- 细菌性脑膜炎患者脑脊液细菌基因组DNA的提取及16S rDNA的鉴定被引量：7
- 2013年
- 目的探讨16SrDNA聚合酶链式反应(PCR)在细菌性脑脊液病原菌检查中的应用价值。方法收集临床疑诊为细菌性脑膜炎的患者脑脊液标本,高速离心富集细菌后,进行脑脊液中细菌基因组DNA的提取,再进行16SrD-NA PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳。将检测结果与传统的细菌培养结果进行比较。结果 58例患者脑脊液样本中,23例16SrDNA PCR阳性,阳性率为39.7%;58例脑脊液样本中细菌培养阳性为10例,阳性率为17.2%。PCR检测阳性率明显高于传统的细菌分离培养法(P<0.05)。结论脑脊液细菌基因组DNA提取及16SrDNA PCR鉴定技术操作简单,耗时短,灵敏度高,在细菌性脑膜炎病原学诊断方面具有良好的应用前景。
- 梁志娟侯晓霖王振海刘爱翠
- 关键词：细菌性脑膜炎脑脊液RDNAPCR扩增
- 全基因组测序用于宁夏羊种3型布鲁氏菌毒力基因筛选的研究
- 2014年
- 目的从3株布鲁氏菌分离株的全基因组序列中筛选出可能导致脑损害的关键毒力基因,为后续筛选布鲁氏菌致脑损害毒力基因的研究奠定基础。方法通过BCSP31PCR、传统生化实验对3株分离于布鲁氏菌病患者外周血中的布鲁氏菌进行鉴定分型。利用Illumina Hiseq2000平台对3株布鲁氏菌进行全基因组测序与比较基因组学分析,根据文献报道分析筛选出布鲁氏菌的经典毒力基因,通过检索NCBI核酸数据库查找出所选毒力基因的参考序列,利用所选参考序列分别与3株布鲁氏菌全基因组序列做BLAT比对分析。结果3株布鲁氏菌经BCSP31PCR、传统生化实验鉴定为羊种3型;比较基因组分析显示3株布鲁氏菌与标准株参考序列的同源性比例均达到99.02%。BLAT比对分析发现所选毒力基因wbkA、pgm、hemolysin、hemolysin III和Omp25在这3株布鲁氏菌全基因组序列中的比对分数均达到99%以上。结论本研究所选取的3株羊种3型布鲁氏菌的全基因组中存在经典的毒力基因序列。
- 汪超刘爱翠马巧丽詹军王振海
- 关键词：布鲁氏菌毒力基因全基因组测序
- pEGFP-N1-omp25荧光真核表达载体的构建及鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的克隆布鲁氏杆菌外膜蛋白omp25基因并构建荧光真核表达载体p EGFP-N1-omp25,检测其在大鼠脑内的表达。方法根据Genebank中omp25基因的核苷酸序列,设计并合成1对引物,以布鲁氏杆菌总基因组DNA为模板,进行PCR扩增得到omp25基因片段,并将omp25基因片段及质粒p EGFP-N1分别进行进行酶切、体外连接,使其定向重组,构建其重组质粒。将制备的重组质粒经侧脑室注射至大鼠,检测p EGFP-N1-omp25在大鼠脑内的表达。结果 PCR扩增出642bp大小的片段,挑取的LB固体培养基上的单菌落经菌液PCR、酶切、测序表明成功构建了p EGFP-N1-omp25荧光真核表达载体。质粒经大鼠侧脑室注射后,脑组织冰冻切片可见荧光表达。结论采用体外重组技术,成功构建了布鲁氏杆菌外膜蛋白omp25基因的真核表达载体,且重组质粒在大鼠脑组织内成功表达。
- 马巧丽刘爱翠王妍柏汪超王振海
- 关键词：布鲁氏杆菌侧脑室注射
- 羊种布鲁氏菌外膜蛋白Omp31对小胶质细胞的影响及其分子机制研究
- 目的：构建布鲁氏菌外膜蛋白Omp31的原核重组质粒pET-30a-omp31，表达并纯化Omp31融合蛋白，通过检测Omp31融合蛋白刺激小鼠小胶质细胞后细胞因子TNF-α、IL-6及HMGB1的分泌情况及TLR4 mR...
- 刘爱翠
- 关键词：布鲁氏菌原核表达载体小胶质细胞高迁移率族蛋白1中枢神经系统损伤
- 文献传递
- 颈椎MRI表现为“蛇眼征”的连枷臂综合征1例报告
- 2017年
- 连枷臂综合征（FAS）是一种散发的缓慢进展的运动神经元病。现报道1例颈椎MRI表现为＂蛇眼征＂的患者如下。1病例男,20岁,因＂右上肢无力3年,加重伴左上肢无力10个月＂于2015年10月19日入院。患者于2012年夏天发现右上肢举重物时费力,不举重物时无力不明显,同时家属发现其双上肢较细,右上肢明显,余肢体活动无障碍,
- 刘爱翠马斌武刘玉娇杨燕文杜彦辉
- 关键词：腋神经肌皮神经神经电生理检查
- 抑制lncRNA TUG1下调核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白1炎症小体在延缓阿尔茨海默病进展的作用
- 2024年
- 目的探讨敲低长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)抑制核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白1(NLRP1)炎症小体在缓解阿尔茨海默病进展中的作用。方法选取9~10周龄遗传背景为C57/BL6的野生型小鼠(WT组,10只)或淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)转基因小鼠(30只)。APP/PS1转基因小鼠随机分为模型(model)组,模型+敲低lncRNA TUG1组[model+lncRNA TUG1短发夹RNA(shRNA)组]和model+shRNA非靶标(NT)组,每组10只。分别采集12周龄第1天(3月龄)和32周龄第1天(8月龄)小鼠外周血和脑皮质组织,并分离皮质中的原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞,每个时间点每组5只小鼠。Real-time PCR分别测定3月龄和8月龄上述4个分组小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和巨噬细胞移动抑制因子(MIF)mRNA的水平,以及原代星形胶质细胞中补体蛋白C1r和C1s mRNA的水平。ELISA法测定其外周血浆中MIF含量。对3月龄和8月龄小鼠脑皮质原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞共培养。CCK-8法测定上述2种细胞的增殖能力。Western blotting分别测定3月龄和8月龄上述4个分组小鼠脑皮质组织中MIF、白细胞介素1β前体(pro-IL-1β)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Caspase-1(p20)、Caspase-1(full)、NLRP1及NLRP3蛋白的表达水平。采用免疫荧光染色法测定8月龄各分组小鼠脑皮质组织中β淀粉样蛋白(Aβ)表达。结果3月龄和8月龄时,与WT组小鼠相比,model组小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和MIF相对表达水平显著上调,原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞增殖能力增强(P<0.05)。与model组相比,model+lncRNA TUG1 shRNA组小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和MIF的相对表达水平显著降低,原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞增殖能力降低(P<0.05)。与WT组相比,model组小鼠外周血浆中MIF含量显著升高;小鼠脑皮质组织中pro-IL-1β、ASC、Caspase-1(p20)、Casp
- 马婷婷陈建红刘爱翠李海宁
- 关键词：阿尔茨海默病巨噬细胞移动抑制因子免疫印迹法
- 人尿激肽原酶治疗急性脑梗死30例临床观察被引量：6
- 2008年
- 目的:观察人尿激肽原酶(尤瑞克林)在急性脑梗死治疗中的有效性和安全性。方法:对30例急性脑梗死患者给予单用尤瑞克林治疗2周,治疗前后以NIHSS、mRS量表评价疗效。结果:治疗后30例患者NIHSS评分低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);mRS评分低于治疗前,有显著性差异(P<0.01)。基本痊愈4例,显著进步16例,进步5例,无变化4例,恶化1例,总显效(基本痊愈+显著进步)20例。出现恶心呕吐者2例,转氨酶增高者1例,所有治疗未见血压明显下降(下降>30%)。血尿常规、血糖、血脂、肾功能未见明显变化。结论:应用尤瑞克林治疗急性脑梗死安全且临床疗效肯定。
- 刘春虹刘爱翠陈建红李小磊侯晓霖范学文李勇军张庆吕洁杜彦辉
- 关键词：尤瑞克林急性脑梗死有效性安全性
- 羊布鲁氏菌外膜蛋白Omp31的基因克隆、原核表达及其对小胶质细胞凋亡的影响
- 2017年
- 目的本研究旨在构建布鲁氏菌外膜蛋白Omp31的原核重组质粒pET-30a-omp31,表达并纯化Omp31融合蛋白,初步探讨布鲁氏菌外膜蛋白Omp31对小胶质细胞凋亡的影响。方法对羊种布鲁氏菌Omp31基因进行PCR扩增,并将其定向克隆到原核表达载体pET-30a上,构建原核表达重组质粒pET-30a-omp31,表达、纯化布鲁氏菌Omp31融合蛋白,并用Omp31融合蛋白刺激小鼠小胶质细胞株BV2,利用流式细胞术分析其对小胶质细胞凋亡的影响。结果经过双酶切及测序验证证明成功构建了Omp31基因的原核表达载体pET-30a-omp31,将其进行蛋白的诱导表达、纯化,得到了较纯的Omp31融合蛋白,其融合蛋白的分子量为31kDa左右。将Omp31蛋白刺激小鼠小胶质细胞,发现不同浓度Omp31蛋白刺激组的细胞凋亡率均低于空白对照组(P<0.05)。结论通过基因克隆技术成功构建了Omp31基因的原核表达载体pET-30a-omp31,并对其进行蛋白诱导表达、纯化、复性后得到了Omp31融合蛋白,Omp31融合蛋白能够抑制小胶质细胞的凋亡。
- 刘爱翠刘静怡马巧丽王振海
- 关键词：布鲁氏菌原核表达载体
- 针灸联合奥拉西坦治疗脑出血的疗效及对患者神经功能和炎性因子的影响被引量：6
- 2020年
- 目的:探讨脑出血患者经针灸联合奥拉西坦治疗后的临床疗效。方法:选取2015年2月2018年7月期间我院收治的90例脑出血患者,根据随机数字表法将患者分为对照组(n=45)和研究组(n=45),对照组给予奥拉西坦治疗,研究组在对照组的基础上联合针灸治疗,比较两组临床疗效、血肿体积、脑水肿体积、神经功能及炎性因子水平,记录两组治疗期间不良反应情况。结果:研究组治疗2个疗程后的临床总有效率为91.11%(41/45),高于对照组的71.11%(32/45)(P<0.05)。治疗2个疗程后,两组患者的简易精神状态量表(MMSE)评分升高,且研究组高于对照组(P<0.05);两组患者美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分降低,且研究组低于对照组(P<0.05);两组白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)均下降,且研究组低于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率对比无差异(P>0.05)。与治疗第1 d相比,两组治疗第7 d、治疗第28 d血肿体积呈先增大后缩小趋势(P<0.05),脑水肿体积呈持续缩小趋势(P<0.05);研究组治疗第28 d血肿体积、脑水肿体积小于对照组(P<0.05)。结论:针灸联合奥拉西坦治疗可有效改善脑出血患者的临床症状,减轻炎症反应及神经功能损害,安全性较好。
- 马婷婷马博雅陈建红王旭刘爱翠
- 关键词：针灸脑出血疗效神经功能炎性因子
- 神经型布鲁氏杆菌病临床分析被引量：2
- 2016年
- 目的分析探讨神经型布鲁氏杆菌病的临床特点,提高临床医师对本病的诊断水平。方法回顾性分析6例神经型布鲁氏杆菌病病例临床资料。结果此组资料中6例患者男女比例为5∶1,病程10 d^8个月,4例急性起病,2例亚急性起病;4例有牛羊接触史,1例经常接触屠宰工人;患者均有发热,其他主要症状有头痛5例。4例行腰椎穿刺,3例腰穿压力升高,脑脊液细胞学结果以淋巴细胞反应为主。3例脑脊液培养阳性,均为羊种布鲁氏杆菌。5例布鲁氏杆菌凝集实验阳性;6例患者血常规无明显感染征象。结论神经型布鲁氏杆菌病临床表现多样,以发热、头痛为主要临床症状,实验室检查及影像学表现不典型,脑脊液培养阳性率低,临床易误诊,故早发现、早用药、足疗程治疗可改善患者预后。
- 马元元马晓娟刘爱翠王研柏王振海
- 关键词：布鲁氏杆菌发热脑脊液
