
- HIV-1中国流行株CRF01_AE env基因改造及其重组DNA疫苗的构建被引量：4
- 2014年
- 目的 构建表达含有密码子优化的HIV-1 CRF01_AE亚型env基因的DNA疫苗,为多载体艾滋病治疗性疫苗的应用提供候选疫苗.方法 对HIV-1感染者血液样本进行型别分析,分型得到的AE亚型标本采用亚型特异性引物克隆env基因,通过序列比对获得其共有序列,对该序列按照哺乳动物密码子使用的偏嗜性进行优化,将人工合成的优化基因克隆至pVR载体,构建DNA疫苗.通过Western Blot方法比较优化前后env基因的表达.结果 成功获得32条具有完整的开放性阅读框的env克隆,型别分析确认均为CRF01_AE亚型.成功对其共有序列进行了优化、合成并构建了DNA疫苗pVR-mod.AE env,该疫苗与野生型的env基因（wt.AE env）相比可以高水平表达env基因,且不依赖Rev的存在.结论 对HIV-1中国流行株CRF01_AE env基因的优化改造及重组DNA疫苗的构建是成功的.
- 陈丹瑛汪孟冉何小周叶景荣余双庆李秦剑徐柯曾毅冯霞
- 关键词：艾滋病疫苗密码子
- 多重RAP结合磁珠富集检测血流感染病原体的引物探针组及试剂盒
- 本发明属于微生物检验技术领域，涉及多重RAP结合磁珠富集检测血流感染病原体的引物探针组及试剂盒。本发明提供了多重RAP结合磁珠富集检测血流感染病原体的引物探针组，所述血流感染病原体包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不...
- 马学军申辛欣张瑞卿何小周赵子今
- 重组HIV-AEgp145和SIV-envT基因的rAAV8在小鼠体内的免疫原性研究
- 2021年
- 病毒性载体疫苗是一种有前途的艾滋病疫苗。为了构建以重组腺相关病毒8型(recombinant adeno associated virus type 8,rAAV8)为载体,表达HIV或SIV包膜蛋白的艾滋病疫苗。同时在小鼠体内对其免疫原性进行评价,为下一步研究奠定基础。本研究分别构建了表达HIV AE亚型和SIV mac239株包膜蛋白(不含胞内区)的rAAV8-AEgp145和rAAV8-SIVenvT两种重组病毒,并通过PCR和Western Blot方法对重组病毒进行了体外鉴定。将两种重组病毒分别接种BALB/c小鼠,应用ELISA和ELISPOT方法检测小鼠的HIV/SIV特异性抗体滴度和细胞免疫应答强度。结果显示,rAAV8能够在293T细胞中高效表达HIV AEgp145和SIV envT基因。小鼠接种两种重组病毒3-5W后,均能检测到gp120特异性抗体和env特异性细胞免疫应答,并且在16-20W后反应强度仍显著高于对照组。以上结果提示,携带HIV AEgp145和SIV envT基因的rAAV8载体能够在小鼠体内诱导中等强度并且持续时间较长的特异性体液和细胞免疫应答。
- 何小周杨靖李红霞郝彦哲冯霞马学军
- 关键词：体液免疫人类免疫缺陷病毒
- 含密码子优化的SIV gag基因的DNA疫苗与rAd5疫苗构建及免疫原性评价被引量：3
- 2014年
- 目的 构建含有SIVgag基因的DNA疫苗和重组腺病毒疫苗,为后期在SIV感染的猴模型中进行多载体疫苗联合免疫策略的治疗效果评价奠定基础.方法 将SIV gag基因按照哺乳动物偏嗜密码子进行优化并构建至pVR载体,作为DNA疫苗.以Western Blot方法比较优化前后gag基因表达水平.将优化后的gag基因插入重组腺病毒载体,构建rAd5-SIVgag疫苗.在BALB/c小鼠中分别比较DNA疫苗及rAd5-SIV.gag疫苗单独及联合免疫的效果.结果 密码子优化的SIVgag基因的表达水平远高于野生型SIVgag基因.重组腺病毒疫苗免疫一次或两次诱导的细胞免疫反水平分别高于DNA疫苗免疫一次或两次.两种疫苗联合免疫的反应水平与腺病毒疫苗免疫两次的水平相当,高于DNA疫苗单独免疫及腺病毒疫苗单独免疫一次的结果.结论 成功优化了SIV gag基因,使其不依赖Rev高水平表达；成功构建了表达优化后SIV gag基因的DNA疫苗和rAd5疫苗,可以在小鼠体内诱导较强的gag基因特异性CTL应答.
- 陈丹瑛何小周汪孟冉余双庆徐柯李秦剑曾毅冯霞
- 关键词：艾滋病疫苗腺病毒科
- 基于探针导向的重组酶介导的等温扩增法检测SNP位点用探针和试剂盒
- 本发明提供了一种基于探针导向的重组酶介导的等温扩增法检测SNP位点用探针和试剂盒，属于SNP位点检测技术领域。所述基于探针导向的重组酶介导的等温扩增法检测SNP位点用探针，所述探针在重组酶介导的等温扩增法用探针的基础上，...
- 马学军段素霞王佶张益申辛欣何小周
