吴东海
- 作品数：12 被引量：8H指数：2
- 供职机构：怀化学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省重点学科建设项目湖南省教育厅优秀青年基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人C1q/TNFα相关蛋白-6的表达、纯化及生物活性分析被引量：1
- 2015年
- 目的利用大肠杆菌表达可溶性h CTRP6蛋白并分析其活性。方法重组载体转化大肠杆菌表达菌株、IPTG诱导表达、纯化后测定活性。结果 Trx-h CTRP6蛋白在大肠杆菌中高效表达,经镍亲合纯化和分子筛纯化,Trx-h CTRP6在细胞和动物水平上都有生物活性。结论利用大肠杆菌表达系统高效制备了具有生物活性的Trx-h CTRP6蛋白。
- 李洪波高学飞李娜吴东海
- 关键词：重组蛋白蛋白印迹
- C1q/TNFα相关蛋白-2球状功能区的表达、纯化及活性分析被引量：1
- 2014年
- 目的利用大肠杆菌表达可溶性的hCTRP2球状功能区蛋白。方法重组表达载体转化大肠杆菌BL21-codonplus(DE3)菌株、IPTG诱导表达,并利用镍亲合纯化和分子筛纯化。结果 hCTRP2球状功能区蛋白实现了在大肠杆菌中的高效表达和纯化,重组蛋白在细胞和动物水平上都具有生物活性。结论利用大肠杆菌表达系统高效制备了具有生物活性的hCTRP2球状功能区蛋白。
- 李洪波胡兴李娜吴东海
- 关键词：C1Q重组蛋白
- 人脂联素受体1和2的真核表达被引量：2
- 2006年
- 目的扩增和表达人脂联素受体1(AdipoR1)和人脂联素受体2(AdipoR2)基因。方法利用RT-PCR方法扩增AdipoR1和AdipoR2全长cDNA,将AdipoR1和AdipoR2的cDNA构建到真核表达载体pcDNA3.1,重组质粒转染HEK293细胞,通过免疫荧光技术标记HEK293细胞的AdipoR1和AdipoR2融合蛋白,共聚焦显微镜观察AdipoR1和AdipoR2在细胞中的定位。结果成功构建真核表达重组质粒pcDNA3.1-adipoR1和pcDNA3.1-adipoR2,重组质粒转染HEK293细胞后,定位于HEK293细胞膜上。结论AdipoR1和AdipoR2重组质粒的构建和在HEK293细胞中的成功表达,为进一步研究其与胰岛素抵抗的关系创造了条件。
- 张烁刘瑜吴东海胡仁明李益明
- 关键词：脂联素受体1脂联素受体2融合蛋白胰岛素抵抗
- 重组毕赤酵母高密度发酵表达活性hCTRP2的研究被引量：3
- 2013年
- 目的利用毕赤酵母,高密度发酵表达重组hCTRP2蛋白。方法采用高密度发酵表达hCTRP2蛋白并利用镍亲合层析进行纯化,在细胞与动物水平测定其生物活性。结果每升发酵液上清可分泌560 mg总蛋白,利用镍亲合层析从100 ml发酵液上清中纯化得到10.4 mg的rhCTRP2蛋白,rhCTRP2蛋白在细胞及动物水平都表现出活性。结论利用酵母高密度发酵实现了活性hCTRP2蛋白的高效表达和纯化。
- 李洪波吴东海
- 关键词：C1Q毕赤酵母高密度发酵
- C1q/TNFα相关蛋白-1功能区的表达、纯化及生物活性分析被引量：1
- 2015年
- 目的:利用大肠杆菌表达可溶性hCTRP1球状功能区蛋白并分析其生物活性。方法:重组质粒转化大肠杆菌BL21-codonplus(DE3)菌株、IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导表达并纯化。结果:hCTRP1球状区蛋白实现在大肠杆菌中的高水平表达,利用镍亲合纯化和分子筛纯化到重组蛋白,重组蛋白在细胞和动物水平上都具有生物活性。结论:利用大肠杆菌表达系统高效制备了具有生物活性的hCTRP1球状功能区蛋白。
- 李洪波李娜吴东海
- 关键词：重组蛋白
- 人类APPL2蛋白PTB结构域的表达纯化及其功能的研究
- 2009年
- APPL蛋白,包括APPL1和APPL2,是细胞膜与细胞核之间重要的信息传递者,同时也为细胞增殖所必需。在大肠杆菌表达体系中,表达并纯化了人类APPL2蛋白PTB结构域,然后以此为靶标,利用噬菌体展示技术筛选相互作用肽段。经过3轮筛选,随机挑取48个噬菌体单克隆,进行ELISA分析。7肽序列ERLPFFY和YLTSPKH被证明能与PTB结构域特异地结合。对P3-GST的野生型和将每个氨基酸突变为丙氨酸的突变型的ELISA检测,显示每个氨基酸均是结合所必需的。这些对有关APPL2的PTB结构域功能的进一步研究有参考意义。
- 梁宁石珠亮王东业魏国威孔祥平陈昌友刘劲松徐爱民吴东海
- 关键词：PTB纯化噬菌体展示
- 一种人补体C1q/TNFα相关蛋白‑2（hCTRP2）的抗原肽及其抗体
- 本发明公开了一种人补体C1q/TNFα相关蛋白‑2（hCTRP2）的抗原肽及其抗体，主要包括以下步骤：合成C1q/TNFα相关蛋白‑2的N‑端及C‑端抗原肽各一段，将抗原肽分别与牛血清白蛋白（BSA）和钥孔血蓝蛋白（KL...
- 李洪波吴东海胡兴
- 文献传递
- 水翁花提取物的PPARγ配体活性鉴定被引量：1
- 2008年
- [目的]鉴定水翁花提取物2,4-二羟基-6-甲氧基-3,5-二甲基查耳酮(DMC)的PPARγ配体结合活性及其特点。[方法]用GAL4嵌合体报告基因试验检测DMC的PPARγ配体结合活性;用油红O染色法检测DMC对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响;用[3H]-2-脱氧葡萄糖摄取试验检测DMC对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取的影响;用荧光实时定量PCR检测经DMC处理的3T3-L1脂肪细胞中PPARγ靶基因的表达情况。[结果]DMC能以剂量依赖型的方式对PPARγ产生激活作用,促进脂肪细胞的分化,显著提高脂肪细胞的葡萄糖摄取率,并且提高脂肪细胞中一些PPARγ靶基因的表达量。[结论]DMC能通过激活PPARγ促进脂肪细胞的葡萄糖摄取。
- 金晓辉魏孝义黄志伟吴东海
- 关键词：PPARΓ葡萄糖摄取
- 一种人补体C1q/TNFα相关蛋白-2(hCTRP2)的抗原肽及其抗体
- 本发明公开了一种人补体C1q/TNFα相关蛋白-2（hCTRP2）的抗原肽及其抗体，主要包括以下步骤：合成C1q/TNFα相关蛋白-2的N-端及C-端抗原肽各一段，将抗原肽分别与牛血清白蛋白（BSA）和钥孔血蓝蛋白（KL...
- 李洪波吴东海胡兴
- 文献传递
- 人C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-1高特异性抗体的制备
- 2014年
- 目的制备人补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白1(hCTRP1)的特异性抗体。方法合成了hCTRP1的C端抗原肽并免疫新西兰大白兔,利用亲合纯化色谱柱对抗体进行了纯化。结果间接ELISA测定表明,抗血清效价达1∶64 000,Western印迹及ELISA验证表明纯化抗体具有很高的特异性。结论人工合成的hCTRP1抗原肽免疫新西兰大白兔,制备了高效价的抗血清,并纯化制备了hCTRP1特性抗体。
- 李洪波吴东海
- 关键词：抗原肽多克隆抗体
