傅兴伦
- 作品数：14 被引量：25H指数：3
- 供职机构：济南军区联勤部更多>>
- 发文基金：青岛市公共领域科技支撑计划项目山东省博士后创新项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学军事更多>>
- 猪重组γ干扰素对仔猪外周血淋巴亚群及IL-2、IFN-γ水平影响的研究
- 选28日龄健康仔猪16头,随机分为4组.1组为对照组,肌肉注射生理盐水;2-4组为试验组,分别肌注重组猪IFN-γ注射液(rpoIFN-γ)4万单位/头、40万单位/头、400万单位/头.研究rpoIFN-γ对猪外周血T...
- 马凤龙李涛李春荣傅兴伦刘焕珍朱连勤乔彦良
- 关键词：断奶仔猪免疫增强剂
- 文献传递
- 重组胸腺素α1在大肠杆菌中的表达与活性检测
- 重组胸腺素alpha 1(Tα1)基因在大肠杆菌中进行表达。根据大肠杆菌密码子偏爱性合成Tα1基因并连接到pMD18-T载体上,双酶切回收的Tα1插入到pET32a后,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导,经15%SDS-...
- 马凤龙崔雪志傅兴伦刘焕奇
- 关键词：胸腺素Α1大肠杆菌可溶性表达淋巴细胞增殖
- 文献传递
- 蛋鸡α-干扰素基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达与复性研究被引量：1
- 2007年
- 根据GenBank中鸡IFN—α序列设计引物对，利用PCR技术克隆并测定了莱航鸡（SPY）的IFN-α基因，命名ChIFN-S1，与GenBank中IFN-α比较，ORF长度均为582个核苷酸，其成熟肽包含162个氨基酸，相互间同源性在98．8％-99．8％。将其成熟肽基因序列克隆入pQE30表达载体后，通过ITPG诱导，收集菌体高压破碎后提取包涵体并进行初步纯化，利用胱氨酸．半胱氨酸再氧化还原法对纯化后的变性液进行分段稀释法复性。细胞病变抑制法（CEF-VSV为检测系统）测定复性液的抗病毒比活性高达10^9U／mg以上．
- 马凤龙傅兴伦乔彦良李春荣李朝阳刘焕珍
- 关键词：包涵体复性
- 人兽共患病的危害、原因、特点及预防控制被引量：9
- 2007年
- 人兽共患病是指人和脊椎动物由共同病原体引起的,又在流行病学上有关联的疾病.目前世界上约有200多种动物传染病和150多种寄生虫病通过动物或动物产品直接或间接传染给人类.我国现有畜禽传染病202种,其中1/2以上为人兽共患病.近年来,人兽共患病在世界流行活跃,新人兽共患病不断爆发,老人兽共患病再度肆虐,使国际社会面临着共同威胁与挑战,已成为各国政府和有关国际组织高度关注的重大公共卫生安全问题.本文就人兽共患病的危害、原因、特点及防控对策作一概述.
- 傅兴伦
- 关键词：人兽共患病
- 野生动物与人兽共患病的关系及该病的防控被引量：1
- 2008年
- 新发和重现人兽共患传染病自上世纪末以来就已引起人们越来越广泛的重视。据有关学者和专家估计有75％以上的新发人兽共患病来源于动物。而来源于野生动物的占相当大的比重。它不仅影响人类健康和农业生产，同时也威胁着社会经济的稳定和生态安全。野生动物与人类具有不可分割的渊源关系，人们与其发生接触。有时也成为创造价值的商品和科学研究的重要对象。有的国家开展野生动物旅游业赚取外汇，有的国家开展与野生动物相关的产业产生巨大的经济效益，有的国家开展狩猎活动可创造巨大的经济效益和大量的就业岗位等。人类与野生动物接触的机会增多，加上引进宠物的趋势日渐加大，从而增加了人兽共患病的再现和新发。
- 傅兴伦马风龙
- 关键词：野生动物动物源性疾病
- 猪伪狂犬病病毒LY株gD基因的克隆与核酸疫苗研究被引量：3
- 2008年
- 将伪狂犬病病毒LY株的免疫糖蛋白基因(gD基因)分别克隆到核酸疫苗载体pIRESneo、pEGFP-C1的多克隆位点上,成功地构建了含有相应目的基因的重组质粒pIgD、pFgD和PRRSVLX-1株的E基因的双基因共表达二联核酸疫苗质粒pID-E。将构建的各核酸疫苗质粒,通过脂质体法分别转染到BHK-21细胞中,经ELISA检测所有目的蛋白均得到表达,表达产物也均具有一定的反应原性。小鼠免疫试验证实这些核酸疫苗质粒具有很好的免疫原性,能诱导小鼠产生特异性抗体,第3次免疫后,抗体阳性率为100%,pIgD抗体效价均不低于1∶160,最高可达1∶640。pIE与pIgD的联合应用时,不影响各自特异性抗体的产生。构建的含有PRRSVE基因和PRVgD基因的双基因共表达质粒pID-E,脂质体转染BHK-21细胞后,经ELISA检测,相应的PRRSV和PRV的目的蛋白均获得了瞬时表达;小鼠免疫试验表明E和gD2种糖蛋白基因能在小鼠体内共表达,且能诱导免疫小鼠产生针对PRRSV和PRV的相应中和抗体。上述研究为进一步探讨PRRSVE蛋白及PRVgD蛋白的免疫生物学特性,进而为开展PRRSV与PRV相关基因在哺乳动物细胞中的联合表达及基因免疫提供理论基础。
- 马凤龙王文成向华傅兴伦赵怀龙马振宇宣华
- 关键词：猪伪狂犬病病毒GD基因核酸疫苗
- 重组胸腺素α1在大肠杆菌中的表达与活性检测
- 重组胸腺素alpha 1(Tα1)基因在大肠杆菌中进行表达。根据大肠杆菌密码子偏爱性合成Tα1基因并连接到pMD18-T载体上，双酶切回收的Tα1插入到pET32a后，转化大肠杆菌BL21，IPTG诱导，经15％SDS-...
- 马凤龙崔雪志傅兴伦刘焕奇
- 关键词：大肠杆菌可溶性表达活性检测
- 文献传递
- 相思子毒素单克隆抗体的制备纯化及鉴定
- 2010年
- 目的制备相思子毒素单克隆抗体并鉴定其特性。方法以甲醛处理的相思子毒素毒蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠;取免疫小鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA法筛选、融合细胞有限稀释法克隆、克隆化杂交瘤细胞株的亚类鉴定等方法筛选出单克隆抗体杂交瘤细胞株,用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行单抗的纯化,并对单克隆抗体的特异性进行鉴定。结果获得了4株可稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞2D3、4E6、1C8和1E5,诱生的腹水效价分别为1∶1×107、1∶1×106、1∶1×105、1∶1×106,亚类鉴定表明2D3为IgG1,其余3株均为IgG2b;特异性鉴定显示它们与多种毒素均无交叉反应,经过亲和层析,获得了纯化的单抗。结论获得了特异性的相思子毒素单克隆抗体,为建立相思子毒素的检测及纯化方法奠定了基础,其中4E6的效价最高,可作为检测相思子毒素的核心试剂。
- 张立营赵怀龙马凤龙傅兴伦孙英姿高波
- 关键词：单克隆抗体
- 牛乳素Lfcin B基因的合成及其在酵母菌中的表达研究被引量：6
- 2008年
- [目的]为临床研究和治疗某些病原微生物引起的感染提供依据。[方法]参照LfcinB的氨基酸序列,利用化学合成法合成LfcinB基因并克隆到pPIC9K载体中,转化到酵母菌GS115感受态细胞中,用抗性选择标记G418筛选出高拷贝酵母菌转化子。利用甲醇诱导表达重组LfcinB,经Tricine-SDS-PAGE电泳检测目的蛋白牛乳铁蛋白素的表达情况,同时通过体外抑菌试验检测表达产物的抑菌活性。[结果]提取的酵母菌DNA扩增出1条预期的560bp左右的特异性条带。目的基因已经成功克隆到pPIC9K载体中,并转到酵母菌GS115中而且获得了表达。重组酵母表达上清中牛乳铁蛋白素抗菌肽对沙门氏肠炎杆菌的抗菌活性为42.857IU/ml,表明LfcinB基因的酵母表达载体构建成功。[结论]该研究证明利用化学合成法直接合成编码LfcinB的DNA构建真核表达载体、通过生物发酵工程来制备LfcinB是可行的。
- 马凤龙张瑜刘焕珍乔彦良傅兴伦李朝阳
- 关键词：基因表达抑菌活性
- 相思子毒素双抗夹心ELISA检测方法的建立与评价被引量：2
- 2010年
- 目的建立相思子毒素双抗夹心ELISA检测方法并进行方法学评价。方法优化最佳相思子毒素多抗包被浓度后建立了相思子毒素双抗夹心ELISA检测方法,鉴定其检测灵敏度、线性范围、特异性、重复性、回收率等。结果双抗夹心ELISA方法检测相思子毒素的最小检出限为1ng/mL,标准曲线在10～100ng/mL范围内线性良好。血清中加入已知量的标准毒素蛋白,测得平均回收率为89%。结论本方法检测相思子毒素的可测范围广、特异性强、灵敏度高、变异系数较小,表明其灵敏、特异、可靠。
- 张立营孙英姿赵怀龙傅兴伦
- 关键词：双抗体夹心ELISA
